引言 | 第1-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-41页 |
1.1 猪胰激肽释放酶(胰K)简介 | 第13-16页 |
1.1.1 胰K的发现 | 第13页 |
1.1.2 胰K的分布 | 第13-14页 |
1.1.3 猪胰激肽释放酶(胰K)化学组成与结构 | 第14-15页 |
1.1.4 胰K的理化性质 | 第15-16页 |
1.2 猪胰激肽释放酶(胰K)的生理功能 | 第16-18页 |
1.2.1 对血管的效应 | 第16-17页 |
1.2.2 对平滑肌的影响 | 第17页 |
1.2.3 诱发炎症 | 第17页 |
1.2.4 其它 | 第17-18页 |
1.3 猪胰激肽释放酶(胰K)临床用途 | 第18-25页 |
1.3.1 基本原理 | 第18-20页 |
1.3.2 激肽释放酶治疗糖尿病的研究 | 第20-21页 |
1.3.3 激肽释放酶的临床应用研究新进展 | 第21-25页 |
1.3.3.1 血浆激肽释放酶对凝血过程的影响 | 第21-22页 |
1.3.3.2 肾激肽释放酶对高血压的影响 | 第22-23页 |
1.3.3.3 胰腺、颌下腺、创伤组织激肽释放酶对细胞繁殖的影响 | 第23-24页 |
1.3.3.4 性腺激肽释放酶对生殖生理影响 | 第24页 |
1.3.3.5 总结 | 第24-25页 |
1.4 激肽释放酶活性测定 | 第25-27页 |
1.4.1 生物活性测定 | 第25-26页 |
1.4.1.1 犬血压下降法或血流量增加法 | 第25页 |
1.4.1.2 豚鼠回肠收缩效应 | 第25-26页 |
1.4.2 化学活性测定 | 第26-27页 |
1.4.2.1 253nm吸收值增值法 | 第26-27页 |
1.4.2.2 pH滴定法 | 第27页 |
1.4.2.3 醇脱氢酶法 | 第27页 |
1.4.2.4 MBTH法 | 第27页 |
1.5 研究目的和意义 | 第27-29页 |
1.6 猪胰激肽释放酶(胰K)纯化工艺研究开发现状 | 第29-32页 |
1.6.1 单产激肽释放酶工艺 | 第29-30页 |
1.6.2 激肽释放酶联产工艺 | 第30-32页 |
1.7 蛋白质纯化技术 | 第32-40页 |
1.7.1 生物产品与下游加工 | 第32-34页 |
1.7.2 盐析法简介 | 第34-36页 |
1.7.3 疏水层析技术简介 | 第36-40页 |
1.7.3.1 高效疏水层析技术原理 | 第37-39页 |
1.7.3.2 高效疏水层析技术实验影响因素 | 第39-40页 |
1.8 本论文设计思路 | 第40-41页 |
第二章 硫酸铵溶液提取猪胰粗品中的激肽释放酶 | 第41-53页 |
2.1 引言 | 第41-42页 |
2.2 材料和方法 | 第42-46页 |
2.2.1 材料 | 第42-43页 |
2.2.2 实验方法 | 第43-46页 |
2.2.2.1 蛋白浓度测定 | 第43-44页 |
2.2.2.2 胰激肽释放酶活度测定 | 第44-46页 |
2.3 硫酸铵溶液提取操作 | 第46-49页 |
2.3.1 实验步骤 | 第46-47页 |
2.3.2 结果与讨论 | 第47-49页 |
2.4 硫酸铵溶液pH对提取胰激肽释放酶的影响 | 第49-50页 |
2.4.1 实验步骤 | 第49页 |
2.4.2 结果与讨论 | 第49-50页 |
2.5 测定硫酸铵溶液中Ca~(2+)对粗品K溶解的影响 | 第50-51页 |
2.5.1 实验步骤 | 第50-51页 |
2.5.2 结果与讨论 | 第51页 |
2.6 单位粗品中胰K含量的测定 | 第51-52页 |
2.6.1 实验步骤 | 第51-52页 |
2.6.2 结果与讨论 | 第52页 |
2.7 本章小结 | 第52-53页 |
第三章 硫酸铵沉淀初步纯化猪胰激肽释放酶 | 第53-57页 |
3.1 引言 | 第53页 |
3.2 材料与设备 | 第53页 |
3.3 不同饱和度的硫酸铵溶液中猪胰激肽释放酶的盐析情况 | 第53-55页 |
3.3.1 实验步骤 | 第53-54页 |
3.3.2 结果与讨论 | 第54-55页 |
3.4 胰K蛋白硫酸铵盐析随时间的变化 | 第55-57页 |
3.4.1 实验步骤 | 第55-56页 |
3.4.2 结果与讨论 | 第56-57页 |
第四章 疏水层析分离纯化猪胰激肽释放酶前期条件优化 | 第57-70页 |
4.1 引言 | 第57页 |
4.2 材料与设备 | 第57-58页 |
4.3 常用疏水层析介质饱和吸附量的测定 | 第58-59页 |
4.3.1 实验步骤 | 第58-59页 |
4.3.2 结果与讨论 | 第59页 |
4.4 疏水层析分离纯化猪胰激肽释放酶条件优化 | 第59-67页 |
4.4.1 实验方法 | 第59-61页 |
4.4.1.1 疏水性相互作用层析处理 | 第59页 |
4.4.1.2 总蛋白浓度测定 | 第59页 |
4.4.1.3 蛋白质鉴定与纯度分析 | 第59-61页 |
4.4.1.4 猪胰激肽释放酶收率计算 | 第61页 |
4.4.2 结果与讨论 | 第61-67页 |
4.4.2.1 疏水层析介质的筛选 | 第61-64页 |
4.4.2.2 丁基疏水介质相互作用层析pH的优化 | 第64-67页 |
4.5 硫酸铵盐析结合疏水层析分离纯化猪胰激肽释放酶 | 第67-68页 |
4.5.1 疏水性相互作用层析处理放大实验方法 | 第67-68页 |
4.5.2 结果与讨论 | 第68页 |
4.6 本章小结 | 第68-70页 |
第五章 结论与展望 | 第70-73页 |
5.1 研究总结 | 第70-71页 |
5.2 本文创新之处 | 第71-72页 |
5.3 工作展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-77页 |
个人简历及发表论文情况 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |