| 目录 | 第1-6页 |
| 缩略词表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 第一部分：BB-102与相关重组腺病毒的扩增及其对MM细胞的感染效率 | 第17-33页 |
| 1 材料 | 第17-21页 |
| ·细胞系 | 第17-18页 |
| ·MM标本 | 第18页 |
| ·重组腺病毒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·主要液体及配制 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-24页 |
| ·重组腺病毒扩增纯化以及病毒滴度测定 | 第21-22页 |
| ·FACS检测CD138分子在MM细胞系的表达 | 第22页 |
| ·CD138免疫磁性分离原代MM细胞 | 第22页 |
| ·RT-PCR检测CAR在MM细胞的表达 | 第22-23页 |
| ·腺病毒载体对MM细胞系的感染效率 | 第23页 |
| ·腺病毒载体对原代MM细胞的感染效率 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-30页 |
| ·五种重组腺病毒及其感染滴度 | 第24-25页 |
| ·MM细胞系表达CD138分子 | 第25页 |
| ·CD138磁珠分离原代MM细胞的得率和纯化效率 | 第25-26页 |
| ·MM细胞表达CAR | 第26-28页 |
| ·重组腺病毒对MM细胞系有较高感染效率 | 第28-30页 |
| ·重组腺病毒能够有效感染原代MM细胞 | 第30页 |
| 4 讨论 | 第30-33页 |
| 第二部分：BB-102介导的B7-1、GM-CSF和p53基因在MM细胞的表达及其生物学效应 | 第33-56页 |
| 1 材料 | 第33-36页 |
| ·外周血 | 第33页 |
| ·HLA-A2阳性对照DNA | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·主要液体及配制 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-40页 |
| ·FACS检测BB-102介导的B7-1在MM细胞的表达 | 第36-37页 |
| ·ELISA检测GM-CSF的分泌表达 | 第37页 |
| ·Western blot检测p53在MM细胞的表达 | 第37-38页 |
| ·MTT法检测BB-102对MM细胞系的增殖抑制作用 | 第38页 |
| ·Annexin V检测BB-102对MM细胞系的诱导凋亡作用 | 第38页 |
| ·密度离心法分离PBL | 第38页 |
| ·DNA提取和HLA-A2基因PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·混合淋巴细胞和肿瘤细胞反应(MLTR) | 第39页 |
| ·细胞毒分析 | 第39-40页 |
| ·统计学分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-53页 |
| ·BB-102介导B7-1分子在MM细胞表达 | 第40-42页 |
| ·BB-102介导MM细胞分泌表达GM-CSF | 第42-43页 |
| ·BB-102介导MM细胞高水平表达P53蛋白 | 第43-44页 |
| ·BB-102对MM细胞的增殖抑制作用 | 第44页 |
| ·BB-102对MM细胞系的凋亡诱导作用 | 第44-46页 |
| ·PCR方法筛选HLA-A2~+的人PBL | 第46-47页 |
| ·体外诱导异基因靶细胞杀伤分析 | 第47-49页 |
| ·靶细胞特异性杀伤分析 | 第49-50页 |
| ·HLA分子阻断实验 | 第50-51页 |
| ·MLTR | 第51-52页 |
| ·细胞毒分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 第三部分：BB-102基因修饰瘤苗对HuPBL-NOD／SCID小鼠的免疫保护作用 | 第56-76页 |
| 1 材料 | 第56-58页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·外周血 | 第56页 |
| ·MM细胞系 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56-57页 |
| ·主要材料和仪器 | 第57-58页 |
| 2 方法 | 第58-61页 |
| ·琼脂扩散法检测小鼠血清中人Ig水平 | 第58页 |
| ·FACS检测小鼠脾脏中人淋巴细胞 | 第58页 |
| ·FACS检测小鼠移植瘤中人CD138~+细胞 | 第58页 |
| ·PCR扩增法筛选HLA-A2~+PBL供者 | 第58-59页 |
| ·肿瘤组织切片病理分析和人T淋巴细胞免疫组化染色 | 第59页 |
| ·NOD／SCID小鼠的人免疫系统重建(HuPBL-NOD／SCID mice)模型 | 第59页 |
| ·MM皮下移植瘤成瘤实验 | 第59-60页 |
| ·HuPBL-NOD／SCID小鼠实验分组和瘤苗接种 | 第60页 |
| ·基因修饰瘤苗的免疫保护实验 | 第60页 |
| ·统计学分析 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-72页 |
| ·HuPBL-NOD／SCID小鼠模型的建立 | 第61-62页 |
| ·MM皮下移植瘤模型的建立 | 第62-64页 |
| ·筛选HLA-A2~+PBL制备HuPBL-NOD／SCID小鼠 | 第64页 |
| ·瘤苗接种对MM移植瘤生长的抑制作用 | 第64-67页 |
| ·皮下移植瘤的病理分析和免疫组化染色 | 第67-70页 |
| ·模型的有效性分析 | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 文献综述 | 第86-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 博士期间发表的论文 | 第95-100页 |
