桑树叶形变异株的mRNA差异表达分析(cDNA-AFLP)及差异片段克隆的研究
致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
引言 | 第10-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-37页 |
·桑树诱变和分子机理研究 | 第13-15页 |
·桑树诱变育种及性状变化 | 第13-14页 |
·植物突变与基因变化 | 第14-15页 |
·植物叶片发育研究进展 | 第15-26页 |
·叶片起始发育的分子机理 | 第17-20页 |
·KNOX调节叶原基的发育 | 第17-18页 |
·叶片极性的建立 | 第18-20页 |
·近轴化(叶片的上表面化) | 第18-19页 |
·远轴化(叶片下表面化) | 第19-20页 |
·边缘分生组织的发生 | 第20页 |
·叶片生长扩展的遗传控制 | 第20-26页 |
·极性决定的叶片生长 | 第20-22页 |
·皮层微管和细胞壁 | 第22-23页 |
·激素控制 | 第23-24页 |
·光敏色素介导的叶片发育 | 第24页 |
·细胞扩增 | 第24-25页 |
·补偿机制 | 第25-26页 |
·基因的克隆技术研究进展 | 第26-37页 |
·T-DNA插入诱变 | 第26页 |
·图位克隆 | 第26-27页 |
·差异显示技术和cDNA-AFLP的应用 | 第27-37页 |
·杂交为基础的方法 | 第28-30页 |
·以序列为基础的方法 | 第30-31页 |
·以PCR为基础的方法 | 第31-34页 |
·以cDNA文库筛选为基础的方法 | 第34-37页 |
第2章 材料和方法 | 第37-54页 |
·材料 | 第37-39页 |
·细胞菌株和质粒 | 第37-38页 |
·桑树材料 | 第38-39页 |
·各种工具酶和化学试剂 | 第39页 |
·方法 | 第39-54页 |
·组织切片和形态分析 | 第39-40页 |
·桑芽总RNA提取 | 第40页 |
·RNA电泳琼脂糖凝胶的制备及RNA电泳 | 第40-41页 |
·mRNA的提取 | 第41-42页 |
·cDNA的合成 | 第42-44页 |
·cDNA纯化 | 第44页 |
·cDNA模板准备 | 第44-46页 |
·选择性扩增 | 第46-47页 |
·聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第47-48页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第48页 |
·聚丙烯酰胺凝胶银染 | 第48-49页 |
·特异片段的回收 | 第49-50页 |
·PCR产物回收纯化 | 第50页 |
·克隆片段的连接和转化 | 第50-51页 |
·碱法抽提质粒 | 第51-52页 |
·质粒测序 | 第52页 |
·Northern杂交 | 第52-54页 |
第3章 结果和分析 | 第54-82页 |
·形态分析和组织切片 | 第54-57页 |
·叶片指数 | 第54-55页 |
·表皮结构 | 第55-56页 |
·叶片组织结构 | 第56-57页 |
·RNA提取结果 | 第57-58页 |
·cDNA合成 | 第58-59页 |
·AFLP图谱 | 第59-68页 |
·差异片段的回收 | 第68-69页 |
·差异片段的转化 | 第69-71页 |
·差异片段的测序和序列比对 | 第71-81页 |
·Northern杂交 | 第81-82页 |
第4章 讨论和结论 | 第82-90页 |
·桑树等木本植物基因差异显示技术体系的建立 | 第83-84页 |
·桑树突变体的研究利用价值 | 第84页 |
·桑树基因克隆的策略 | 第84-85页 |
·桑树叶片发育的分子机理 | 第85-86页 |
·cDNA-AFLP方法的优点 | 第86-87页 |
·cDNA-AFLP研究需要注意的问题 | 第87页 |
·今后的工作设想 | 第87-88页 |
·结论 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-100页 |
英文摘要 | 第100-103页 |
附录A 本文所用缩略语 | 第103-104页 |
附录B 攻读博士学位期间发表的论文 | 第104页 |