英文缩写词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
主要仪器设备和常用试剂的配制 | 第12-16页 |
一、主要实验仪器设备 | 第12页 |
二、实验常用溶液的配制 | 第12-16页 |
第1章 绪论 | 第16-20页 |
·HBX特性 | 第16-17页 |
·HBX对细胞的凋亡作用 | 第17-18页 |
·HBX对病毒周期具有调节作用 | 第18-19页 |
·HBX参与多条细胞信号转导通路 | 第19-20页 |
第2章 构建FLAG-HBX和MYC-SPRY1真核表达载体 | 第20-28页 |
·材料 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·细胞株和质粒 | 第20页 |
·Western Blot试剂 | 第20页 |
·引物设计 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·PCR模板 | 第21页 |
·目的基因扩增体系 | 第21页 |
·PCR产物的电泳分离 | 第21-22页 |
·DNA的纯化回收 | 第22页 |
·DNA酶切 | 第22-23页 |
·连接反应 | 第23页 |
·CaCL_2法制备细菌感受态 | 第23页 |
·转化 | 第23-24页 |
·阳性重组子的筛选 | 第24页 |
·测序结果分析 | 第24页 |
·脂质体转染细胞 | 第24-25页 |
·收集、裂解细胞 | 第25页 |
·Western Blot | 第25-26页 |
·实验结果 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第3章 HBX编码蛋白质与SPRY1编码的蛋白质之间相互作用验证 | 第28-34页 |
·材料 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·细胞株和质粒 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-32页 |
·免疫共沉淀(Co-IP)实验方法 | 第28-29页 |
·GST-Pull Down实验方法 | 第29-32页 |
·实验结果 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第4章 HBX编码蛋白质与SPRY1编码的蛋白质之间相互作用功能研究 | 第34-44页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·细胞株和质粒 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-37页 |
·双荧光素酶报告基因实验 | 第35页 |
·Western-Blot检测靶蛋白 | 第35页 |
·细胞增殖活力检测 | 第35页 |
·凋亡实验 | 第35-37页 |
·实验结果 | 第37-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
总结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
附录A:攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第51-52页 |
附录B:引物序列 | 第52-53页 |
附录C:PFLAG-CMV-2 VECTOR | 第53-54页 |
附录D:PCMV-MYC VECTOR | 第54页 |