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人红细胞单链抗体的制备与血凝试验方法的初步建立

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
主要符号表第10-11页
第一章 引言第11-23页
   ·抗体的研究进展第11-13页
     ·多克隆抗体第11页
     ·单克隆抗体第11-12页
     ·基因工程抗体第12-13页
   ·单链抗体的研究进展第13-20页
     ·单链抗体的结构特点第13页
     ·单链抗体的构建第13-15页
     ·单链抗体的载体第15页
     ·单链抗体的表达第15-17页
     ·单链抗体应用前景与展望第17-20页
   ·人红细胞单抗的国内外研究进展第20页
   ·研究的目的和意义第20-22页
   ·本研究技术路线第22-23页
第二章 人红细胞非凝集型单克隆抗体的制备及初步应用第23-43页
   ·材料第23-29页
     ·实验动物和细胞第23页
     ·主要试剂和材料第23-24页
     ·主要溶液及其配制第24-28页
     ·主要培养基及其配制第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
   ·方法第29-43页
     ·抗原的制备第29-30页
     ·小鼠免疫第30-31页
     ·间接ELISA法的建立第31-32页
     ·SP2/0骨髓瘤细胞的制备第32-33页
     ·饲养细胞的制备第33页
     ·免疫脾细胞的制备第33页
     ·细胞融合第33-34页
     ·杂交瘤细胞的早期培养第34页
     ·杂交瘤细胞阳性孔的检测第34-35页
     ·杂交瘤细胞株的筛选第35页
     ·杂交瘤细胞株的冻存和复苏第35-36页
     ·杂交瘤细胞株的传代稳定性第36页
     ·杂交瘤细胞株的染色体鉴定第36-37页
     ·单抗的制备和效价检测第37-38页
     ·单抗的纯化第38-39页
     ·单抗纯度的鉴定第39-40页
     ·单抗亚型的测定第40页
     ·单抗特异性的鉴定第40页
     ·单抗相对亲和力的测定第40页
     ·抗体F(ab~')_2片段制备第40页
     ·抗体F(ab~')_2片段的纯化第40-41页
     ·抗体F(ab~')_2片段的纯度鉴定第41页
     ·双功能抗体的制备第41页
     ·双功能抗体的纯化及鉴定第41页
     ·全血凝集检测试剂的形成第41-42页
     ·全血凝集检测试剂的鉴定第42-43页
第三章 结果与分析第43-54页
   ·红细胞膜蛋白抗原浓度的测定第43页
   ·完整红细胞抗原最佳免疫量的确定第43-44页
   ·最佳酶标二抗工作浓度的确定第44页
   ·阳性对照工作浓度的确定第44-45页
   ·最佳抗原包被量的确定第45页
   ·免疫效果检测第45-47页
   ·阳性杂交瘤细胞株的检测和筛选第47页
   ·单抗的冻存和传代稳定性测定第47-48页
   ·杂交瘤细胞株染色体鉴定第48页
   ·单抗腹水制备第48-49页
   ·单抗腹水效价测定第49页
   ·单抗蛋白浓度的测定第49-50页
   ·单抗腹水纯度测定第50页
   ·单抗亚型的测定第50-51页
   ·单抗的特异性鉴定第51页
   ·单抗相对亲和力的测定第51-52页
   ·胃蛋白酶消化单抗效果的鉴定和F(ab~′)_2片段的得率第52页
   ·F(ab~′)_2片段的纯化和双功能抗体偶联的鉴定第52-53页
   ·全血凝集检测试剂的鉴定第53-54页
第四章 讨论第54-58页
   ·免疫原的制备与选择第54页
   ·小鼠免疫第54-55页
   ·红细胞抗体检测方法第55页
     ·间接ELISA检测第55页
     ·固相微板法第55页
   ·单克隆抗体制备的影响因素第55-56页
     ·SP2/0骨髓瘤细胞第55-56页
     ·细胞融合第56页
     ·杂交瘤细胞的筛选第56页
   ·F(ab~′)_2片段酶切与片段纯化第56-57页
   ·双功能抗体的制备第57-58页
第五章 结论第58-59页
参考文献第59-64页
致谢第64-65页
个人简历及在学习期间发表的学位论文第65页

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