摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第一章 前言 | 第10-23页 |
·融合标签概述 | 第10-15页 |
·FLAG 融合标签 | 第11页 |
·其他类型融合标签 | 第11-13页 |
·融合标签的作用 | 第13-14页 |
·融合标签的切割 | 第14-15页 |
·单克隆抗体概述 | 第15-18页 |
·单克隆抗体的种类 | 第15-17页 |
·单克隆抗体的应用 | 第17-18页 |
·抗融合标签单克隆抗体 | 第18-20页 |
·抗FLAG 标签单克隆抗体研究进展 | 第18页 |
·抗融合标签单克隆抗体的应用 | 第18-20页 |
·免疫亲和层析 | 第20-21页 |
·免疫亲和纯化技术的发展 | 第20页 |
·免疫亲和纯化技术原理和特点 | 第20页 |
·影响免疫亲和纯化的关键因素 | 第20-21页 |
·本课题的研究路线 | 第21-22页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 FLAG 标签完全抗原的制备与鉴定 | 第23-32页 |
·材料和方法 | 第23-28页 |
·材料 | 第23-26页 |
·方法 | 第26-28页 |
·结果 | 第28-29页 |
·偶联后蛋白浓度测定 | 第28页 |
·偶联效果检测 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-32页 |
·标签蛋白的选择 | 第29-30页 |
·载体蛋白的选择 | 第30页 |
·偶联方法的确立 | 第30-31页 |
·多肽与载体摩尔比的选择 | 第31页 |
·偶联效果的测定 | 第31-32页 |
第三章 FLAG 标签单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备 | 第32-44页 |
·材料和方法 | 第32-40页 |
·材料 | 第32-35页 |
·方法 | 第35-40页 |
·结果 | 第40-41页 |
·最佳抗原包被量和最佳酶标二抗工作浓度的确定 | 第40页 |
·免疫血清效价测定 | 第40-41页 |
·阳性克隆的筛选 | 第41页 |
·克隆化后上清效价测定 | 第41页 |
·讨论 | 第41-44页 |
·免疫动物的选择 | 第41页 |
·免疫方案的确定 | 第41-42页 |
·骨髓瘤细胞的选择与优化 | 第42页 |
·细胞融合 | 第42-43页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第43页 |
·无菌操作及污染处理 | 第43页 |
·杂交瘤细胞的转阴 | 第43-44页 |
第四章 FLAG 标签单克隆抗体的制备与鉴定 | 第44-52页 |
·材料和方法 | 第44-48页 |
·材料 | 第44-46页 |
·方法 | 第46-48页 |
·结果 | 第48-52页 |
·腹水效价 | 第48页 |
·抗体浓度 | 第48-49页 |
·腹水纯化后电泳 | 第49页 |
·单抗亚型 | 第49页 |
·交叉反应 | 第49-50页 |
·相对亲和力 | 第50-52页 |
第五章 FLAG 标签单克隆抗体的初步应用 | 第52-58页 |
·材料和方法 | 第52-55页 |
·材料 | 第52-53页 |
·方法 | 第53-55页 |
·结果 | 第55-57页 |
·酶标抗体最佳工作浓度 | 第55页 |
·免疫印迹 | 第55-56页 |
·免疫亲和层析 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-58页 |
·亲和柱纯化 | 第57-58页 |
第六章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
个人简历 | 第65页 |