| 论文创新点 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 研究背景 | 第14-26页 |
| 1.1 抗病毒天然免疫 | 第14-20页 |
| 1.1.1 免疫系统概述 | 第14-15页 |
| 1.1.2 模式识别受体 | 第15-16页 |
| 1.1.3 RLR模式识别受体信号通路 | 第16-19页 |
| 1.1.4 RLR信号通路的泛素化调节 | 第19-20页 |
| 1.2 丙型肝炎病毒 | 第20-23页 |
| 1.2.1 HCV概述 | 第20页 |
| 1.2.2 HCV的基因组结构 | 第20-21页 |
| 1.2.3 HCV的生活周期 | 第21-23页 |
| 1.2.4 HCV与天然免疫 | 第23页 |
| 1.3 高尔基体蛋白73 | 第23-26页 |
| 1.3.1 GP73概述 | 第23-24页 |
| 1.3.2 GP73与肿瘤 | 第24页 |
| 1.3.3 GP73与病毒感染 | 第24-26页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第26-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 临床样本及ELISA | 第26页 |
| 2.1.2 人原代肝细胞、细胞系及病毒株 | 第26页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第26-27页 |
| 2.1.4 抗体及试剂 | 第27页 |
| 2.1.5 荧光定量PCR引物 | 第27-28页 |
| 2.1.6 siRNA和shRNA靶序列 | 第28页 |
| 2.2 实验仪器和设备 | 第28-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-40页 |
| 2.3.1 基因克隆与构建 | 第29-30页 |
| 2.3.2 高纯度质粒DNA提取 | 第30-31页 |
| 2.3.3 细胞培养 | 第31页 |
| 2.3.4 细胞转染 | 第31-32页 |
| 2.3.5 RNA提取、逆转录及荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 2.3.6 免疫印迹(Western blot) | 第33-35页 |
| 2.3.7 双荧光素酶报告系统 | 第35页 |
| 2.3.8 免疫共沉淀(CoIP) | 第35-36页 |
| 2.3.9 免疫荧光(IF) | 第36-37页 |
| 2.3.1O GST pulldown | 第37页 |
| 2.3.11 慢病毒包装与感染 | 第37-38页 |
| 2.3.12 人原代肝细胞培养及HCV感染 | 第38-40页 |
| 第三章 丙肝病毒调控GP73表达的机制研究 | 第40-47页 |
| 3.1 HCV患者血清中GP73表达量的研究 | 第40-41页 |
| 3.2 HCV感染PHH细胞上调GP73表达量的研究 | 第41-42页 |
| 3.3 HCV上调GP73表达与IFN通路激活的相关性研究 | 第42-43页 |
| 3.4 VSV和EV71上调GP73表达与IFN通路激活的相关性研究 | 第43-44页 |
| 3.5 HCV上调GP73表达的信号通路研究 | 第44-47页 |
| 第四章 GP73是干扰素通路的负调节因子 | 第47-53页 |
| 4.1 过表达GP73抑制SeV诱导的IFN相关报告基因的活性 | 第47-48页 |
| 4.2 干扰GP73促进SeV诱导的IFN相关报告基因的活性 | 第48-50页 |
| 4.3 干扰GP73促进SeV诱导的IFN相关基因的内源性表达 | 第50-51页 |
| 4.4 干扰GP73促进HCV基因组RNA诱导的IFN通路的激活 | 第51-53页 |
| 第五章 GP73与MAVS和TRAF6蛋白相互作用 | 第53-58页 |
| 5.1 GP73作用位置的荧光素酶报告质粒活性筛选 | 第53-54页 |
| 5.2 GP73与MAVS和TRAF6相互作用 | 第54-55页 |
| 5.3 GP73与内源性MAVS的相互作用研究 | 第55-56页 |
| 5.4 GP73与MAVS和TRAF6相互作用的进一步验证 | 第56-58页 |
| 第六章 GP73与MAVS和TRAF6相互作用的结构域分析 | 第58-63页 |
| 6.1 GP73与TRAF6相互作用的结构域分析 | 第58页 |
| 6.2 GP73与MAVS相互作用的结构域分析 | 第58-59页 |
| 6.3 MAVS的TIM序列在其与GP73相互作用中的功能研究 | 第59-63页 |
| 第七章 GP73促进MAVS和TRAF6蛋白的蛋白酶体途径降解 | 第63-67页 |
| 7.1 GP73对MAVS和TRAF6蛋白稳定性的影响 | 第63-65页 |
| 7.2 GP73促进MAVS和TRAF6蛋白酶体途径的降解 | 第65-67页 |
| 第八章 GP73促进HCV的感染与复制 | 第67-71页 |
| 8.1 干扰GP73对HCV感染与复制的影响 | 第67-68页 |
| 8.2 GP73拯救质粒对HCV感染与复制的影响 | 第68-69页 |
| 8.3 干扰GP73对VSV-GFP感染与复制的影响 | 第69-71页 |
| 第九章 GP73对HCV病毒组装及分泌的影响 | 第71-78页 |
| 9.1 GP73与ApoE相互作用 | 第71-72页 |
| 9.2 GP73与HCV复制复合体共定位 | 第72-73页 |
| 9.3 GP73与HCV非结构蛋白NS5A相互作用 | 第73-75页 |
| 9.4 GP73介导了ApoE和NS5A的相互作用 | 第75-78页 |
| 第十章 研究总结与讨论 | 第78-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 博士期间发表及待发表的论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
