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水稻幼苗白化致死基因AL1和粒形基因GS9的克隆与功能分析

摘要第5-9页
Abstract第9-13页
符号说明第14-16页
第1章 文献综述第16-40页
    1.1 植物基因克隆的策略第16-19页
    1.2 水稻叶绿体发育及叶色突变机制的研究进展第19-27页
        1.2.1 水稻叶色突变的类型及其利用第19-21页
        1.2.2 叶绿体的发育及叶色突变的机制第21-25页
            1.2.2.1 叶绿体形成发育相关基因突变第22-23页
            1.2.2.2 叶绿素合成途径相关基因突变第23-24页
            1.2.2.3 叶绿素循环和降解途径相关基因突变第24页
            1.2.2.4 叶绿体蛋白转运受阻第24-25页
            1.2.2.5 核质信号传导途径受阻第25页
        1.2.3 叶绿体核糖体蛋白基因第25-27页
            1.2.3.1 叶绿体核糖体蛋白缺陷产生叶色突变第25-26页
            1.2.3.2 叶绿体核糖体蛋白基因突变第26-27页
    1.3 水稻粒形基因克隆研究进展第27-39页
        1.3.1 水稻粒形的决定因素第27-29页
        1.3.2 水稻粒形基因的定位和克隆第29-36页
            1.3.2.1 影响籽粒大小的基因第29-31页
            1.3.2.2 特异性影响籽粒形状的基因第31-35页
            1.3.2.3 影响籽粒大小的小圆粒类基因第35-36页
        1.3.3 水稻粒形调控基因的分子生物学机理第36-39页
            1.3.3.1 蛋白酶体降解途径第37页
            1.3.3.2 G蛋白信号通路第37-38页
            1.3.3.3 植物激素代谢及信号途径第38-39页
    1.4 本研究的目的与意义第39-40页
第2章 水稻幼苗白化致死基因AL1的克隆及分子机理研究第40-72页
    2.1 材料与方法第40-47页
        2.1.1 实验材料第40-41页
            2.1.1.1 水稻材料第40页
            2.1.1.2 载体和菌株第40-41页
            2.1.1.3 常用试剂和培养基第41页
        2.1.2 幼苗生长及显微结构观察第41-42页
        2.1.3 光合色素含量测定第42页
        2.1.4 群体构建与基因定位第42页
        2.1.5 DNA提取与克隆第42-43页
        2.1.6 生物信息学分析第43页
        2.1.7 转化载体构建第43-44页
        2.1.8 水稻遗传转化第44页
        2.1.9 水稻总RNA提取与RT-PCR分析第44-45页
        2.1.10 RNA-seq分析第45页
        2.1.11 蛋白亚细胞定位第45-46页
        2.1.12 Western blot分析第46页
        2.1.13 酵母双杂交第46-47页
    2.2 结果与分析第47-69页
        2.2.1 突变体al1具有幼苗白化致死表型和不正常的叶绿体发育第47-49页
        2.2.2 AL1基因的精细定位第49-51页
        2.2.3 候选基因及其突变位点分析第51-54页
        2.2.4 转基因验证AL1基因第54-55页
        2.2.5 AL1及其突变体al1的表达特性第55-57页
        2.2.6 AL1及其al1突变蛋白的特征分析第57-61页
        2.2.7 AL1蛋白突变影响叶绿体核糖体第61-63页
        2.2.8 AL1突变影响叶绿体生物合成相关基因的表达第63-68页
        2.2.9 AL1突变导致白化表型的可能机制第68-69页
    2.3 讨论第69-72页
        2.3.1 核糖体L12蛋白突变导致白化致死表型第69页
        2.3.2 AL1基因生物学特性第69-70页
        2.3.3 AL1影响叶绿体基因表达的原因解析第70-71页
        2.3.4 L12蛋白的功能第71-72页
第3章 水稻粒形基因GS9的精细定位与效应分析第72-99页
    3.1 材料与方法第72-76页
        3.1.1 水稻材料第72-73页
        3.1.2 分子标记第73页
        3.1.3 材料构建第73-74页
        3.1.4 水稻种植与性状考察第74页
        3.1.5 DNA提取与重测序第74页
        3.1.6 基因定位第74页
        3.1.7 生物信息学分析第74页
        3.1.8 细胞学观察第74-75页
        3.1.9 稻米品质分析第75页
        3.1.10 RT-PCR和RNA-seq分析第75-76页
    3.2 结果与分析第76-93页
        3.2.1 N138株系成熟种子粒型的遗传分析第76-77页
        3.2.2 粒形基因GS9的初定位第77-78页
        3.2.3 GS9基因的精细定位第78-80页
        3.2.4 定位区间内的候选基因第80页
        3.2.5 GS9近等基因系的选育及粒形表现第80-81页
        3.2.6 NIL(gs9)中窄粒形成的细胞学基础第81-85页
        3.2.7 NIL(gs9)粒形变化对对稻米品质的影响第85-87页
            3.2.7.1 蒸煮与食味品质第85-86页
            3.2.7.2 研磨与外观品质第86-87页
        3.2.8 NIL(gs9)的田间表现及主要农艺性状第87-89页
        3.2.9 NIL(gs9)与日本晴幼穗组织表达谱的比较第89-93页
            3.2.9.1 转录组的比较第89-91页
            3.2.9.2 粒形调控相关基因表达的比较第91-93页
            3.2.9.3 细胞周期相关基因表达的比较第93页
    3.3 讨论第93-99页
        3.3.1 粒形基因GS9的定位及其候选基因预测第93-94页
        3.3.2 关于粒形基因GS9的效应第94-95页
        3.3.3 GS9控制颖壳细胞数目与生长第95-96页
        3.3.4 GS9可能通过油菜素内酯信号途径发挥作用第96-99页
第4章 全文总结第99-100页
参考文献第100-121页
附表第121-132页
附录第132-135页
    部分试剂配制第132页
    部分实验操作流程第132-135页
致谢第135-136页
攻读博士学位期间发表学术成果第136-137页

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