| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 细胞分裂 | 第12-14页 |
| 1.1.1 真核生物的细胞分裂 | 第12页 |
| 1.1.2 原核生物的细胞分裂 | 第12-14页 |
| 1.2 细菌细胞分裂相关蛋白 | 第14-19页 |
| 1.2.1 细胞分裂蛋白复合体组分与功能作用 | 第14-15页 |
| 1.2.2 细胞分裂蛋白亚复合体FtsQ/FtsB/FtsL | 第15-19页 |
| 1.3 大肠杆菌BW25113 | 第19页 |
| 1.4 CRISPR/Cas系统 | 第19-24页 |
| 1.4.1 CRISPR/Cas系统的发展历史 | 第20页 |
| 1.4.2 CRISPR/Cas系统的组织结构 | 第20-21页 |
| 1.4.3 CRISPR/Cas系统的分类 | 第21-23页 |
| 1.4.4 CRISPR/Cas系统的应用 | 第23-24页 |
| 1.5 论文的研究内容和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-57页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第26-38页 |
| 2.1.1 基因 | 第26页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第26页 |
| 2.1.3 实验质粒 | 第26-30页 |
| 2.1.4 工具酶 | 第30-31页 |
| 2.1.5 药品和试剂 | 第31-33页 |
| 2.1.6 实验仪器和设备 | 第33-35页 |
| 2.1.7 常用试剂配方 | 第35-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-57页 |
| 2.2.1 质粒的构建 | 第38-43页 |
| 2.2.2 感受态的制备与转化 | 第43-46页 |
| 2.2.3 重组融合蛋白的表达 | 第46-47页 |
| 2.2.4 重组融合蛋白的纯化及检测 | 第47-49页 |
| 2.2.5 蛋白-蛋白相互作用的检测 | 第49-51页 |
| 2.2.6 蛋白共表达 | 第51-54页 |
| 2.2.7 CRISPR-Cas9基因编辑技术 | 第54-57页 |
| 第三章 关于FtsQ/FtsB/FtsL蛋白作用关系的研究 | 第57-75页 |
| 3.1 FtsQ/B/L相互作用关系 | 第57-63页 |
| 3.1.1 实验设计 | 第57-58页 |
| 3.1.2 实验数据 | 第58-63页 |
| 3.2 FtsQ/B/L共表达与共纯化 | 第63-69页 |
| 3.2.1 实验设计 | 第63-64页 |
| 3.2.2 实验数据 | 第64-69页 |
| 3.3 FtsB/L/Q蛋白复合体的摩尔比检测 | 第69-72页 |
| 3.4 FtsB/L/Q胞外区截短蛋白的自组装初探 | 第72-74页 |
| 3.4.1 FtsB胞外区截短蛋白的自组装 | 第72页 |
| 3.4.2 FtsL胞外区截短蛋白的自组装 | 第72-73页 |
| 3.4.3 FtsQ胞外区截短蛋白的自组装 | 第73-74页 |
| 3.5 本章小结与展望 | 第74-75页 |
| 第四章 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术实现ftsB基因的HA基因序列敲入 | 第75-81页 |
| 4.1 N20-sgRNA的基因设计 | 第75页 |
| 4.2 基因敲入打靶序列的获得 | 第75-76页 |
| 4.3 FtsB-N20 sgRNA、上、下游打靶序列的融合 | 第76-77页 |
| 4.4 pTarget-N20 sgRNA-upstream-HA-downstream载体的构建 | 第77页 |
| 4.5 对大肠杆菌BW25113的ftsB基因的HA基因序列敲入的结果 | 第77-80页 |
| 4.6 基因编辑菌株的生长曲线测定 | 第80页 |
| 4.7 本章小结与展望 | 第80-81页 |
| 全文总结与展望 | 第81-82页 |
| 附录1 相关引物 | 第82-83页 |
| 附录2 缩略语及中英文对照 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
