中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第10-16页 |
1.1 概述2,3-丁二醇 | 第10-11页 |
1.1.1 2,3-丁二醇的性质 | 第10页 |
1.1.2 2,3-丁二醇的作用 | 第10-11页 |
1.2 生产2,3-丁二醇的方法 | 第11页 |
1.3 概述2,3-丁二醇生产菌株 | 第11-13页 |
1.3.1 菌株生产2,3-丁二醇 | 第11页 |
1.3.2 生产2,3-丁二醇的发酵途径 | 第11-12页 |
1.3.3 2,3-丁二醇生成与产物的关系 | 第12-13页 |
1.4 菌株遗传改造 | 第13-14页 |
1.4.1 传统方法改造菌株 | 第13页 |
1.4.2 基因工程方法改造菌株 | 第13-14页 |
1.5 本课题研究的目的及意义 | 第14页 |
1.5.1 本课题研究的目的 | 第14页 |
1.5.2 本课题研究的意义 | 第14页 |
1.6 本研究的主要技术路线 | 第14-16页 |
第2章 材料与方法 | 第16-36页 |
2.1 试验材料 | 第16-21页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第16-18页 |
2.1.2 所需引物 | 第18-19页 |
2.1.3 涉及培养基 | 第19页 |
2.1.4 主要分子学试剂 | 第19-20页 |
2.1.5 主要生化试剂及缓冲液配制方法 | 第20页 |
2.1.6 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-36页 |
2.2.1 原始菌株特性的研究 | 第21页 |
2.2.2 初筛方法的确立 | 第21-22页 |
2.2.3 优良菌株的选育 | 第22-23页 |
2.2.4 突变菌株的筛选 | 第23页 |
2.2.5 分析突变株的性质 | 第23-24页 |
2.2.6 摇瓶培养基成分的单因素试验 | 第24-25页 |
2.2.7 摇瓶培养条件的单因素试验 | 第25-26页 |
2.2.8 响应面法优化发酵条件 | 第26页 |
2.2.9 adc、als、ar基因片段的扩增 | 第26-28页 |
2.2.10 pCM-adc、pCM-als和pCM-ar质粒的构建 | 第28-34页 |
2.2.11 重组菌株CM-adcalsar的构建 | 第34-35页 |
2.2.12 CM-adcalsar的性质检测 | 第35-36页 |
第3章 结果与分析 | 第36-75页 |
3.1 原始菌株特性的研究 | 第36-37页 |
3.1.1 生长曲线的绘制 | 第36页 |
3.1.2 原始菌株发酵产物的研究 | 第36-37页 |
3.2 初筛方法的确立 | 第37-38页 |
3.2.1 2,3-丁二醇耐受性临界浓度的确定 | 第37-38页 |
3.2.2 乙酸耐受性临界浓度的确定 | 第38页 |
3.3 诱变方法选育优良菌株 | 第38-48页 |
3.3.1 紫外线(UV)诱变 | 第38-40页 |
3.3.2 He-Ne激光诱变 | 第40-42页 |
3.3.3 紫外线(UV)和He-Ne激光复合诱变 | 第42-43页 |
3.3.4 亚硝基胍(NTG)诱变 | 第43-46页 |
3.3.5 高效液相色谱法(HPLC)测定初筛菌株2,3-丁二醇产量 | 第46-47页 |
3.3.6 遗传稳定性试验 | 第47-48页 |
3.4 摇瓶培养基成分的单因素研究 | 第48-57页 |
3.5 摇瓶发酵条件的单因素研究 | 第57-62页 |
3.6 响应面法优化发酵条件 | 第62-70页 |
3.7 基因工程方法选育优良菌株 | 第70-75页 |
第4章 讨论 | 第75-77页 |
4.1 2,3-丁二醇的生产方法 | 第75页 |
4.2 2,3-丁二醇的生产菌株 | 第75页 |
4.3 菌株遗传改造 | 第75-76页 |
4.3.1 传统方法改造菌株 | 第75-76页 |
4.3.2 基因工程改造菌株 | 第76页 |
4.4 发酵工艺的优化 | 第76页 |
4.5 后续工作设想 | 第76-77页 |
第5章 结论 | 第77-78页 |
附录1 | 第78-79页 |
附录2 | 第79-81页 |
附录3 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-90页 |
致谢 | 第90-92页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第92-93页 |