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微柱阵列基底上肝细胞TRPV通道响应及PI3K/Akt通路在肝细胞生长中的作用研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-7页
主要缩略词第8-13页
1 绪论第13-33页
    1.1 问题的提出及研究意义第13-18页
    1.2 国内外研究现状第18-28页
        1.2.1 肝细胞体外培养研究概况第18-20页
        1.2.2 体外培养肝细胞类型第20-21页
        1.2.3 TRPV钙离子通道研究概况第21-22页
        1.2.4 基底图式化结构对细胞形态与黏附影响的研究现状第22-23页
        1.2.5 基底图式化结构对细胞活力与增殖影响的研究现状第23-24页
        1.2.6 基底图式化结构对细胞功能影响的研究现状第24-26页
        1.2.7 基底图式化结构力信号转导的研究现状第26-28页
    1.3 研究目的和研究内容第28-30页
        1.3.1 研究目的第28页
        1.3.2 研究内容第28-30页
    1.4 技术路线第30页
    1.5 创新点第30-33页
2 PDMS微柱阵列结构的制备及HEPG2细胞的培养第33-47页
    2.1 引言第33-34页
    2.2 实验仪器、试剂和材料第34-35页
        2.2.1 主要实验仪器及材料第34页
        2.2.2 主要实验试剂第34-35页
    2.3 实验方法和步骤第35-37页
        2.3.1 PDMS微柱阵列结构基底的制备第35页
        2.3.2 HepG2细胞的培养第35-36页
        2.3.3 扫描电子显微镜制样及观察第36页
        2.3.4 荧光染色实验第36-37页
        2.3.5 统计学处理第37页
    2.4 实验结果第37-42页
        2.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞的形态第37-38页
        2.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞黏着斑的表达第38-40页
        2.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞细胞骨架的表达第40-41页
        2.4.4 微柱阵列结构基底上HepG2细胞PIP2的表达第41-42页
    2.5 讨论和分析第42-44页
    2.6 本章小结第44-47页
3 HEPG2细胞TRPV通道对微柱阵列结构的响应第47-63页
    3.1 引言第47-48页
    3.2 仪器、材料和方法第48-49页
        3.2.1 实验仪器第48页
        3.2.2 实验材料和试剂第48-49页
    3.3 实验方法和步骤第49-53页
        3.3.1 细胞总RNA提取第49-50页
        3.3.2 总RNA反转录为cDNA第50页
        3.3.3 实时荧光定量PCR反应第50-51页
        3.3.4 免疫荧光染色实验第51-52页
        3.3.5 TRPV1和TRPV4通道功能响应第52-53页
        3.3.6 统计学处理第53页
    3.4 实验结果第53-59页
        3.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞TRPV1和TRPV4mRNA的表达第53-54页
        3.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞TRPV1和TRPV4通道蛋白的表达第54-57页
        3.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞TRPV1和TRPV4通道功能响应第57-59页
    3.5 讨论与分析第59-61页
    3.6 本章小结第61-63页
4 PI3K/AKT通路在HEPG2细胞对微柱阵列结构基底增殖响应中的作用研究第63-87页
    4.1 引言第63-64页
    4.2 实验仪器、试剂和材料第64-65页
        4.2.1 实验仪器第64页
        4.2.2 主要实验试剂第64-65页
    4.3 实验方法和步骤第65-70页
        4.3.1 MTT实验第65-66页
        4.3.2 细胞总RNA提取第66页
        4.3.3 总RNA反转录为cDNA第66-67页
        4.3.4 实时荧光定量PCR反应第67-68页
        4.3.5 细胞总蛋白提取第68-69页
        4.3.6 免疫印迹实验第69-70页
        4.3.7 统计学处理第70页
    4.4 实验结果第70-81页
        4.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞的增殖活力第70-72页
        4.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞p21mRNA的表达第72-74页
        4.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞Bcl-2和Bax的表达第74-79页
        4.4.4 微柱阵列结构基底上HepG2细胞Akt和p-Akt蛋白的表达第79-81页
    4.5 讨论和分析第81-84页
    4.6 本章小结第84-87页
5 PI3K/AKT信号通路在HEPG2细胞对微柱阵列结构基底功能响应中的作用研究第87-105页
    5.1 引言第87-88页
    5.2 实验仪器、试剂和材料第88页
        5.2.1 实验仪器第88页
        5.2.2 试剂和材料第88页
    5.3 实验方法和步骤第88-91页
        5.3.1 细胞总RNA提取第88-89页
        5.3.2 总RNA反转录为cDNA第89-90页
        5.3.3 实时荧光定量PCR反应第90-91页
        5.3.4 统计学处理第91页
    5.4 实验结果第91-99页
        5.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞ALBmRNA的表达第91-93页
        5.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞CYP1A1mRNA的表达第93-95页
        5.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞CYP1A2mRNA的表达第95-97页
        5.4.4 微柱阵列结构基底上HepG2细胞HNF1αmRNA的表达第97-99页
    5.5 讨论和分析第99-102页
    5.6 本章小结第102-105页
6 主要结论及后续工作展望第105-107页
    6.1 主要结论第105-106页
    6.2 后续工作展望第106-107页
致谢第107-109页
参考文献第109-131页
附录第131页
    A.作者在攻读博士期间的科研成果第131页
    B.作者在攻读博士期间参加的科研项目情况第131页

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