中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
主要缩略词 | 第8-13页 |
1 绪论 | 第13-33页 |
1.1 问题的提出及研究意义 | 第13-18页 |
1.2 国内外研究现状 | 第18-28页 |
1.2.1 肝细胞体外培养研究概况 | 第18-20页 |
1.2.2 体外培养肝细胞类型 | 第20-21页 |
1.2.3 TRPV钙离子通道研究概况 | 第21-22页 |
1.2.4 基底图式化结构对细胞形态与黏附影响的研究现状 | 第22-23页 |
1.2.5 基底图式化结构对细胞活力与增殖影响的研究现状 | 第23-24页 |
1.2.6 基底图式化结构对细胞功能影响的研究现状 | 第24-26页 |
1.2.7 基底图式化结构力信号转导的研究现状 | 第26-28页 |
1.3 研究目的和研究内容 | 第28-30页 |
1.3.1 研究目的 | 第28页 |
1.3.2 研究内容 | 第28-30页 |
1.4 技术路线 | 第30页 |
1.5 创新点 | 第30-33页 |
2 PDMS微柱阵列结构的制备及HEPG2细胞的培养 | 第33-47页 |
2.1 引言 | 第33-34页 |
2.2 实验仪器、试剂和材料 | 第34-35页 |
2.2.1 主要实验仪器及材料 | 第34页 |
2.2.2 主要实验试剂 | 第34-35页 |
2.3 实验方法和步骤 | 第35-37页 |
2.3.1 PDMS微柱阵列结构基底的制备 | 第35页 |
2.3.2 HepG2细胞的培养 | 第35-36页 |
2.3.3 扫描电子显微镜制样及观察 | 第36页 |
2.3.4 荧光染色实验 | 第36-37页 |
2.3.5 统计学处理 | 第37页 |
2.4 实验结果 | 第37-42页 |
2.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞的形态 | 第37-38页 |
2.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞黏着斑的表达 | 第38-40页 |
2.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞细胞骨架的表达 | 第40-41页 |
2.4.4 微柱阵列结构基底上HepG2细胞PIP2的表达 | 第41-42页 |
2.5 讨论和分析 | 第42-44页 |
2.6 本章小结 | 第44-47页 |
3 HEPG2细胞TRPV通道对微柱阵列结构的响应 | 第47-63页 |
3.1 引言 | 第47-48页 |
3.2 仪器、材料和方法 | 第48-49页 |
3.2.1 实验仪器 | 第48页 |
3.2.2 实验材料和试剂 | 第48-49页 |
3.3 实验方法和步骤 | 第49-53页 |
3.3.1 细胞总RNA提取 | 第49-50页 |
3.3.2 总RNA反转录为cDNA | 第50页 |
3.3.3 实时荧光定量PCR反应 | 第50-51页 |
3.3.4 免疫荧光染色实验 | 第51-52页 |
3.3.5 TRPV1和TRPV4通道功能响应 | 第52-53页 |
3.3.6 统计学处理 | 第53页 |
3.4 实验结果 | 第53-59页 |
3.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞TRPV1和TRPV4mRNA的表达 | 第53-54页 |
3.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞TRPV1和TRPV4通道蛋白的表达 | 第54-57页 |
3.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞TRPV1和TRPV4通道功能响应 | 第57-59页 |
3.5 讨论与分析 | 第59-61页 |
3.6 本章小结 | 第61-63页 |
4 PI3K/AKT通路在HEPG2细胞对微柱阵列结构基底增殖响应中的作用研究 | 第63-87页 |
4.1 引言 | 第63-64页 |
4.2 实验仪器、试剂和材料 | 第64-65页 |
4.2.1 实验仪器 | 第64页 |
4.2.2 主要实验试剂 | 第64-65页 |
4.3 实验方法和步骤 | 第65-70页 |
4.3.1 MTT实验 | 第65-66页 |
4.3.2 细胞总RNA提取 | 第66页 |
4.3.3 总RNA反转录为cDNA | 第66-67页 |
4.3.4 实时荧光定量PCR反应 | 第67-68页 |
4.3.5 细胞总蛋白提取 | 第68-69页 |
4.3.6 免疫印迹实验 | 第69-70页 |
4.3.7 统计学处理 | 第70页 |
4.4 实验结果 | 第70-81页 |
4.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞的增殖活力 | 第70-72页 |
4.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞p21mRNA的表达 | 第72-74页 |
4.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞Bcl-2和Bax的表达 | 第74-79页 |
4.4.4 微柱阵列结构基底上HepG2细胞Akt和p-Akt蛋白的表达 | 第79-81页 |
4.5 讨论和分析 | 第81-84页 |
4.6 本章小结 | 第84-87页 |
5 PI3K/AKT信号通路在HEPG2细胞对微柱阵列结构基底功能响应中的作用研究 | 第87-105页 |
5.1 引言 | 第87-88页 |
5.2 实验仪器、试剂和材料 | 第88页 |
5.2.1 实验仪器 | 第88页 |
5.2.2 试剂和材料 | 第88页 |
5.3 实验方法和步骤 | 第88-91页 |
5.3.1 细胞总RNA提取 | 第88-89页 |
5.3.2 总RNA反转录为cDNA | 第89-90页 |
5.3.3 实时荧光定量PCR反应 | 第90-91页 |
5.3.4 统计学处理 | 第91页 |
5.4 实验结果 | 第91-99页 |
5.4.1 微柱阵列结构基底上HepG2细胞ALBmRNA的表达 | 第91-93页 |
5.4.2 微柱阵列结构基底上HepG2细胞CYP1A1mRNA的表达 | 第93-95页 |
5.4.3 微柱阵列结构基底上HepG2细胞CYP1A2mRNA的表达 | 第95-97页 |
5.4.4 微柱阵列结构基底上HepG2细胞HNF1αmRNA的表达 | 第97-99页 |
5.5 讨论和分析 | 第99-102页 |
5.6 本章小结 | 第102-105页 |
6 主要结论及后续工作展望 | 第105-107页 |
6.1 主要结论 | 第105-106页 |
6.2 后续工作展望 | 第106-107页 |
致谢 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-131页 |
附录 | 第131页 |
A.作者在攻读博士期间的科研成果 | 第131页 |
B.作者在攻读博士期间参加的科研项目情况 | 第131页 |