| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要符号表 | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 诱导多能干细胞 | 第10-13页 |
| 1.1.1 诱导多能干细胞产生 | 第10-11页 |
| 1.1.2 重编程 | 第11-12页 |
| 1.1.3 疾病特异性iPSCs株 | 第12-13页 |
| 1.2 爱德华综合征 | 第13-16页 |
| 1.2.1 发病率和诊断 | 第13-14页 |
| 1.2.2 治疗和生存率 | 第14-16页 |
| 第二章 成纤维细胞和羊水细胞的分离培养及其iPSCs的获得 | 第16-32页 |
| 2.1 成纤维细胞的分离和培养 | 第16-20页 |
| 2.1.1 实验器材和试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.2 爬片法分离培养人成纤维细胞 | 第17-18页 |
| 2.1.3 酶消化法分离培养人成纤维细胞 | 第18-19页 |
| 2.1.4 结果 | 第19-20页 |
| 2.1.5 讨论 | 第20页 |
| 2.2 羊水细胞分离和培养 | 第20-22页 |
| 2.2.1 试剂和材料 | 第20页 |
| 2.2.2 步骤 | 第20-21页 |
| 2.2.3 结果 | 第21页 |
| 2.2.4 讨论 | 第21-22页 |
| 2.3 非整合质粒提取 | 第22-24页 |
| 2.3.1 试剂和仪器 | 第22页 |
| 2.3.2 实验步骤 | 第22-23页 |
| 2.3.3 实验结果 | 第23-24页 |
| 2.3.4 讨论 | 第24页 |
| 2.4 诱导多能干细胞的产生 | 第24-32页 |
| 2.4.1 试剂和仪器 | 第25页 |
| 2.4.2 重编程 | 第25-26页 |
| 2.4.3 挑取克隆和iPSCs传代 | 第26-28页 |
| 2.4.4 讨论 | 第28-32页 |
| 第三章 诱导多能干细胞的鉴定 | 第32-44页 |
| 3.1 碱性磷酸酶染色 | 第32-33页 |
| 3.1.1 试剂和仪器 | 第32页 |
| 3.1.2 步骤 | 第32页 |
| 3.1.3 实验结果和讨论 | 第32-33页 |
| 3.2 rt-PCR反应鉴定多能性基因表达 | 第33-36页 |
| 3.2.1 试剂和仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.2 步骤 | 第34-35页 |
| 3.2.3 实验结果和讨论 | 第35-36页 |
| 3.3 拟胚体形成和rt-PCR鉴定三胚层基因表达 | 第36-37页 |
| 3.3.1 试剂和仪器 | 第36页 |
| 3.3.2 步骤 | 第36-37页 |
| 3.3.3 结果和讨论 | 第37页 |
| 3.4 流式细胞术鉴定多能性 | 第37-39页 |
| 3.4.1 试剂和仪器 | 第37页 |
| 3.4.2 步骤 | 第37-39页 |
| 3.4.3 结果和讨论 | 第39页 |
| 3.5 核型鉴定遗传稳定性 | 第39-41页 |
| 3.5.1 试剂和仪器 | 第39页 |
| 3.5.2 步骤 | 第39-40页 |
| 3.5.3 结果和讨论 | 第40-41页 |
| 3.6 畸胎瘤 | 第41-44页 |
| 3.6.1 试剂和仪器 | 第41页 |
| 3.6.2 步骤 | 第41页 |
| 3.6.3 结果和讨论 | 第41-44页 |
| 第四章 爱德华综合征iPSCs系初步研究 | 第44-52页 |
| 4.1 转录组测序 | 第44页 |
| 4.2 简要方法 | 第44页 |
| 4.3 结果分析 | 第44-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-52页 |
| 总结和展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |