中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 稀土镁合金对神经胶质细胞活性及增殖的影响 | 第14-30页 |
材料 | 第14-16页 |
1.1 实验材料 | 第14页 |
1.2 实验动物 | 第14页 |
1.3 实验试剂 | 第14页 |
1.4 主要实验仪器 | 第14-15页 |
1.5 培养液和基础试剂的配制 | 第15-16页 |
1.5.1 胎牛血清的分装 | 第15页 |
1.5.2 DMEM/F12培养基的配制 | 第15页 |
1.5.3 星型胶质细胞培养液制备 | 第15页 |
1.5.4 无菌PBS平衡盐溶液制备 | 第15-16页 |
1.5.5 0.25%胰蛋白酶的配制 | 第16页 |
方法 | 第16-21页 |
2.1 星形胶质细胞原代培养 | 第16页 |
2.2 星形胶质细胞纯化及传代培养 | 第16-17页 |
2.3 星形胶质细胞的鉴定 | 第17页 |
2.4 浸提液制备 | 第17页 |
2.5 实验分组给药 | 第17-18页 |
2.6 浸提液对星型胶质细胞的细胞毒性检测 | 第18页 |
2.7 浸提液对胶质细胞周期及生长曲线影响 | 第18页 |
2.8 用Western-blot分别检测各实验组的PCNA蛋白表达情况 | 第18-21页 |
第一步: 样品制备 | 第18-19页 |
第二步: 蛋白浓度检测 | 第19页 |
第三步: western blot | 第19-21页 |
(一) 电泳 | 第19页 |
(二) 转膜 | 第19-20页 |
(三) 封闭 | 第20页 |
(四) 一抗孵育 | 第20页 |
(五) 二抗孵育 | 第20页 |
(六) 显色/曝光 | 第20-21页 |
结果 | 第21-26页 |
1. 星型胶质细胞形态学特征及免疫荧光染色 | 第21页 |
2. 星型胶质细胞细胞毒性检测 | 第21-23页 |
3. 浸提液对胶质细胞周期的影响 | 第23-24页 |
4、浸提液对星型胶质细胞细胞增殖(PCNA)蛋白表达的影响 | 第24-26页 |
讨论 | 第26-28页 |
结论 | 第28-30页 |
第二部分 稀土镁合金对神经干细胞增殖及分化的影响 | 第30-46页 |
1 材料 | 第30-33页 |
1.2 实验试剂 | 第30页 |
1.3 主要实验仪器 | 第30-31页 |
1.4 培养液和基础试剂的配制 | 第31-32页 |
1.4.1 胎牛血清的分装 | 第31页 |
1.4.2 DMEM/F12培养基的配制 | 第31页 |
1.4.3 常规的细胞神经元细胞制备 | 第31页 |
1.4.4 无菌PBS平衡盐溶液制备 | 第31-32页 |
1.5 鼠胚胎神经干细胞的原代培养 | 第32页 |
1.6 神经干细胞免疫美光鉴定 | 第32页 |
1.7 浸提液制备 | 第32页 |
1.8 实验分组给药 | 第32-33页 |
2 神经干细胞细胞毒性评估 | 第33页 |
3 稀土镁合金作用下神经于细胞分化增加的机制研究 | 第33-35页 |
3.1 提取细胞总RNA | 第33-34页 |
3.2 RNA反转录 | 第34页 |
3.3 RT-qPCR | 第34-35页 |
4 神经干细胞的诱导分化及鉴定 | 第35-37页 |
结果 | 第37-43页 |
1 神经干细胞形态学特征及免疫荧光染色 | 第37页 |
2 细胞毒性反应 | 第37-39页 |
3 浸提液对神经干细胞PCNA、BAX、BCL-2基因表达的影响 | 第39-41页 |
4 稀土镁合金对神经干细胞的诱导分化 | 第41-43页 |
讨论 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
综述 | 第49-58页 |
参考文献 | 第55-58页 |
主要缩写词表 | 第58-59页 |
在读期间发表的主要学术论文及参与课题 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-62页 |