| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 综述 | 第11-21页 |
| ·蛋白酶抑制剂简介 | 第11页 |
| ·蛋白酶抑制剂的研究进展 | 第11-18页 |
| ·蛋白酶抑制剂的分类 | 第11-14页 |
| ·蛋白酶抑制剂的特征及其作用机制 | 第14-16页 |
| ·蛋白酶抑制剂的应用 | 第16-18页 |
| ·两栖类皮肤蛋白酶抑制剂的研究概况 | 第18-19页 |
| ·两栖类皮肤蛋白酶抑制剂存在的生理意义 | 第19-20页 |
| ·本研究的预期目标与意义 | 第20-21页 |
| 2 中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 基因的克隆与序列分析 | 第21-33页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·菌种和载体 | 第21页 |
| ·工具酶与生化试剂 | 第21页 |
| ·器材 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·引物的设计 | 第21-22页 |
| ·总RNA 的提取 | 第22页 |
| ·RT-PCR 和5′-RACE | 第22页 |
| ·克隆测序 | 第22页 |
| ·序列分析与比较 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-32页 |
| ·中国林蛙皮肤总RNA 的提取结果 | 第23页 |
| ·中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 基因PCR 扩增结果 | 第23-24页 |
| ·中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 基因的cDNA 全长 | 第24-25页 |
| ·中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 基因氨基酸序列同源性分析结果 | 第25-30页 |
| ·中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 蛋白质结构预测 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 3 中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 基因原核表达载体的构建、表达及生物活性测定 | 第33-43页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·菌种和载体 | 第33页 |
| ·工具酶与生化试剂 | 第33-34页 |
| ·器材 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·引物的设计与合成 | 第34页 |
| ·中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 基因的扩增与回收 | 第34-35页 |
| ·中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 原核表达载体的构建 | 第35页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第35页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第36页 |
| ·重组蛋白生物活性的测定 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-42页 |
| ·引物的设计及中国林蛙丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 基因扩增 | 第36-38页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第38页 |
| ·重组蛋白的诱导表达结果 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的纯化结果 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的生物活性测定结果 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 4 中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSP12 重组蛋白多克隆抗体的制备及中国林蛙皮肤天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的检测 | 第43-49页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·溶液的配制 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·免疫新西兰兔 | 第44-45页 |
| ·ELISA 方法对抗血清效价的测定 | 第45页 |
| ·Western blot 方法对中国林蛙皮肤天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的检测 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-47页 |
| ·ELISA 方法对抗血清效价的测定结果 | 第46页 |
| ·Western blot 方法对中国林蛙皮肤天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的检测结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
