| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-26页 |
| ·产酶微生物及其种类 | 第11-13页 |
| ·来源于细菌的酶 | 第11-12页 |
| ·来自于放线菌的酶 | 第12页 |
| ·来自于酵母菌的酶 | 第12页 |
| ·来自于霉菌的酶 | 第12-13页 |
| ·来自病毒的酶 | 第13页 |
| ·蛋白酶的分类 | 第13-15页 |
| ·酸性蛋白酶 | 第14页 |
| ·中性蛋白酶 | 第14页 |
| ·碱性蛋白酶 | 第14-15页 |
| ·产酶微生物的分离和筛选 | 第15-17页 |
| ·样品的采集 | 第15-16页 |
| ·富集培养 | 第16页 |
| ·分离 | 第16页 |
| ·蛋白酶菌株的初筛 | 第16-17页 |
| ·复筛 | 第17页 |
| ·蛋白酶的应用 | 第17-20页 |
| ·洗涤剂工业 | 第17-18页 |
| ·皮革工业 | 第18-19页 |
| ·食品工业 | 第19页 |
| ·医药工业 | 第19-20页 |
| ·其他应用 | 第20页 |
| ·蛋白质的分离纯化技术 | 第20-24页 |
| ·盐析法 | 第20页 |
| ·Sephadex G-100 凝胶柱层析 | 第20-22页 |
| ·DEAE 弱阴离子交换柱层析 | 第22-24页 |
| ·论文的主要内容及意义 | 第24-26页 |
| ·论文的主要内容及技术路线 | 第24页 |
| ·论文的目的与意义 | 第24-26页 |
| 2 Asp-195v 所产蛋白酶的条件优化、分离纯化及其特性研究 | 第26-55页 |
| ·材料和方法 | 第26-36页 |
| ·菌种、试验材料及仪器 | 第26-28页 |
| ·培养基及培养方法 | 第28-29页 |
| ·蛋白酶活力测定方法 | 第29-30页 |
| ·蛋白酶的分离纯化 | 第30-33页 |
| ·蛋白质SDS-PAGE 不连续垂直板电泳 | 第33-35页 |
| ·酶学性质的测定 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-52页 |
| ·蛋白酶标准曲线的绘制 | 第36-37页 |
| ·产蛋白酶条件优化 | 第37-39页 |
| ·盐度对培养条件的影响 | 第39-40页 |
| ·最佳盐析条件 | 第40-42页 |
| ·Sephadex G-100 凝胶柱层析 | 第42-43页 |
| ·DEAE FF 弱阴离子交换柱层析 | 第43-44页 |
| ·蛋白酶纯化过程总表 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE 不连续垂直板电泳 | 第44-45页 |
| ·蛋白酶特性的研究 | 第45-52页 |
| ·结论与讨论 | 第52-55页 |
| ·Asp-195v 的条件优化 | 第52-53页 |
| ·Asp-195v 所产蛋白酶的纯化 | 第53页 |
| ·Asp-195v 所产蛋白酶的特性分析 | 第53-55页 |
| 3 棒曲霉Asp-195v 蛋白酶基因的功能cDNA 片段克隆 | 第55-67页 |
| ·材料和方法 | 第55-60页 |
| ·试供菌株与质粒 | 第55页 |
| ·实验仪器 | 第55页 |
| ·生化试剂及培养基 | 第55-56页 |
| ·目的基因cDNA 中间片段的分离 | 第56-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-63页 |
| ·蛋白酶cDNA 基因的分离 | 第60-62页 |
| ·DNA 序列测定结果及其氨基酸序列 | 第62-63页 |
| ·结论与讨论 | 第63-67页 |
| ·RT-PCR 中常见的问题及解决方法 | 第63-65页 |
| ·蛋白酶基因的初步分析 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附录A 棒曲霉金色变种的微观特征 | 第73-74页 |
| 附录B 引物设计 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |