| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 引言 | 第13-19页 |
| 1 魁蚶生物学概述 | 第13-14页 |
| 1.1 魁蚶分类地位及相关习性 | 第13页 |
| 1.2 魁蚶分子生物学研究进展 | 第13-14页 |
| 2 贝类免疫系统研究 | 第14-16页 |
| 2.1 贝类对异己物质的识别机理 | 第14-15页 |
| 2.2 贝类血细胞的分类 | 第15页 |
| 2.3 贝类的免疫防御 | 第15-16页 |
| 3 贝类血红蛋白研究进展 | 第16-17页 |
| 3.1 贝类血红蛋白的结构 | 第16-17页 |
| 3.2 贝类血红蛋白的功能 | 第17页 |
| 4 贝类免疫系统研究展望 | 第17-18页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第一章 低氧胁迫对不同贝类酶活性的影响 | 第19-28页 |
| 1.1 材料与方法 | 第19-20页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 1.1.3 溶氧半致死试验设计 | 第19页 |
| 1.1.4 低氧胁迫酶活试验设计 | 第19-20页 |
| 1.1.5 数据处理 | 第20页 |
| 1.2 实验结果 | 第20-26页 |
| 1.2.1 低氧胁迫对魁蚶、栉孔扇贝和四角蛤蜊生存状态影响 | 第20-22页 |
| 1.2.2 低氧胁迫对魁蚶、栉孔扇贝和四角蛤蜊超氧化物歧化酶(SOD)的影响 | 第22-24页 |
| 1.2.3 低氧胁迫对魁蚶、栉孔扇贝和四角蛤蜊总抗氧化能力(T-AOC)的影响 | 第24-26页 |
| 1.3 讨论 | 第26-28页 |
| 第二章 魁蚶血红蛋白基因的克隆及分析 | 第28-46页 |
| 2.1 实验材料与处理方法 | 第28-30页 |
| 2.1.1 实验材料与来源 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验处理及实验组织获得 | 第29-30页 |
| 2.2 基因克隆与序列分析 | 第30-32页 |
| 2.2.1 总RNA提取与与cDNA合成 | 第30页 |
| 2.2.2 SbHbI基因克隆 | 第30页 |
| 2.2.3 序列分析 | 第30页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第30-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-43页 |
| 2.3.1 SbHb基因序列 | 第32-35页 |
| 2.3.2 SbHb及其它物种血红蛋白氨基酸序列同源性的比较 | 第35-38页 |
| 2.3.3 SbHb基因组织表达特征 | 第38-39页 |
| 2.3.4 SbHb基因在幼虫不同发育阶段的表达特征 | 第39-40页 |
| 2.3.5 SbHb基因在低氧胁迫后的表达特征 | 第40-42页 |
| 2.3.6 SbHb基因在鳗弧菌刺激后的表达变化 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-46页 |
| 第三章 魁蚶血红蛋白基因的原核表达及类酚氧化酶活性分析 | 第46-58页 |
| 3.1 实验试剂 | 第46-48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 原核表达载体构建 | 第48-49页 |
| 3.2.2 重组蛋白的表达和检测 | 第49页 |
| 3.2.3 重组蛋白的检测 | 第49页 |
| 3.2.4 Western-bloting分析 | 第49页 |
| 3.2.5 重组蛋白的复性 | 第49-50页 |
| 3.2.6 复性蛋白的类酚氧化酶活的鉴定 | 第50页 |
| 3.2.7 类酚氧化酶活性的测定及其温度和PH对其的影响 | 第50页 |
| 3.2.8 重组蛋白类酚氧化酶活性的酶动力学曲线测定 | 第50页 |
| 3.2.9 氧化酶抑制剂对重组蛋白类酚氧化酶活性影响 | 第50页 |
| 3.2.10 金属螯合物和金属离子对重组蛋白类酚氧化酶活性影响 | 第50-51页 |
| 3.2.11 Fe2+对EDTA预处理的重组蛋白类酚氧化酶活性的恢复作用 | 第51页 |
| 3.2.12 重组蛋白抑菌活性检测 | 第51页 |
| 3.3 实验结果 | 第51-56页 |
| 3.3.1 重组蛋白的纯化、复性和类酚氧化酶活性检测 | 第51-52页 |
| 3.3.2 重组蛋白在不同pH和温度条件下的生化特性 | 第52-54页 |
| 3.3.3 氧化酶抑制剂、金属螯合物和金属离子对重组蛋白酶活性影响 | 第54-55页 |
| 3.3.4 Fe~(2+)对EDTA预处理的重组蛋白类酚氧化酶活性的恢复作用 | 第55-56页 |
| 3.3.5 2重组蛋白抑菌活性检测 | 第56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-58页 |
| 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
