摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章 引言 | 第16-22页 |
1 三疣梭子蟹 | 第16-17页 |
1.1 分类地位与区域分布 | 第16页 |
1.2 形态特征 | 第16页 |
1.3 生活习性及繁殖习性 | 第16页 |
1.4 养殖现状 | 第16-17页 |
2 甲壳动物渗透压调节机制研究进展 | 第17-19页 |
2.1 渗透压调节的主要器官 | 第17页 |
2.2 渗透压调节机制 | 第17-18页 |
2.3 神经内分泌系统的调控作用 | 第18-19页 |
3 转录组学及其在甲壳类分析中的研究进展 | 第19-20页 |
4 蝗抗利尿肽、甲壳动物心激肽和甲壳动物高血糖素 | 第20-21页 |
4.1 蝗抗利尿肽 | 第20页 |
4.2 甲壳动物心激肽 | 第20页 |
4.3 高血糖素 | 第20-21页 |
5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 低盐胁迫下三疣梭子蟹鳃表达谱分析 | 第22-41页 |
1 材料与方法 | 第22-26页 |
1.1 实验材料 | 第22-23页 |
1.2 建库、测序与分析 | 第23-26页 |
2 结果分析与讨论 | 第26-38页 |
2.1 表达谱测序及比对结果分析 | 第26-27页 |
2.2 基因定量分析 | 第27-30页 |
2.3 差异表达基因(DEG) | 第30-34页 |
2.4 差异基因的GO功能显著性富集分析 | 第34-37页 |
2.5 KEGG富集分析 | 第37-38页 |
3 神经肽基因的选定 | 第38-40页 |
4 小结 | 第40-41页 |
第三章 低盐胁迫下蝗抗利尿肽基因的表达分析 | 第41-58页 |
1 实验材料与方法 | 第41-48页 |
1.1 实验动物 | 第41页 |
1.2 实验方法 | 第41-42页 |
1.3 RNA提取 | 第42页 |
1.4 RACE模版的合成 | 第42-43页 |
1.5 PtNPcDNA全长的克隆 | 第43-46页 |
1.6 序列分析 | 第46页 |
1.7 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第46-47页 |
1.8 PtNP基因的组织表达及各处理组的表达特征分析 | 第47-48页 |
1.9 PtNP单核苷酸多态性位点的检测及分型 | 第48页 |
2 结果 | 第48-55页 |
2.1 PtNP基因全长cDNA的克隆与序列分析 | 第48-49页 |
2.2 PtNP氨基酸同源性及系统进化树分析 | 第49-51页 |
2.3 PtNP基因组织表达分析 | 第51页 |
2.4 盐度胁迫后PtNP基因在脑、鳃和眼柄组织中的差异表达分析 | 第51-54页 |
2.5 去除眼柄后三疣梭子蟹鳃组织中PtNP基因的差异表达分析 | 第54页 |
2.6 PtNP基因SNP位点分布及关联分析 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-56页 |
4 小结 | 第56-58页 |
第四章 甲壳动物心激肽基因克隆及在低盐适应中的功能验证 | 第58-70页 |
1 材料方法 | 第58-62页 |
1.1 实验材料 | 第58页 |
1.2 盐度胁迫实验 | 第58页 |
1.3 RNA提取 | 第58页 |
1.4 RACE模板合成 | 第58页 |
1.5 CCAP cDNA全长克隆 | 第58-59页 |
1.6 序列分析 | 第59页 |
1.7 样品RNA提取及反转录 | 第59页 |
1.8 CCAP基因的组织表达及各处理组的表达特征分析 | 第59页 |
1.9 原核表达及CCAP多肽注射 | 第59-61页 |
1.10 鳃组织Na~+/K~+-ATPase和V-ATPase活力测定 | 第61-62页 |
2 结果 | 第62-67页 |
2.1 CCAP基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析 | 第62页 |
2.2 CCAP基因组织表达分析 | 第62页 |
2.3 盐度胁迫后CCAP基因在胸神经节中的差异表达分析 | 第62-63页 |
2.4 CCAP表达载体的构建及蛋白检测 | 第63-66页 |
2.5 注射CCAP多肽后三疣梭子蟹的活力分析及盐度相关酶活力测定 | 第66-67页 |
3 讨论 | 第67-69页 |
4 小结 | 第69-70页 |
第五章 高血糖素基因DNA全长克隆及在低盐适应中的机理研究 | 第70-83页 |
1 材料方法 | 第70-75页 |
1.1 实验材料 | 第70页 |
1.2 盐度胁迫实验 | 第70页 |
1.3 RNA提取 | 第70页 |
1.4 RACE模板合成 | 第70页 |
1.5 RNA干扰实验 | 第70-72页 |
1.6 各实验组表达特征的分析 | 第72页 |
1.7 基因组DNA的提取 | 第72页 |
1.8 CHH基因全长的克隆 | 第72-73页 |
1.9 CHH启动子的克隆 | 第73-74页 |
1.10 序列分析 | 第74-75页 |
1.11 鳃组织Na~+/K~+-ATPase、V-ATPase和碳酸酐酶活力测定 | 第75页 |
2 结果 | 第75-80页 |
2.1 三疣梭子蟹CHH基因结构 | 第75-76页 |
2.2 启动子克隆及生物信息学分析 | 第76-78页 |
2.3 Pt-CHH基因的组织表达分布 | 第78页 |
2.4 盐度胁迫后Pt-CHH2基因在鳃组织中的差异表达分析 | 第78-79页 |
2.5 注射dsRNA后鳃组织中Pt-CHH2基因的表达分析及盐度相关酶活力测定 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-82页 |
3.1 CHH基因结构 | 第80-81页 |
3.2 组织表达分布 | 第81页 |
3.3 盐度表达和RNA干扰 | 第81-82页 |
4 小结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-94页 |
附录 | 第94-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
硕士期间论文发表情况 | 第99页 |