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三疣梭子蟹鳃表达谱分析及3个神经肽基因在低盐适应中的功能研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
第一章 引言第16-22页
    1 三疣梭子蟹第16-17页
        1.1 分类地位与区域分布第16页
        1.2 形态特征第16页
        1.3 生活习性及繁殖习性第16页
        1.4 养殖现状第16-17页
    2 甲壳动物渗透压调节机制研究进展第17-19页
        2.1 渗透压调节的主要器官第17页
        2.2 渗透压调节机制第17-18页
        2.3 神经内分泌系统的调控作用第18-19页
    3 转录组学及其在甲壳类分析中的研究进展第19-20页
    4 蝗抗利尿肽、甲壳动物心激肽和甲壳动物高血糖素第20-21页
        4.1 蝗抗利尿肽第20页
        4.2 甲壳动物心激肽第20页
        4.3 高血糖素第20-21页
    5 本研究的目的与意义第21-22页
第二章 低盐胁迫下三疣梭子蟹鳃表达谱分析第22-41页
    1 材料与方法第22-26页
        1.1 实验材料第22-23页
        1.2 建库、测序与分析第23-26页
    2 结果分析与讨论第26-38页
        2.1 表达谱测序及比对结果分析第26-27页
        2.2 基因定量分析第27-30页
        2.3 差异表达基因(DEG)第30-34页
        2.4 差异基因的GO功能显著性富集分析第34-37页
        2.5 KEGG富集分析第37-38页
    3 神经肽基因的选定第38-40页
    4 小结第40-41页
第三章 低盐胁迫下蝗抗利尿肽基因的表达分析第41-58页
    1 实验材料与方法第41-48页
        1.1 实验动物第41页
        1.2 实验方法第41-42页
        1.3 RNA提取第42页
        1.4 RACE模版的合成第42-43页
        1.5 PtNPcDNA全长的克隆第43-46页
        1.6 序列分析第46页
        1.7 总RNA的提取及cDNA的合成第46-47页
        1.8 PtNP基因的组织表达及各处理组的表达特征分析第47-48页
        1.9 PtNP单核苷酸多态性位点的检测及分型第48页
    2 结果第48-55页
        2.1 PtNP基因全长cDNA的克隆与序列分析第48-49页
        2.2 PtNP氨基酸同源性及系统进化树分析第49-51页
        2.3 PtNP基因组织表达分析第51页
        2.4 盐度胁迫后PtNP基因在脑、鳃和眼柄组织中的差异表达分析第51-54页
        2.5 去除眼柄后三疣梭子蟹鳃组织中PtNP基因的差异表达分析第54页
        2.6 PtNP基因SNP位点分布及关联分析第54-55页
    3 讨论第55-56页
    4 小结第56-58页
第四章 甲壳动物心激肽基因克隆及在低盐适应中的功能验证第58-70页
    1 材料方法第58-62页
        1.1 实验材料第58页
        1.2 盐度胁迫实验第58页
        1.3 RNA提取第58页
        1.4 RACE模板合成第58页
        1.5 CCAP cDNA全长克隆第58-59页
        1.6 序列分析第59页
        1.7 样品RNA提取及反转录第59页
        1.8 CCAP基因的组织表达及各处理组的表达特征分析第59页
        1.9 原核表达及CCAP多肽注射第59-61页
        1.10 鳃组织Na~+/K~+-ATPase和V-ATPase活力测定第61-62页
    2 结果第62-67页
        2.1 CCAP基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析第62页
        2.2 CCAP基因组织表达分析第62页
        2.3 盐度胁迫后CCAP基因在胸神经节中的差异表达分析第62-63页
        2.4 CCAP表达载体的构建及蛋白检测第63-66页
        2.5 注射CCAP多肽后三疣梭子蟹的活力分析及盐度相关酶活力测定第66-67页
    3 讨论第67-69页
    4 小结第69-70页
第五章 高血糖素基因DNA全长克隆及在低盐适应中的机理研究第70-83页
    1 材料方法第70-75页
        1.1 实验材料第70页
        1.2 盐度胁迫实验第70页
        1.3 RNA提取第70页
        1.4 RACE模板合成第70页
        1.5 RNA干扰实验第70-72页
        1.6 各实验组表达特征的分析第72页
        1.7 基因组DNA的提取第72页
        1.8 CHH基因全长的克隆第72-73页
        1.9 CHH启动子的克隆第73-74页
        1.10 序列分析第74-75页
        1.11 鳃组织Na~+/K~+-ATPase、V-ATPase和碳酸酐酶活力测定第75页
    2 结果第75-80页
        2.1 三疣梭子蟹CHH基因结构第75-76页
        2.2 启动子克隆及生物信息学分析第76-78页
        2.3 Pt-CHH基因的组织表达分布第78页
        2.4 盐度胁迫后Pt-CHH2基因在鳃组织中的差异表达分析第78-79页
        2.5 注射dsRNA后鳃组织中Pt-CHH2基因的表达分析及盐度相关酶活力测定第79-80页
    3 讨论第80-82页
        3.1 CHH基因结构第80-81页
        3.2 组织表达分布第81页
        3.3 盐度表达和RNA干扰第81-82页
    4 小结第82-83页
参考文献第83-94页
附录第94-98页
致谢第98-99页
硕士期间论文发表情况第99页

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