英文缩略词表 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
前言 | 第16-22页 |
第一章 苏丹型埃博拉病毒抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第22-30页 |
1.1 材料 | 第22-23页 |
1.1.1 菌株、载体和血清 | 第22页 |
1.1.2 试剂和仪器 | 第22-23页 |
1.1.3 溶液配制 | 第23页 |
1.2 方法 | 第23-25页 |
1.2.1 引物设计与合成 | 第23页 |
1.2.2 目的片段的扩增及重组质粒的构建 | 第23页 |
1.2.3 SUDV GP重组蛋白表达及纯化 | 第23-24页 |
1.2.4 SUDV GP抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第24页 |
1.2.5 ELISA方法的验证 | 第24-25页 |
1.3 结果 | 第25-28页 |
1.3.1 GP基因的扩增与重组表达质粒的鉴定 | 第25页 |
1.3.2 SUDV GP重组蛋白的表达及纯化 | 第25-26页 |
1.3.3 重组蛋白SUDV GP的鉴定 | 第26-27页 |
1.3.4 SUDV GP抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第27-28页 |
1.3.5 ELISA方法的验证 | 第28页 |
1.4 讨论 | 第28-29页 |
1.5 小结 | 第29-30页 |
第二章 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的构建与鉴定 | 第30-44页 |
2.1 材料 | 第30-32页 |
2.1.1 基因、载体、细胞及抗体 | 第30页 |
2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第30-31页 |
2.1.3 主要溶液及配方 | 第31页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第31-32页 |
2.2 方法 | 第32-37页 |
2.2.1 基因合成 | 第32页 |
2.2.2 引物设计及合成 | 第32页 |
2.2.3 SUDV GP和VP40片断扩增及纯化回收 | 第32-33页 |
2.2.4 重组质粒pFD-GP-GP和pFD-VP40-VP40的构建 | 第33-34页 |
2.2.5 重组杆粒rBacmid-GP-GP和rBacmid-VP40-VP40的制备 | 第34-35页 |
2.2.6 重组杆粒rBacmid-GP-GP和rBacmid-VP40-VP40的鉴定 | 第35页 |
2.2.7 重组杆状病毒rBac-GP-GP和rBac-VP40-VP40的拯救 | 第35页 |
2.2.8 重组杆状病毒rBac-GP-GP和rBac-VP40-VP40的鉴定 | 第35-36页 |
2.2.9 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的制备 | 第36-37页 |
2.2.10 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的鉴定 | 第37页 |
2.3 结果 | 第37-41页 |
2.3.1 SUDV GP基因和VP40基因的扩增 | 第37-38页 |
2.3.2 重组质粒pFD-GP-GP和pFD-VP40-VP40的鉴定 | 第38页 |
2.3.3 重组杆粒rBacmid-GP-GP和rBacmid-VP40-VP40的鉴定 | 第38-39页 |
2.3.4 重组杆状病毒rBac-GP-GP和rBac-VP40-VP40的鉴定 | 第39-40页 |
2.3.5 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的鉴定 | 第40-41页 |
2.4 讨论 | 第41-43页 |
2.5 小结 | 第43-44页 |
第三章 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒实验免疫研究 | 第44-59页 |
3.1 材料 | 第44-45页 |
3.1.1 实验动物 | 第44页 |
3.1.2 免疫原及佐剂 | 第44页 |
3.1.3 试剂 | 第44-45页 |
3.1.4 溶液配制 | 第45页 |
3.2 方法 | 第45-51页 |
3.2.1 最佳佐剂的筛选 | 第45-46页 |
3.2.2 小鼠免疫 | 第46页 |
3.2.3 ELISA检测SUDV VLP免疫小鼠IgG抗体 | 第46-47页 |
3.2.4 假病毒检测SUDV VLP免疫小鼠中和抗体 | 第47-48页 |
3.2.5 B细胞活化流式分析 | 第48-49页 |
3.2.6 IFN-γ与IL-4酶联免疫斑点检测 | 第49-50页 |
3.2.7 ELISA检测细胞因子 | 第50-51页 |
3.3 结果 | 第51-57页 |
3.3.1 最佳佐剂的筛选 | 第51-53页 |
3.3.2 SUDV VLPs免疫小鼠抗体效价检测 | 第53-54页 |
3.3.3 免疫小鼠淋巴结B细胞活化 | 第54-55页 |
3.3.4 IFN-γ与IL-4分泌检测 | 第55-56页 |
3.3.5 ELISA检测细胞因子分泌量 | 第56-57页 |
3.4 讨论 | 第57页 |
3.5 小结 | 第57-59页 |
第四章 结论和展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
作者在学期间取得的学术成果 | 第68-69页 |
主要简历 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |