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苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的制备与实验免疫研究

英文缩略词表第8-10页
摘要第10-13页
Abstract第13-15页
前言第16-22页
第一章 苏丹型埃博拉病毒抗体间接ELISA检测方法的建立第22-30页
    1.1 材料第22-23页
        1.1.1 菌株、载体和血清第22页
        1.1.2 试剂和仪器第22-23页
        1.1.3 溶液配制第23页
    1.2 方法第23-25页
        1.2.1 引物设计与合成第23页
        1.2.2 目的片段的扩增及重组质粒的构建第23页
        1.2.3 SUDV GP重组蛋白表达及纯化第23-24页
        1.2.4 SUDV GP抗体间接ELISA检测方法的建立第24页
        1.2.5 ELISA方法的验证第24-25页
    1.3 结果第25-28页
        1.3.1 GP基因的扩增与重组表达质粒的鉴定第25页
        1.3.2 SUDV GP重组蛋白的表达及纯化第25-26页
        1.3.3 重组蛋白SUDV GP的鉴定第26-27页
        1.3.4 SUDV GP抗体间接ELISA检测方法的建立第27-28页
        1.3.5 ELISA方法的验证第28页
    1.4 讨论第28-29页
    1.5 小结第29-30页
第二章 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的构建与鉴定第30-44页
    2.1 材料第30-32页
        2.1.1 基因、载体、细胞及抗体第30页
        2.1.2 主要试剂及试剂盒第30-31页
        2.1.3 主要溶液及配方第31页
        2.1.4 主要仪器设备第31-32页
    2.2 方法第32-37页
        2.2.1 基因合成第32页
        2.2.2 引物设计及合成第32页
        2.2.3 SUDV GP和VP40片断扩增及纯化回收第32-33页
        2.2.4 重组质粒pFD-GP-GP和pFD-VP40-VP40的构建第33-34页
        2.2.5 重组杆粒rBacmid-GP-GP和rBacmid-VP40-VP40的制备第34-35页
        2.2.6 重组杆粒rBacmid-GP-GP和rBacmid-VP40-VP40的鉴定第35页
        2.2.7 重组杆状病毒rBac-GP-GP和rBac-VP40-VP40的拯救第35页
        2.2.8 重组杆状病毒rBac-GP-GP和rBac-VP40-VP40的鉴定第35-36页
        2.2.9 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的制备第36-37页
        2.2.10 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的鉴定第37页
    2.3 结果第37-41页
        2.3.1 SUDV GP基因和VP40基因的扩增第37-38页
        2.3.2 重组质粒pFD-GP-GP和pFD-VP40-VP40的鉴定第38页
        2.3.3 重组杆粒rBacmid-GP-GP和rBacmid-VP40-VP40的鉴定第38-39页
        2.3.4 重组杆状病毒rBac-GP-GP和rBac-VP40-VP40的鉴定第39-40页
        2.3.5 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒的鉴定第40-41页
    2.4 讨论第41-43页
    2.5 小结第43-44页
第三章 苏丹型埃博拉病毒病毒样颗粒实验免疫研究第44-59页
    3.1 材料第44-45页
        3.1.1 实验动物第44页
        3.1.2 免疫原及佐剂第44页
        3.1.3 试剂第44-45页
        3.1.4 溶液配制第45页
    3.2 方法第45-51页
        3.2.1 最佳佐剂的筛选第45-46页
        3.2.2 小鼠免疫第46页
        3.2.3 ELISA检测SUDV VLP免疫小鼠IgG抗体第46-47页
        3.2.4 假病毒检测SUDV VLP免疫小鼠中和抗体第47-48页
        3.2.5 B细胞活化流式分析第48-49页
        3.2.6 IFN-γ与IL-4酶联免疫斑点检测第49-50页
        3.2.7 ELISA检测细胞因子第50-51页
    3.3 结果第51-57页
        3.3.1 最佳佐剂的筛选第51-53页
        3.3.2 SUDV VLPs免疫小鼠抗体效价检测第53-54页
        3.3.3 免疫小鼠淋巴结B细胞活化第54-55页
        3.3.4 IFN-γ与IL-4分泌检测第55-56页
        3.3.5 ELISA检测细胞因子分泌量第56-57页
    3.4 讨论第57页
    3.5 小结第57-59页
第四章 结论和展望第59-60页
参考文献第60-68页
作者在学期间取得的学术成果第68-69页
主要简历第69-70页
致谢第70-71页

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