摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第16-36页 |
1.1 引言 | 第16-17页 |
1.2 丁酸的概述 | 第17-18页 |
1.2.1 丁酸的性质 | 第17页 |
1.2.2 丁酸的用途 | 第17-18页 |
1.2.3 丁酸的生产 | 第18页 |
1.3 微生物发酵法产丁酸研究现状 | 第18-26页 |
1.3.1 丁酸发酵菌种 | 第18-20页 |
1.3.2 丁酸代谢合成途径 | 第20-22页 |
1.3.3 丁酸发酵存在的问题 | 第22-23页 |
1.3.4 丁酸发酵的发展策略 | 第23-26页 |
1.4 农作物秸秆资源转化利用 | 第26-32页 |
1.4.1 农作物秸秆酸水解 | 第27-28页 |
1.4.2 农作物秸秆酶水解 | 第28-30页 |
1.4.3 增强水解产物利用的策略 | 第30-32页 |
1.5 热激蛋白 | 第32-34页 |
1.5.1 热激蛋白简介 | 第32-33页 |
1.5.2 热激蛋白分类 | 第33页 |
1.5.3 ClassI型热激蛋白 | 第33-34页 |
1.6 本课题的目的意义和研究内容 | 第34-36页 |
1.6.1 目的意义 | 第34页 |
1.6.2 研究内容 | 第34-36页 |
第二章 C.tyrobutyricum中过表达6-磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶对丁酸产量的影响 | 第36-62页 |
2.1 引言 | 第36-37页 |
2.2 实验材料与方法 | 第37-48页 |
2.2.1 菌株和质粒 | 第37-38页 |
2.2.2 本章所用引物 | 第38页 |
2.2.3 试剂与仪器 | 第38-40页 |
2.2.4 培养基和溶液配方 | 第40-41页 |
2.2.5 实验方法 | 第41-46页 |
2.2.6 分析测定方法 | 第46-48页 |
2.3 结果与讨论 | 第48-60页 |
2.3.1 重组质粒的构建、鉴定与转化 | 第48-49页 |
2.3.2 重组菌株SDS-PAGE检测 | 第49-50页 |
2.3.3 C.tyrobutyricum补料分批发酵动力学 | 第50-54页 |
2.3.4 重组菌株丁酸耐受性的变化 | 第54-55页 |
2.3.5 重组菌株葡萄糖耐受性的变化 | 第55-56页 |
2.3.6 C.tyrobutyricum高糖浓度下分批发酵 | 第56-60页 |
2.4 本章小结 | 第60-62页 |
第三章 强化乙酰CoA到丁酸合成代谢流提高C.tyrobutyricum丁酸选择性 | 第62-80页 |
3.1 引言 | 第62-63页 |
3.2 实验材料与方法 | 第63-66页 |
3.2.1 菌株和质粒 | 第63-64页 |
3.2.2 本章所用引物 | 第64页 |
3.2.3 试剂与仪器 | 第64页 |
3.2.4 培养基和溶液配方 | 第64-65页 |
3.2.5 实验方法 | 第65-66页 |
3.2.6 分析测定方法 | 第66页 |
3.3 结果与讨论 | 第66-78页 |
3.3.1 重组质粒的构建、鉴定与转化 | 第66-68页 |
3.3.2 重组菌株SDS-PAGE检测 | 第68-69页 |
3.3.3 C.tyrobutyricum补料分批发酵动力学 | 第69-71页 |
3.3.4 C.tyrobutyricum中共表达cat1、crt和thl进一步降低乙酸产量 | 第71-73页 |
3.3.5 C.tyrobutyricumATCC25755/ppcc补料分批发酵动力学 | 第73-74页 |
3.3.6 C.tyrobutyricum在高糖浓度下分批发酵 | 第74-78页 |
3.4 本章小结 | 第78-80页 |
第四章 C.tyrobutyricum中过表达ClassI型热激蛋白对丁酸产量和丁酸耐受性的影响 | 第80-101页 |
4.1 引言 | 第80-81页 |
4.2 实验材料与方法 | 第81-89页 |
4.2.1 菌株和质粒 | 第81页 |
4.2.2 本章所用引物 | 第81-83页 |
4.2.3 试剂与仪器 | 第83-84页 |
4.2.4 培养基和溶液配方 | 第84页 |
4.2.5 实验方法 | 第84-88页 |
4.2.6 分析测定方法 | 第88-89页 |
4.3 结果与讨论 | 第89-99页 |
4.3.1 荧光定量PCR检测 | 第89-91页 |
4.3.2 重组质粒构建、鉴定与转化 | 第91-92页 |
4.3.3 重组菌株丁酸耐受性的变化 | 第92-93页 |
4.3.4 C.tyrobutyricum补料分批发酵动力学 | 第93-97页 |
4.3.5 ATCC25755/groESL中丁酸代谢关键酶活力变化 | 第97-99页 |
4.4 本章小结 | 第99-101页 |
第五章 过表达ClassI型热激蛋白基因groESL增强C.tyrobutyricum对木质纤维素水解液的利用 | 第101-119页 |
5.1 引言 | 第101-102页 |
5.2 实验材料与方法 | 第102-107页 |
5.2.1 菌株和质粒 | 第102页 |
5.2.2 试剂与仪器 | 第102-103页 |
5.2.3 培养基和溶液配方 | 第103页 |
5.2.4 实验方法 | 第103-104页 |
5.2.5 分析测定方法 | 第104-107页 |
5.3 结果与讨论 | 第107-117页 |
5.3.1 木质纤维素的酶解糖化 | 第107页 |
5.3.2 以纤维素水解液为底物摇瓶发酵产丁酸 | 第107-112页 |
5.3.3 纤维素水解衍生抑制物毒性测试 | 第112-114页 |
5.3.4 以CSH和RSH为底物游离细胞发酵产丁酸 | 第114-117页 |
5.4 本章小结 | 第117-119页 |
第六章 C.tyrobutyricum中表达短链脱氢酶/还原酶和醛酮还原酶对糠醛耐受性的影响 | 第119-135页 |
6.1 引言 | 第119-120页 |
6.2 实验材料与方法 | 第120-124页 |
6.2.1 菌株和质粒 | 第120页 |
6.2.2 本章所用引物 | 第120-121页 |
6.2.3 试剂与仪器 | 第121页 |
6.2.4 培养基和溶液配方 | 第121页 |
6.2.5 实验方法 | 第121-124页 |
6.2.6 分析测定方法 | 第124页 |
6.3 结果与讨论 | 第124-133页 |
6.3.1 糠醛对丁酸发酵的影响 | 第124-127页 |
6.3.2 重组质粒的构建、鉴定与转化 | 第127-128页 |
6.3.3 重组菌株SDS-PAGE检测 | 第128-129页 |
6.3.4 重组菌株糠醛耐受性的变化 | 第129-131页 |
6.3.5 重组菌株糠醛还原相关酶活性检测 | 第131-132页 |
6.3.6 以玉米芯水解液为底物摇瓶发酵产丁酸 | 第132-133页 |
6.4 本章小结 | 第133-135页 |
结论与展望 | 第135-139页 |
结论 | 第135-136页 |
创新性成果 | 第136-137页 |
展望 | 第137-139页 |
参考文献 | 第139-164页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第164-166页 |
致谢 | 第166-167页 |
附件 | 第167页 |