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多羔和单羔奶山羊发情期卵巢组织差异表达基因的筛选、鉴定及分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一篇 文献综述第14-34页
 第一章 调控雌性动物生殖机能的主要激素及因子第14-18页
   ·主要激素第14-15页
     ·促性腺激素释放激素(Gonadatropin Releasing Hormone, GnRH)第14页
     ·卵泡刺激素(Folliele Stimulating Hormone, FSH)第14页
     ·促黄体素(Luteinizing Hormone, LH)第14页
     ·雌激素(Estrogen)第14页
     ·孕激素(Progesterone)第14-15页
     ·抑制素(Inhibin)第15页
     ·卵泡抑制素(Folliculostatin)第15页
     ·活化素(Activins)第15页
     ·卵母细胞成熟抑制因子(Oocyte Maturation Inhibitor)第15页
   ·神经递质第15-16页
   ·细胞因子第16-18页
     ·TGF-β超家族对卵泡发育的调节第16页
     ·卵泡发育中IGF 系统的调节第16-17页
     ·卵泡发育调节中的其它因子第17-18页
 第二章 差异表达基因的研究方法第18-25页
   ·差别杂交法(DH/DS)第18页
   ·扣除杂交(SH)第18-19页
   ·mRNA 差异显示技术(DDRT-PCR)第19页
   ·代表性差异显示(RDA)第19-20页
   ·基因表达系列分析(SAGE)第20-21页
   ·抑制消减杂交(SSH)第21页
   ·交互扣除RNA 差别显示技术(RSDD)第21页
   ·差异消减展示技术(DSD)第21-22页
   ·表达序列标签串联排列连接(TALEST)第22页
   ·GeneCalling?技术第22页
   ·基因鉴定集成法(IPGI)第22-23页
   ·高通量克隆和高通量筛选技术第23页
   ·高通量平行标记测序技术(MPSS)第23页
   ·基因芯片技术第23-25页
 第三章 SSH 技术及其在动物基因研究中的应用第25-34页
   ·抑制消减杂交技术的产生及发展第25-27页
   ·SSH 技术的原理和基本步骤第27-28页
   ·SSH 技术的优缺点第28-30页
     ·SSH 的优点第28-30页
     ·SSH 技术的不足之处及对策第30页
   ·SSH 技术在动物基因研究中的应用第30-33页
     ·SSH 在动物发育生物学研究中的应用第30-31页
     ·SSH 在动物繁殖研究中的应用第31页
     ·SSH 在动物疾病研究中的应用第31-32页
     ·SSH 在动物营养研究中的应用第32页
     ·SSH 在动物应激研究中的应用第32页
     ·SSH 在动物生产性能研究中的应用第32-33页
   ·本研究的目的及意义第33-34页
第二篇 试验研究第34-106页
 第四章 多羔和单羔关中奶山羊发情期卵巢组织差异表达基因的筛选、鉴定和测序分析第34-61页
   ·材料与方法第34-44页
     ·试验材料第34-36页
     ·试验方法第36-44页
   ·结果与分析第44-57页
     ·多羔和单羔关中奶山羊卵巢组织中总RNA 的提取第44页
     ·多羔和单羔关中奶山羊卵巢组织中mRNA 的纯化与浓缩第44页
     ·消减效率的检测第44-45页
     ·鉴定文库质量第45-46页
     ·斑点杂交筛选结果第46页
     ·cDNA 消减文库的测序和分析第46-56页
     ·所得序列参与生物过程的分析结果第56-57页
   ·讨论第57-59页
     ·SSH 技术第57-58页
     ·卵巢差异基因第58-59页
   ·小结第59-61页
 第五章 筛选的12 个基因实时定量检测、与产羔数相关性分析和克隆鉴定第61-79页
   ·材料与方法第61-64页
     ·试验材料第61-62页
     ·试验方法第62-64页
   ·基因表达量与产羔数相关性分析第64页
   ·目的基因克隆第64-66页
     ·引物设计第64-65页
     ·目的片段的PCR 扩增第65-66页
     ·纯化回收第66页
     ·连接转化第66页
     ·菌落PCR 检测和测序第66页
     ·序列注册第66页
   ·结果与分析第66-75页
     ·实时定量PCR 检测差异表达基因第66-73页
     ·差异表达基因与产羔数的相关性第73-74页
     ·目的基因CDS 区的克隆第74-75页
   ·讨论第75-78页
     ·引物设计要领第75-76页
     ·PCR 条件的优化第76页
     ·PCR 条件的优化第76-77页
     ·与产羔数成正相关基因的作用第77-78页
   ·小结第78-79页
 第六章 DCN、OAZ1、EPHX1 和FSHR 的生物信息学分析第79-106页
   ·分析方法第79-80页
   ·结果与分析第80-103页
     ·DCN 基因的生物信息学分析第80-87页
     ·OAZ1 基因的生物信息学分析第87-91页
     ·EPHX1 基因的生物信息学分析第91-96页
     ·FSHR 的生物信息学分析第96-103页
   ·讨论第103-105页
   ·小结第105-106页
主要结论第106-108页
本研究的创新点第108-109页
进一步研究的问题第109-110页
参考文献第110-123页
附录第123-130页
致谢第130-131页
作者简介第131页

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