| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 1 绪论 | 第12-28页 |
| 1.1 L-酪氨酸及其衍生物的研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 L-酪氨酸的结构和性质 | 第12-13页 |
| 1.1.2 L-酪氨酸体内代谢和生理功能 | 第13-14页 |
| 1.1.4 L-酪氨酸代谢产物及其研究现状 | 第14-18页 |
| 1.2 微生物转化法概述 | 第18-20页 |
| 1.2.1 微生物转化及其主要方法 | 第18-19页 |
| 1.2.2 微生物转化的特点及优势 | 第19页 |
| 1.2.3 微生物转化的反应类型 | 第19-20页 |
| 1.2.4 微生物转化的应用领域 | 第20页 |
| 1.3 微生物代谢产物的分离纯化方法概述 | 第20-23页 |
| 1.3.1 发酵液的预处理 | 第20-22页 |
| 1.3.2 代谢产物的分离提取方法 | 第22-23页 |
| 1.3.3 代谢产物的晶体制备方法 | 第23页 |
| 1.4 氨基酸及其衍生物的分析鉴定方法概述 | 第23-26页 |
| 1.4.1 氨基酸和氨基酸衍生物的分析检测方法 | 第23-25页 |
| 1.4.2 氨基酸及氨基酸衍生物的结构鉴定方法 | 第25-26页 |
| 1.5 本课题研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第26页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第26-27页 |
| 1.6 本课题研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 2 L-酪氨酸转化菌株的筛选及 16S rDNA 分子鉴定 | 第28-49页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-40页 |
| 2.2.1 样品来源 | 第28页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.2.3 主要试剂及配制 | 第29-32页 |
| 2.2.4 培养基及转化底物 | 第32页 |
| 2.2.5 转化及检测方法的建立 | 第32-36页 |
| 2.2.6 L-酪氨酸转化菌株的筛选方法 | 第36-37页 |
| 2.2.7 ZL-20 菌株的形态观察分析 | 第37-38页 |
| 2.2.8 ZL-20 菌株的 16S rDNA 分子鉴定 | 第38-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-48页 |
| 2.3.1 L-酪氨酸转化菌株筛选结果 | 第40-43页 |
| 2.3.2 ZL-20 菌株的形态观察分析结果 | 第43-45页 |
| 2.3.3 ZL-20 菌株的 16S rDNA 分子鉴定结果 | 第45-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 3 ZL-20 菌株培养条件及转化体系的初步优化 | 第49-65页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 材料与方法 | 第49-53页 |
| 3.2.1 出发菌株 | 第49页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第49页 |
| 3.2.3 试剂及配制 | 第49页 |
| 3.2.4 培养基及转化底物 | 第49-50页 |
| 3.2.5 ZL-20 菌株的生长曲线的测定 | 第50页 |
| 3.2.6 ZL-20 菌株三个产物转化条件的初步确定 | 第50页 |
| 3.2.7 ZL-20 菌株培养及转化条件单因素试验 | 第50-51页 |
| 3.2.8 ZL-20 菌株转化底物正交试验优化 | 第51-52页 |
| 3.2.9 ZL-20 菌株产酶培养基正交试验优化 | 第52-53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-64页 |
| 3.3.1 ZL-20 菌株的生长曲线测定结果 | 第53-54页 |
| 3.3.2 ZL-20 菌株三个产物转化条件的初步确定结果 | 第54-55页 |
| 3.3.3 ZL-20 菌株培养及转化条件单因素试验结果 | 第55-59页 |
| 3.3.4 ZL-20 菌株转化底物正交优化试验结果 | 第59-60页 |
| 3.3.5 ZL-20 菌株产酶培养基正交试验优化结果 | 第60-64页 |
| 3.4 本章小结 | 第64-65页 |
| 4 ZL-20 菌株主要转化产物的分离提取及晶体制备 | 第65-83页 |
| 4.1 引言 | 第65页 |
| 4.2 材料与方法 | 第65-70页 |
| 4.2.1 仪器设备 | 第65-66页 |
| 4.2.2 试剂及配制 | 第66页 |
| 4.2.3 转化液的预处理 | 第66-67页 |
| 4.2.4 产物①等电点冷却法初结晶 | 第67页 |
| 4.2.5 产物②离子交换树脂分离纯化 | 第67-68页 |
| 4.2.6 产物②和产物③有机溶剂萃取 | 第68-69页 |
| 4.2.7 三个转化产物的初结晶及重结晶 | 第69-70页 |
| 4.2.8 产物③重结晶 Prep-HPLC 的分离纯化 | 第70页 |
| 4.3 结果与分析 | 第70-82页 |
| 4.3.1 转化产物预处理结果 | 第70-72页 |
| 4.3.2 产物①等电点冷却法初结晶结果 | 第72-73页 |
| 4.3.3 产物②离子交换树脂分离纯化结果 | 第73页 |
| 4.3.4 产物②和产物③有机溶剂萃取结果 | 第73-77页 |
| 4.3.5 三个转化产物的结晶及重结晶结果 | 第77-80页 |
| 4.3.6 产物③重结晶 Prep-HPLC 的分离纯化结果 | 第80-82页 |
| 4.4 本章小结 | 第82-83页 |
| 5 ZL-20 菌株主要转化产物的结构鉴定及代谢分析 | 第83-96页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 材料与方法 | 第83-85页 |
| 5.2.1 仪器设备 | 第83-84页 |
| 5.2.2 试剂及配置 | 第84页 |
| 5.2.3 产物①的 NMR 和 MS 结构鉴定 | 第84页 |
| 5.2.4 产物②的 NMR 和 MS 结构鉴定 | 第84页 |
| 5.2.5 产物③的 NMR 和 MS 结构鉴定 | 第84页 |
| 5.2.6 转化产物的代谢通路及作用酶分析 | 第84-85页 |
| 5.3 结果与分析 | 第85-95页 |
| 5.3.1 产物①的 NMR 和 MS 结构鉴定结果 | 第85-86页 |
| 5.3.2 产物②的 NMR 和 MS 结构鉴定结果 | 第86-90页 |
| 5.3.3 产物③的 NMR 和 MS 结构鉴定结果 | 第90-93页 |
| 5.3.4 转化产物的代谢通路及作用酶分析结果 | 第93-95页 |
| 5.4 本章小结 | 第95-96页 |
| 6 结论与讨论 | 第96-98页 |
| 6.1 结论 | 第96-97页 |
| 6.2 讨论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-101页 |
| 个人简历和研究成果 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
