| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 植物内生细菌 | 第11-13页 |
| 1.1.1 植物内生细菌的概念 | 第11页 |
| 1.1.2 植物内生细菌的来源、种类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物内生芽孢杆菌的生防作用机制 | 第12-13页 |
| 1.2 构建微生物突变体的研究概况 | 第13-14页 |
| 1.2.1 构建微生物突变体的常用方法 | 第13-14页 |
| 1.2.2 构建微生物突变体库的意义 | 第14页 |
| 1.3 转座子随机插入突变技术 | 第14-18页 |
| 1.3.1 转座子 Tn917 | 第14-15页 |
| 1.3.2 转座子 Tn10 | 第15-16页 |
| 1.3.3 Mariner 家族转座元件 | 第16-18页 |
| 1.4 生防菌拮抗相关基因的研究进展 | 第18页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 1.6 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 枯草芽孢杆菌 EDR4 的转化及转座子插入突变体库的构建 | 第20-36页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料和方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 供试质粒与菌株 | 第20-21页 |
| 2.2.2 抗生素、工具酶及引物合成 | 第21页 |
| 2.2.3 主要试剂、缓冲液及仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.4 培养基及培养条件 | 第22-23页 |
| 2.2.5 枯草芽孢杆菌 EDR4 的转化 | 第23-24页 |
| 2.2.6 枯草芽孢杆菌 EDR4-MA 转化子的分子检测 | 第24-25页 |
| 2.2.7 枯草芽孢杆菌 EDR4 转座子插入突变体库的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.8 Southern 杂交验证 | 第27-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
| 2.3.1 枯草芽孢杆菌 EDR4 转化体系的优化 | 第29-31页 |
| 2.3.2 枯草芽孢杆菌 EDR4-MA 转化子的分子检测结果 | 第31-32页 |
| 2.3.3 枯草芽孢杆菌 EDR4 转座子插入突变体库的建立 | 第32-33页 |
| 2.3.4 转座子插入位点随机性及拷贝数检测结果 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第34-36页 |
| 2.4.1 质粒 pMarA 向枯草芽孢杆菌 EDR4 的转化 | 第34页 |
| 2.4.2 高温诱导下的 TnYLB-1 的转座作用 | 第34-35页 |
| 2.4.3 转座子插入位点随机性及拷贝数检测 | 第35-36页 |
| 第三章 抑菌作用改变突变株的筛选及拮抗相关基因的鉴定 | 第36-46页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 材料和方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 供试载体与菌株 | 第36-37页 |
| 3.2.2 抗生素、工具酶及引物合成 | 第37页 |
| 3.2.3 主要试剂、缓冲液及仪器 | 第37页 |
| 3.2.4 培养基及培养条件 | 第37页 |
| 3.2.5 枯草芽孢杆菌 EDR4 抑菌活性改变突变体的筛选 | 第37-38页 |
| 3.2.6 反向 PCR 获取突变体转座子侧翼序列 | 第38-39页 |
| 3.2.7 反向 PCR 扩增片段的序列分析 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-45页 |
| 3.3.1 枯草芽孢杆菌 EDR4 活性改变突变体的筛选结果 | 第39-40页 |
| 3.3.2 活性改变突变体生物学特性研究 | 第40-42页 |
| 3.3.3 反向 PCR 扩增突变体转座子侧翼序列 | 第42页 |
| 3.3.4 插入位点侧翼序列的分析鉴定 | 第42-45页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第45-46页 |
| 第四章 小结与结论 | 第46-47页 |
| 4.1 小结 | 第46页 |
| 4.2 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
