摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
符号说明 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 杆状病毒分类 | 第10-11页 |
1.2 杆状病毒的感染周期 | 第11-13页 |
1.3 杆状病毒基因组 | 第13-15页 |
1.3.1 核心基因 | 第14页 |
1.3.2 杆状病毒基因的时序性 | 第14页 |
1.3.3 结构蛋白基因和非结构蛋白基因 | 第14-15页 |
1.4 杆状病毒的应用 | 第15-19页 |
1.4.1 杆状病毒作为生物杀虫剂的研究 | 第15-16页 |
1.4.2 杆状病毒应用于基因治疗 | 第16-17页 |
1.4.3 杆状病毒表达病毒样颗粒制备疫苗 | 第17页 |
1.4.4 杆状病毒表面展示系统 | 第17-18页 |
1.4.5 Bac-to-Bac系统 | 第18-19页 |
1.5 ac124基因背景知识 | 第19-20页 |
1.6 本论文的研究意义和目的 | 第20-21页 |
第二章 ac124基因缺失、拯救、野生型重组病毒的构建及缺失对病毒复制的影响 | 第21-42页 |
2.1 实验材料 | 第21-26页 |
2.1.1 菌种、质粒 | 第21-23页 |
2.1.2 细胞、昆虫 | 第23-24页 |
2.1.3 试剂、酶及抗生素 | 第24页 |
2.1.4 培养基 | 第24-25页 |
2.1.5 引物 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-32页 |
2.2.1 PCR反应体系及反应程序 | 第26页 |
2.2.2 多功能DNA纯化回收试剂盒回收PCR产物和酶切产物 | 第26-27页 |
2.2.3 酶切反应 | 第27-28页 |
2.2.4 酶连反应 | 第28页 |
2.2.5 CaCl_2法制备大肠杆菌的感受态细胞 | 第28页 |
2.2.6 质粒转化(转座)感受态细胞 | 第28-29页 |
2.2.7 质粒提取 | 第29-30页 |
2.2.8 细胞的转染感染步骤 | 第30-31页 |
2.2.9 测病毒滴度制病毒一步生长曲线 | 第31页 |
2.2.10 电镜样品的制备 | 第31-32页 |
2.3 实验结果 | 第32-42页 |
2.3.1 缺失ac124基因AcBacmid(vAc~(ac124-ko-PH-PG))的构建 | 第33-35页 |
2.3.2 ac124基因拯救型AcBacmid(vAc~(ac124-rep-PH-PG))的构建 | 第35-38页 |
2.3.3 重组病毒Bacmid转染细胞 | 第38-39页 |
2.3.4 重组病毒感染Sf9细胞的BV生长曲线 | 第39-40页 |
2.3.5 电镜观察重组病毒粒子 | 第40-42页 |
第三章 重组病毒的生物测定 | 第42-44页 |
3.1 材料方法 | 第42-43页 |
3.1.1 材料 | 第42页 |
3.1.2 方法 | 第42-43页 |
3.2 实验结果 | 第43-44页 |
第四章 AC124蛋白的亚细胞定位 | 第44-51页 |
4.1 实验材料 | 第44-45页 |
4.2 实验方法 | 第45-46页 |
4.2.1 载体的构建 | 第45页 |
4.2.2 制片进行亚细胞定位 | 第45-46页 |
4.3 实验结果 | 第46-51页 |
4.3.1 重组病毒的构建 | 第46-49页 |
4.3.2 激光共聚焦显微镜观察亚细胞定位 | 第49-51页 |
第五章 总结与讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-60页 |
攻读硕士学位期间学术论文发表情况 | 第60-61页 |