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大肠杆菌O157:H7小RNA McaS缺失株构建及相关功能探析

摘要第3-6页
Abstract第6-8页
符号说明第12-13页
上篇 文献综述第13-28页
    综述一 大肠杆菌O157:H7致病机理研究进展第13-20页
        1. 群体感应第14-15页
            1.1 LuxS/AI-2介导的Ⅱ型群体感应系统第15页
            1.2 Ⅰ型群体感应系统第15页
        2 粘附因子第15-16页
            2.1 紧密素(intimin)蛋白第15-16页
            2.2 菌毛第16页
            2.3 脂多糖和外膜蛋白(OMP)第16页
        3. 鞭毛和运动性第16-18页
        参考文献第18-20页
    综述二 细菌非编码小RNA McaS的研究进展第20-28页
        1 sRNA的作用机制以及分类第20-23页
            1.1 具有特殊活性的sRNA第20-21页
            1.2 与蛋白质相互作用而影响蛋白质功能的sRNA第21-22页
            1.3 与目的mRNA配对结合调控基因表达的sRNA第22-23页
        2 sRNA作用第23-25页
            2.1 细菌sRNA与铁离子第23-24页
            2.2 调控细菌群体感应和生物膜形成第24页
            2.3 细菌sRNA感知环境因素变化并调控毒力基因的表达第24-25页
        3 展望第25-26页
        参考文献第26-28页
下篇试验研究第28-61页
    研究一 大肠杆菌O157:H7 sRNA McaS缺失株及回补株的构建及对其上下游基因的影响探究第28-45页
        摘要第28-29页
        Abstract第29-30页
        1. 材料第30-31页
            1.1 菌株、质粒第30页
            1.2 培养基和主要试剂第30-31页
            1.3 主要仪器第31页
        2. 方法第31-39页
            2.1 大肠杆菌O157:H7缺失突变株O157:H7ΔmcaS的构建第31-35页
            2.2 回补株O157:H7ΔmcaS/pmcaS的构建第35-36页
            2.3 qRT-PCR检测突变株/T/ca湖I缺失对上下游基因表达量的影响第36-39页
        3 结果第39-42页
            3.1 重组PCR产物的制备第39-40页
            3.2 第一次重组菌O157:H7ΔmcaS的鉴定第40页
            3.3 二次重组菌O157:H7ΔmcaS的鉴定第40页
            3.4 运用鉴定引物PCR扩增缺失株O157:H7ΔmcaS并进行序列分析第40-41页
            3.5 回补质粒的鉴定第41页
            3.6 基因mcaS缺失后对其上下游基因表达量的影响第41-42页
        4. 讨论第42-44页
        参考文献第44-45页
    研究二 大肠杆菌O157:H7非编码小RNA McaS相关功能的研究第45-61页
        摘要第45-46页
        Abstract第46-47页
        1. 材料第47-48页
            1.1 菌株、质粒第47-48页
            1.2 实验试剂第48页
            1.3 主要仪器第48页
        2 方法第48-52页
            2.1 半固体运动性试验第48页
            2.2 qRT-PCR检测野生株、突变株和回补株中相关基因表达量变化第48-49页
            2.3 Caco-2细胞体外粘附试验第49页
            2.4 通过BB170的生物荧光检测各菌株中的信号分子AI-2第49-50页
            2.5 小RNA McaS同源性分析第50-52页
        3. 结果第52-58页
            3.1 大肠杆菌O157:H7非编码小RNA McaS对细菌运动过程的影响第52-54页
            3.2 McaS对细菌粘附过程的影响第54-56页
            3.3 大肠杆菌O157:H7非编码小RNA McaS对群体感应过程的影响第56-58页
            3.4 小RNA McaS的保守性研究第58页
        4. 讨论第58-60页
        参考文献第60-61页
全文总结第61-62页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第62页
学术会议发表文章及摘要第62-63页
致谢第63-64页

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