摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
符号说明 | 第12-13页 |
上篇 文献综述 | 第13-28页 |
综述一 大肠杆菌O157:H7致病机理研究进展 | 第13-20页 |
1. 群体感应 | 第14-15页 |
1.1 LuxS/AI-2介导的Ⅱ型群体感应系统 | 第15页 |
1.2 Ⅰ型群体感应系统 | 第15页 |
2 粘附因子 | 第15-16页 |
2.1 紧密素(intimin)蛋白 | 第15-16页 |
2.2 菌毛 | 第16页 |
2.3 脂多糖和外膜蛋白(OMP) | 第16页 |
3. 鞭毛和运动性 | 第16-18页 |
参考文献 | 第18-20页 |
综述二 细菌非编码小RNA McaS的研究进展 | 第20-28页 |
1 sRNA的作用机制以及分类 | 第20-23页 |
1.1 具有特殊活性的sRNA | 第20-21页 |
1.2 与蛋白质相互作用而影响蛋白质功能的sRNA | 第21-22页 |
1.3 与目的mRNA配对结合调控基因表达的sRNA | 第22-23页 |
2 sRNA作用 | 第23-25页 |
2.1 细菌sRNA与铁离子 | 第23-24页 |
2.2 调控细菌群体感应和生物膜形成 | 第24页 |
2.3 细菌sRNA感知环境因素变化并调控毒力基因的表达 | 第24-25页 |
3 展望 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-28页 |
下篇试验研究 | 第28-61页 |
研究一 大肠杆菌O157:H7 sRNA McaS缺失株及回补株的构建及对其上下游基因的影响探究 | 第28-45页 |
摘要 | 第28-29页 |
Abstract | 第29-30页 |
1. 材料 | 第30-31页 |
1.1 菌株、质粒 | 第30页 |
1.2 培养基和主要试剂 | 第30-31页 |
1.3 主要仪器 | 第31页 |
2. 方法 | 第31-39页 |
2.1 大肠杆菌O157:H7缺失突变株O157:H7ΔmcaS的构建 | 第31-35页 |
2.2 回补株O157:H7ΔmcaS/pmcaS的构建 | 第35-36页 |
2.3 qRT-PCR检测突变株/T/ca湖I缺失对上下游基因表达量的影响 | 第36-39页 |
3 结果 | 第39-42页 |
3.1 重组PCR产物的制备 | 第39-40页 |
3.2 第一次重组菌O157:H7ΔmcaS的鉴定 | 第40页 |
3.3 二次重组菌O157:H7ΔmcaS的鉴定 | 第40页 |
3.4 运用鉴定引物PCR扩增缺失株O157:H7ΔmcaS并进行序列分析 | 第40-41页 |
3.5 回补质粒的鉴定 | 第41页 |
3.6 基因mcaS缺失后对其上下游基因表达量的影响 | 第41-42页 |
4. 讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-45页 |
研究二 大肠杆菌O157:H7非编码小RNA McaS相关功能的研究 | 第45-61页 |
摘要 | 第45-46页 |
Abstract | 第46-47页 |
1. 材料 | 第47-48页 |
1.1 菌株、质粒 | 第47-48页 |
1.2 实验试剂 | 第48页 |
1.3 主要仪器 | 第48页 |
2 方法 | 第48-52页 |
2.1 半固体运动性试验 | 第48页 |
2.2 qRT-PCR检测野生株、突变株和回补株中相关基因表达量变化 | 第48-49页 |
2.3 Caco-2细胞体外粘附试验 | 第49页 |
2.4 通过BB170的生物荧光检测各菌株中的信号分子AI-2 | 第49-50页 |
2.5 小RNA McaS同源性分析 | 第50-52页 |
3. 结果 | 第52-58页 |
3.1 大肠杆菌O157:H7非编码小RNA McaS对细菌运动过程的影响 | 第52-54页 |
3.2 McaS对细菌粘附过程的影响 | 第54-56页 |
3.3 大肠杆菌O157:H7非编码小RNA McaS对群体感应过程的影响 | 第56-58页 |
3.4 小RNA McaS的保守性研究 | 第58页 |
4. 讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-61页 |
全文总结 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
学术会议发表文章及摘要 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |