延边黑熊源链球菌的分离鉴定及PCR诊断方法的建立
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第11-25页 |
| 1 链球菌的流行病学 | 第13-14页 |
| 2 链球菌菌体的病原学研究 | 第14-15页 |
| 3 链球菌的生物学特性 | 第15-16页 |
| 4 链球菌的分类 | 第16-17页 |
| 5 免疫原性 | 第17-19页 |
| 5.1 致病性物质 | 第17-18页 |
| 5.2 外毒素类 | 第18页 |
| 5.3 免疫原性 | 第18-19页 |
| 6 防治原则 | 第19页 |
| 7 链球菌所致的疾病 | 第19-20页 |
| 8 链球菌的感染机理研究 | 第20页 |
| 9 链球菌病诊断方法研究 | 第20-23页 |
| 9.1 病原学诊断 | 第20-21页 |
| 9.2 血清学诊断方法 | 第21-22页 |
| 9.3 分子生物学诊断 | 第22-23页 |
| 10 链球菌病的防治措施 | 第23页 |
| 11 本课题研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 材料与方法 | 第25-36页 |
| 1 材料 | 第25-28页 |
| 1.1 样本及菌株 | 第25页 |
| 1.2 质粒、实验动物、细胞 | 第25页 |
| 1.3 主要购买酶、试剂及其它配制的试剂 | 第25-26页 |
| 1.4 主要仪器 | 第26页 |
| 1.5 溶液及培养基 | 第26-28页 |
| 2 方法 | 第28-36页 |
| 2.1 延边黑熊源链球菌菌株的分离和鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2 16SrRNA通用引物的设计与合成 | 第30页 |
| 2.3 细菌的分离培养 | 第30-31页 |
| 2.4 细菌的纯培养 | 第31页 |
| 2.5 细菌基因组总DNA的提取 | 第31页 |
| 2.6 16SrRNA PCR扩增 | 第31-32页 |
| 2.7 核苷酸序列的测定与分析 | 第32页 |
| 2.8 熊源链球菌特异性PCR诊断方法的建立 | 第32-36页 |
| 结果 | 第36-43页 |
| 1 培养基上菌落的生长情况 | 第36页 |
| 2 过氧化氢(H_2O_2)试验鉴定结果 | 第36-37页 |
| 3 奥谱托欣试验、胆汁溶菌试验及生化试验结果 | 第37页 |
| 4 各种细菌的涂片染色镜检 | 第37-38页 |
| 5 16SrRAN PCR的扩增 | 第38-39页 |
| 6 PCR诊断方法基因扩增 | 第39-40页 |
| 7 克隆质粒的PCR鉴定 | 第40页 |
| 8 PCR诊断方法的特异性试验 | 第40-41页 |
| 9 灵敏度检测结果 | 第41页 |
| 10 PCR扩增的序列分析 | 第41-42页 |
| 11 熊源链球菌的分子分型 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 硕士期间发表并参与的论文 | 第54页 |