| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩写词表（Abbreviations) | 第10-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1 前言 | 第15页 |
| 2 文献综述 | 第15-23页 |
| 2.1 MicroRNA概述 | 第15-20页 |
| 2.1.1 MicroRNA的生物合成 | 第16页 |
| 2.1.2 MicroRNA的作用机制 | 第16-17页 |
| 2.1.3 肌肉特异性microRNAs (myomiRs) | 第17-19页 |
| 2.1.4 MiR-499-5p在心肌与骨骼肌中的功能 | 第19-20页 |
| 2.2 肌纤维概述 | 第20-23页 |
| 2.2.1 肌纤维的形成 | 第20页 |
| 2.2.2 肌纤维的分类 | 第20页 |
| 2.2.3 肌纤维类型与肉品质 | 第20-21页 |
| 2.2.4 肌纤维类型的调控 | 第21-23页 |
| 3 存在的问题及本研究的目的和意义 | 第23页 |
| 3.1 存在的问题 | 第23页 |
| 3.2 本研究的目的和意义 | 第23页 |
| 4 研究内容与技术路线 | 第23-25页 |
| 4.1 研究内容 | 第24页 |
| 4.2 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 试验部分 | 第25-74页 |
| 试验一 猪Sox6 3'UTR序列的扩增 | 第25-37页 |
| 1 前言 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-31页 |
| 2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第25页 |
| 2.1.2 质粒与菌种 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第26页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.2 反转录反应 | 第27-28页 |
| 2.2.3 PCR反应 | 第28-29页 |
| 2.2.4 PCR产物的电泳 | 第29页 |
| 2.2.5 PCR产物的回收 | 第29-30页 |
| 2.2.6 T载体的连接与转化 | 第30页 |
| 2.2.7 菌落PCR | 第30-31页 |
| 2.2.8 测序 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-35页 |
| 3.1 猪Sox6 3'UTR的扩增 | 第31-32页 |
| 3.2 重组T载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.3 序列的分析 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 小结 | 第36-37页 |
| 试验二 猪Sox6为miR-499-5p靶基因的鉴定 | 第37-60页 |
| 1 前言 | 第37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-52页 |
| 2.1 材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第37页 |
| 2.1.2 质粒与菌种 | 第37页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第38页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第38页 |
| 2.2 方法 | 第38-52页 |
| 2.2.1 菌落的扩增 | 第38-39页 |
| 2.2.2 质粒的提取 | 第39页 |
| 2.2.3 多个位点靶基因的鉴定 | 第39-47页 |
| 2.2.4 单个位点靶基因的鉴定 | 第47-50页 |
| 2.2.5 MiR-499-5p与猪Sox6在EDL和SOL中的表达 | 第50-52页 |
| 2.2.6 数据处理与分析 | 第52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-58页 |
| 3.1 多个miR-499-5p靶位点的突变及靶基因鉴定 | 第52-55页 |
| 3.2 单个miR-499-5p靶位点的突变及靶基因鉴定 | 第55-57页 |
| 3.3 MiR-499-5p与猪Sox6在EDL和SOL中的表达 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 小结 | 第59-60页 |
| 试验三 MiR-499-5p对猪骨骼肌慢肌纤维形成的调控及其机理 | 第60-74页 |
| 1 前言 | 第60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-68页 |
| 2.1 材料 | 第61-63页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第61页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第61-63页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第63页 |
| 2.2 方法 | 第63-68页 |
| 2.2.1 猪骨骼肌卫星细胞的分离 | 第63-64页 |
| 2.2.2 猪骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第64页 |
| 2.2.3 MiR-499-5p的转染 | 第64-65页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第65页 |
| 2.2.5 细胞总蛋白的提取 | 第65-66页 |
| 2.2.6 蛋白浓度的测定 | 第66页 |
| 2.2.7 Western blot分析 | 第66-68页 |
| 2.2.8 数据处理与分析 | 第68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-72页 |
| 3.1 猪骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第68-69页 |
| 3.2 MiR-499-5p对猪Sox6表达的影响 | 第69-70页 |
| 3.3 MiR-499-5p对猪肌球蛋白重链亚型基因表达的影响 | 第70-71页 |
| 3.4 MiR-499-5p对相关蛋白表达的影响 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 5 小结 | 第73-74页 |
| 结论与建议 | 第74-75页 |
| 1 本研究的结论 | 第74页 |
| 2 本研究的创新点 | 第74页 |
| 3 有待解决的问题 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 附录 | 第84-86页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第86页 |
