| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-46页 |
| 1.1 基因治疗概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 基因治疗的概念和途径 | 第13页 |
| 1.1.2 基因治疗的运载系统 | 第13-15页 |
| 1.1.3 基因治疗需要跨越的障碍 | 第15-16页 |
| 1.2 应用于基因转染的功能性多肽 | 第16-31页 |
| 1.2.1 DNA结合肽(DNA-binding peptides) | 第16-19页 |
| 1.2.2 靶向肽(Targeting peptides) | 第19-23页 |
| 1.2.3 穿膜肽(Cell-penetrating Peptides,CPPs) | 第23-26页 |
| 1.2.4 内涵体释放肽(Endosomolytic peptides) | 第26-31页 |
| 1.3 选题思路 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-46页 |
| 第二章 含核定位信号的穿膜肽作为基因载体的核靶向作用研究 | 第46-68页 |
| 2.1 前言 | 第46-47页 |
| 2.2 实验部分 | 第47-54页 |
| 2.2.1 试剂 | 第47-48页 |
| 2.2.2 多肽的合成与表征 | 第48-50页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第50页 |
| 2.2.4 质粒DNA的分离和纯化 | 第50页 |
| 2.2.5 肽载体/DNA复合物的制备 | 第50页 |
| 2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第50-51页 |
| 2.2.7 肽/DNA复合物粒径和ζ电位的测定 | 第51页 |
| 2.2.8 透射电镜(TEM) | 第51-52页 |
| 2.2.9 体外细胞毒性检测 | 第52页 |
| 2.2.10 复合物的体外转染实验 | 第52-53页 |
| 2.2.11 细胞内吞实验 | 第53-54页 |
| 2.2.12 统计学分析 | 第54页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第54-64页 |
| 2.3.1 肽的合成及表征 | 第54-55页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第55页 |
| 2.3.3 复合物粒径和ζ电位的测定 | 第55-57页 |
| 2.3.4 复合物形态的观察 | 第57页 |
| 2.3.5 细胞毒性 | 第57-58页 |
| 2.3.6 体外转染实验 | 第58-63页 |
| 2.3.7 细胞的内吞 | 第63-64页 |
| 2.4 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 第三章 邻碘苯甲酸修饰的核定位信号肽对乳腺癌细胞的靶向基因转染作用 | 第68-90页 |
| 3.1 前言 | 第68-69页 |
| 3.2 实验部分 | 第69-75页 |
| 3.2.1 试剂 | 第69-70页 |
| 3.2.2 多肽的合成与表征 | 第70-71页 |
| 3.2.3 细胞培养 | 第71-72页 |
| 3.2.4 质粒DNA的分离和纯化 | 第72页 |
| 3.2.5 载体/DNA复合物的制备 | 第72页 |
| 3.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第72-73页 |
| 3.2.7 载体/DNA复合物粒径和ζ电位的测定 | 第73页 |
| 3.2.8 载体的细胞毒性 | 第73页 |
| 3.2.9 荧光标记的NLS和NLS-I两种肽的细胞内吞实验 | 第73-74页 |
| 3.2.10 复合物的体外转染实验 | 第74页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第74-75页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第75-86页 |
| 3.3.1 肽的合成与表征 | 第75-76页 |
| 3.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第76-77页 |
| 3.3.3 粒径和ζ电位的测定 | 第77-79页 |
| 3.3.4 细胞毒性 | 第79页 |
| 3.3.5 细胞的内吞 | 第79-82页 |
| 3.3.6 体外转染实验 | 第82-86页 |
| 3.4 结论 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-90页 |
| 第四章 含治疗肽的基因载体用于体外体内基因治疗研究 | 第90-107页 |
| 4.1 前言 | 第90-91页 |
| 4.2 实验部分 | 第91-97页 |
| 4.2.1 试剂 | 第91页 |
| 4.2.2 合成部分 | 第91-92页 |
| 4.2.3 细胞培养 | 第92-93页 |
| 4.2.4 质粒DNA的分离和纯化 | 第93页 |
| 4.2.5 载体/DNA复合物的制备 | 第93页 |
| 4.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第93页 |
| 4.2.7 复合物粒径和电位的测定 | 第93页 |
| 4.2.8 载体和载体/DNA复合物的体外毒性试验 | 第93-94页 |
| 4.2.9 体外转染实验 | 第94页 |
| 4.2.10 体外肿瘤细胞杀伤能力实验 | 第94-95页 |
| 4.2.11 小鼠腹水瘤模型造模 | 第95页 |
| 4.2.12 小鼠实体瘤模型造模 | 第95-96页 |
| 4.2.13 体内基因治疗 | 第96页 |
| 4.2.14 统计学分析 | 第96-97页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第97-104页 |
| 4.3.1 合成与表征 | 第97页 |
| 4.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第97-98页 |
| 4.3.3 粒径和电位的测定 | 第98-99页 |
| 4.3.4 细胞毒性的检测 | 第99-100页 |
| 4.3.5 体外转染实验 | 第100-101页 |
| 4.3.6 YSL-PEI-PEG/p53系统的体外肿瘤细胞杀伤力 | 第101-102页 |
| 4.3.7 YSL-PEI-PEG/p53系统的体内肿瘤抑制能力 | 第102-104页 |
| 4.4 结论 | 第104页 |
| 参考文献 | 第104-107页 |
| 第五章 功能肽的引入方式(共价结合,物理共、混,静电作用)对基因运载系统的影响 | 第107-125页 |
| 5.1 前言 | 第107-108页 |
| 5.2 实验部分 | 第108-112页 |
| 5.2.1 试剂 | 第108-109页 |
| 5.2.2 合成部分 | 第109-110页 |
| 5.2.3 细胞培养 | 第110页 |
| 5.2.4 质粒DNA的分离和纯化 | 第110页 |
| 5.2.5 载体/DNA复合物的制备 | 第110-111页 |
| 5.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第111页 |
| 5.2.7 复合物的粒径和ζ电位测定 | 第111页 |
| 5.2.8 体外细胞毒性 | 第111页 |
| 5.2.9 复合物的体外转染实验 | 第111-112页 |
| 5.2.10 统计学分析 | 第112页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第112-122页 |
| 5.3.1 合成与表征 | 第112-115页 |
| 5.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第115-116页 |
| 5.3.3 粒径和电位的测定 | 第116-118页 |
| 5.3.4 细胞毒性的检测 | 第118-119页 |
| 5.3.5 转染效率 | 第119-122页 |
| 5.4 结论 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-125页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间已发表和待发表的论文 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
