| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 符号及缩略语(Abbreviation)表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-45页 |
| 第一节 脂代谢与信号作用 | 第15-20页 |
| 1 脂组分的改变及其作用 | 第15-16页 |
| 2 磷脂对离子通道的调控作用 | 第16-17页 |
| 3 磷脂和蛋白之间的相互作用 | 第17-18页 |
| 4 脂信号分子及其信号转导途径 | 第18-20页 |
| 第二节 磷脂酶家族及其信号作用 | 第20-32页 |
| 1 磷脂酶A研究进展 | 第20-23页 |
| 1.1 磷脂酶A的分类 | 第20-22页 |
| 1.2 磷脂酶A功能研究进展 | 第22-23页 |
| 2 磷脂酶C研究进展 | 第23-27页 |
| 2.1 磷脂酶C的分类 | 第23页 |
| 2.2 磷脂酶C的结构 | 第23-25页 |
| 2.3 磷脂酶C信号转导途径 | 第25-26页 |
| 2.4 动植物磷脂酶C信号途径的异同 | 第26-27页 |
| 2.5 磷脂酰肌醇信号系统 | 第27页 |
| 3 磷脂酶D研究进展 | 第27-30页 |
| 3.1 磷脂酶D的分类 | 第27-28页 |
| 3.2 磷脂酶D对干旱和盐胁迫的应答 | 第28页 |
| 3.3 磷脂酶D参与了A BA信号途径 | 第28-29页 |
| 3.4 磷脂酶D参与了ROS信号途径 | 第29页 |
| 3.5 磷脂酶D对细胞的调节作用 | 第29-30页 |
| 4 磷脂酸信号转导途径 | 第30-32页 |
| 第三节 脂介导的植物耐盐信号及耐盐机理 | 第32-37页 |
| 1 植物盐害的生理过程 | 第32-33页 |
| 2 植物盐胁迫与Na~+运输 | 第33-34页 |
| 3 植物盐胁迫与Cl~-运输 | 第34-35页 |
| 4 植物盐胁迫与活性氧爆发 | 第35-36页 |
| 5 脂介导的植物耐盐信号 | 第36-37页 |
| 第四节 脂降解与植物细胞核组织衰老 | 第37-42页 |
| 1 种子老化的复杂性 | 第37-38页 |
| 2 种子老化对生理机能的影响 | 第38-39页 |
| 3 脂的过氧化 | 第39-40页 |
| 4 种子老化模型的研究 | 第40-42页 |
| 第五节 问题与展望 | 第42-45页 |
| 第二章 水稻PLC基因表达、活性测定和细胞定位 | 第45-69页 |
| 摘要 | 第45页 |
| 引言 | 第45-46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-58页 |
| 1.1 水稻材料与培养 | 第46页 |
| 1.2 水稻幼苗胁迫处理 | 第46页 |
| 1.3 水稻RNA的提取与cDNA第一链的合成 | 第46-47页 |
| 1.4 定量PCR分析 | 第47-48页 |
| 1.5 OsPLC基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第48-50页 |
| 1.6 质粒的小量提取 | 第50页 |
| 1.7 质粒的大量提取和纯化 | 第50-51页 |
| 1.8 电击感受态的制备、转化和菌落PCR鉴定 | 第51-52页 |
| 1.9 GST融合蛋白在BL21菌株中的表达和纯化 | 第52-53页 |
| 1.10 OsPLC蛋白的Western blotting检测 | 第53-55页 |
| 1.11 OsPLC活性测定 | 第55页 |
| 1.12 OsPLC2和OsPLC3亚细胞定位载体的构建 | 第55-56页 |
| 1.13 基因枪法转化洋葱表皮 | 第56-57页 |
| 1.14 水稻原生质体的提取及转化 | 第57-58页 |
| 1.15 OsPLC2和OSPLC3在原生质体中的亚细胞定位 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-67页 |
| 2.1 水稻PLC基因家族分析 | 第58-61页 |
| 2.2 水稻PLC各组织表达分析 | 第61页 |
| 2.3 水稻PLC在逆境胁迫后的表达量变化 | 第61-63页 |
| 2.4 水稻PLC的克隆与原核表达载体的构建 | 第63页 |
| 2.5 水稻PLC蛋白原核表达与纯化 | 第63页 |
| 2.6 水稻PLC蛋白活性的测定 | 第63-65页 |
| 2.7 水稻PLC-YFP载体的构建 | 第65页 |
| 2.8 水稻PLC基因在洋葱表皮中的亚细胞定位 | 第65页 |
| 2.9 水稻PLC基因在原生质体中的亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 第三章 水稻PLC基因的耐盐性分析 | 第69-89页 |
| 摘要 | 第69页 |
| 引言 | 第69-70页 |
| 1 材料与方法 | 第70-73页 |
| 1.1 实验材料 | 第70页 |
| 1.2 水稻基因组DNA的提取 | 第70页 |
| 1.3 osplc2和osplc3突变体鉴定 | 第70页 |
| 1.4 OsPLC活性测定 | 第70页 |
| 1.5 osplc2和osplc3突变体农艺性状分析 | 第70-71页 |
| 1.6 水稻脂的提取及含量测定 | 第71页 |
| 1.7 水稻逆境处理及失水率计算 | 第71页 |
| 1.8 Na~+、K~+离子含量测定 | 第71页 |
| 1.9 水稻叶片气孔开闭观察 | 第71页 |
| 1.10 水稻叶片保卫细胞的分离与Ca~(2+)含量的测定 | 第71-72页 |
| 1.11 qRT-PCR分析osplc3对其他盐敏感基因表达的影响 | 第72-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-84页 |
| 2.1 osplc2和osplc3突变体鉴定 | 第73-74页 |
| 2.2 osplc2和osplc3突变体农艺性状差异分析 | 第74页 |
| 2.3 OsPLC3突变对水稻叶片PA和DAG含量的影响 | 第74-77页 |
| 2.4 盐和干旱胁迫下OsPLC2和OsPLC3突变对失水的影响 | 第77-78页 |
| 2.5 盐和干旱胁迫下OsPLC2和OsPLC3的突变对干旱和盐胁迫下生长的影响 | 第78-79页 |
| 2.6 盐和干旱胁迫下OsPLC2和OsPLC3的突变对Na~+、K~+离子含量的影响 | 第79-80页 |
| 2.7 OsPLC3突变对盐胁迫下水稻叶片气孔关闭的抑制作用 | 第80-81页 |
| 2.8 ABA介导的OsPLC3对水稻保卫细胞Ca~(2+)含量的调控 | 第81-83页 |
| 2.9 OsPLC3突变对盐敏感基因表达的影响 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-89页 |
| 第四章 水稻种子老化与PLD关系的研究 | 第89-107页 |
| 摘要 | 第89页 |
| 引言 | 第89-90页 |
| 1 材料与方法 | 第90-93页 |
| 1.1 材料 | 第90页 |
| 1.2 水稻种子人工老化条件的建立 | 第90页 |
| 1.3 水稻种子发芽率的测定 | 第90页 |
| 1.4 水稻种子磷脂提取 | 第90页 |
| 1.5 水稻种子总RNA的提取与cDNA的合成 | 第90-91页 |
| 1.6 定量PCR分析OsPLDαs基因表达变化 | 第91-92页 |
| 1.7 水稻种子总蛋白的提取 | 第92页 |
| 1.8 蛋白含量的测定 | 第92页 |
| 1.9 水稻种子OsPLDa活性的测定 | 第92页 |
| 1.10 Western blotting检测OsPLDa表达 | 第92页 |
| 1.11 LOX活性的测定 | 第92-93页 |
| 1.12 茉莉酸含量测定 | 第93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-104页 |
| 2.1 人工老化处理对水稻种子萌发率的影响 | 第93-94页 |
| 2.2 水稻种子人工老化对幼苗生长状态的影响 | 第94页 |
| 2.3 人工老化处理对种子磷脂含量的影响 | 第94-96页 |
| 2.4 人工老化处理对种子各种磷脂分子种含量的影响 | 第96-99页 |
| 2.5 水稻种子人工老化过程中OsPLDαs表达量的变化 | 第99-101页 |
| 2.6 人工老化处理对OsPLDα蛋白含量与活性的影响 | 第101页 |
| 2.7 水稻种子人工老化过程中OsLOXs表达量与活性的变化 | 第101-104页 |
| 3 讨论 | 第104-107页 |
| 全文讨论 | 第107-113页 |
| 全文结论和创新之处 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-141页 |
| 附表一：木村B营养液配方 | 第141-143页 |
| 附表二：原生质体提取所需试剂配方 | 第143-145页 |
| 附录 | 第145-147页 |
| 致谢 | 第147页 |
