| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 蓝舌病概述 | 第12-18页 |
| 1.1.1 蓝舌病病原学特点 | 第12-13页 |
| 1.1.2 蓝舌病的流行病学特点 | 第13页 |
| 1.1.3 蓝舌病病毒基因组编码蛋白及其生物学功能 | 第13-15页 |
| 1.1.4 蓝舌病病毒的生命周期 | 第15-17页 |
| 1.1.5 蓝舌病病毒的致病机理 | 第17-18页 |
| 1.1.6 蓝舌病的防治 | 第18页 |
| 1.2 研究蛋白相互作用的主要方法和技术 | 第18-19页 |
| 1.2.1 酵母双杂交技术 | 第18-19页 |
| 1.2.2 GST pull down | 第19页 |
| 1.2.3 免疫共沉淀（co-immunoprecipitation, Co-IP） | 第19页 |
| 1.2.4 噬菌体展示（Phage Display Techniques, PDT） | 第19页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 蓝舌病病毒VP7蛋白诱饵质粒PGBKT7-VP7的构建与鉴定 | 第21-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株、细胞和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂、试剂盒和耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要培养基和试剂的配置 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.2 VP7诱饵质粒的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.3 诱饵质粒的自激活和毒性检测 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-28页 |
| 2.3.1 VP7诱饵质粒的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.2 诱饵质粒的自激活和毒性检测 | 第27-28页 |
| 2.4 小结和讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 LT细胞酵母双杂交CDNA文库的构建 | 第30-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 菌株、细胞和质粒 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第30页 |
| 3.1.3 主要试剂、试剂盒和耗材 | 第30页 |
| 3.1.4 主要培养基和试剂的配置 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-34页 |
| 3.2.1 LT细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.2.2 第一链cDNA的合成 | 第31-32页 |
| 3.2.3 长距离PCR（LD-PCR）扩增ds cDNA | 第32页 |
| 3.2.4 dscDNA的纯化 | 第32-33页 |
| 3.2.5 Y187酵母感受态的制备 | 第33页 |
| 3.2.6 转化入酵母菌Y187 | 第33-34页 |
| 3.2.7 文库收获 | 第34页 |
| 3.2.8 文库质量检测 | 第34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-38页 |
| 3.3.1 细胞总RNA的提取 | 第34-35页 |
| 3.3.2 LD-PCR扩增ds-cDNA | 第35页 |
| 3.3.3 ds-cDNA的纯化 | 第35-36页 |
| 3.3.4 文库滴度的计算 | 第36页 |
| 3.3.5 文库的多态性鉴定 | 第36-38页 |
| 3.4 小结和讨论 | 第38-41页 |
| 第四章 酵母双杂交筛选与BTV VP7相互作用的宿主细胞蛋白 | 第41-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第41页 |
| 4.1.1 菌株、细胞和质粒 | 第41页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第41页 |
| 4.1.3 主要试剂、试剂盒和耗材 | 第41页 |
| 4.1.4 主要培养基和试剂的配置 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 诱饵菌株与文库菌的杂交筛选 | 第41-42页 |
| 4.2.2 酵母质粒提取 | 第42-43页 |
| 4.2.3 酵母质粒转化入大肠杆菌 | 第43页 |
| 4.2.4 阳性克隆的筛选与回转验证 | 第43-44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-47页 |
| 4.3.1 杂交效率 | 第44页 |
| 4.3.2 回转验证结果 | 第44-47页 |
| 4.4 小结和讨论 | 第47-50页 |
| 第五章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
