摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-18页 |
1.1 口蹄疫概述 | 第11-13页 |
1.2 天然免疫概述 | 第13-16页 |
1.3 口蹄疫病毒与天然免疫关系的研究 | 第16页 |
1.4 ESD蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
1.5 研究目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 猪ESD基因的扩增及其与FMDV复制关系的研究 | 第18-33页 |
2.1 前言 | 第18页 |
2.2 材料 | 第18-20页 |
2.2.1 质粒,毒株,细胞系及抗体 | 第18页 |
2.2.2 试剂及溶液配制 | 第18-20页 |
2.2.3 试验器材 | 第20页 |
2.3 方法 | 第20-26页 |
2.3.1 质粒的构建 | 第20-23页 |
2.3.2 细胞的转染和接毒 | 第23-24页 |
2.3.3 siRNA干扰技术 | 第24页 |
2.3.4 FMDV滴度的测定 | 第24-25页 |
2.3.5 Western blotting检测 | 第25-26页 |
2.3.6 实时荧光定量PCR(SYBR? Green法)检测 | 第26页 |
2.3.7 数据分析 | 第26页 |
2.4 结果 | 第26-31页 |
2.4.1 Myc-ESD重组质粒的构建及其验证表达 | 第26-28页 |
2.4.2 ESD siRNA干扰效果 | 第28页 |
2.4.3 ESD在口蹄疫病毒复制中上调表达 | 第28-29页 |
2.4.4 过表达ESD显著抑制FMDV在PK-15细胞中的复制 | 第29-30页 |
2.4.5 下调表达ESD显著促进FMDV在PK-15细胞中的复制 | 第30-31页 |
2.5 讨论 | 第31-33页 |
第三章 ESD抑制FMDV复制的分子机制研究 | 第33-43页 |
3.1 前言 | 第33页 |
3.2 材料 | 第33-34页 |
3.2.1 质粒,毒株,细胞系及抗体 | 第33页 |
3.2.2 试剂及溶液配制 | 第33-34页 |
3.2.3 试验器材 | 第34页 |
3.3 方法 | 第34-35页 |
3.3.1 实时荧光定量PCR(SYBR? Green法)检测 | 第34-35页 |
3.3.2 双荧光素酶报告系统检测 | 第35页 |
3.3.3 其他试验方法检测 | 第35页 |
3.3.4 数据分析 | 第35页 |
3.4 结果 | 第35-41页 |
3.4.1 ESD调控FMDV诱导的ISGs的表达 | 第35-38页 |
3.4.2 ESD正调控SeV诱导的IFN-β的活化 | 第38页 |
3.4.3 ESD通过靶向IRF3来增强IFN-β的活化 | 第38-39页 |
3.4.4 ESD通过调控IRF3的磷酸化水平来影响FMDV的复制 | 第39-41页 |
3.5 讨论 | 第41-43页 |
第四章 全文结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简历 | 第51页 |