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鸡lncRNA-pouBW1基因鉴定及其SNP多态性研究

致谢第4-10页
摘要第10-11页
1.文献综述第11-18页
    1.1 lncRNA简介第11-15页
        1.1.1 lncRNA的发现第11页
        1.1.2 lncRNA的结构与分类第11-12页
        1.1.3 lncRNA的作用机制第12-13页
        1.1.4 lncRNA的研究方法第13-14页
        1.1.5 lncRNA的功能第14-15页
        1.1.6 lncRNA研究问题与展望第15页
    1.2 新基因研究策略第15-18页
        1.2.1 基因克隆第15-16页
            1.2.1.1 生物学克隆第15-16页
            1.2.1.2 电子克隆第16页
        1.2.2 生物信息学分析第16页
            1.2.2.1 编码产物预测分析第16页
            1.2.2.2 序列同源性分析第16页
            1.2.2.3 染色体定位第16页
            1.2.2.4 基因结构分析第16页
        1.2.3 新基因的体内表达规律研究第16-17页
        1.2.4 蛋白质水平的表达分析第17页
        1.2.5 转基因技术第17页
        1.2.6 基因敲除和基因敲减第17-18页
2.前言第18-19页
3.鸡pouBW1基因完全开放阅读框(Open reading frame,ORF)的克隆第19-26页
    3.1 试验材料第19页
        3.1.1 样品采集第19页
        3.1.2 主要试剂及溶液配置第19页
    3.2 试验方法第19-21页
        3.2.1 引物的设计与合成第19页
        3.2.2 总RNA的提取第19-20页
        3.2.3 普通PCR反应 和琼脂糖凝胶电泳检测第20页
        3.2.4 PCR产物的回收第20页
        3.2.5 基因的克隆与测序第20-21页
            3.2.5.1 连接转化第20-21页
            3.2.5.2 菌液PCR鉴定第21页
            3.2.5.3 菌液测序第21页
        3.2.6 长链非编码RNA鉴定第21页
    3.3 主要仪器设备第21-22页
    3.4 实验结果与分析第22-24页
        3.4.1 总RNA提取第22页
        3.4.2 菌液PCR检测第22-23页
        3.4.3 完全开放阅读框(ORF)克隆第23页
        3.4.4 生物信息学分析第23-24页
    3.5 讨论与小结第24-26页
4.鸡pouBW1基因的表达分析第26-32页
    4.1 试验材料第26页
        4.1.1 试验动物第26页
        4.1.2 样品的采集第26页
        4.1.3 试剂及溶液配制第26页
        4.1.4 荧光定量试验仪器第26页
    4.2 试验方法第26-27页
        4.2.1 总RNA提取和反转录第26页
        4.2.2 荧光定量PCR引物设计第26页
        4.2.3 实时荧光定量PCR(qPCR)第26-27页
        4.2.4 数据处理第27页
    4.3 结果与分析第27-31页
        4.3.1 cDNA质量及引物特异性检测第27-28页
        4.3.2 1日龄表达谱分析第28页
        4.3.3 6周龄表达谱分析第28-29页
        4.3.4 16周龄表达谱分析第29-30页
        4.3.5 不同发育阶段的表达谱分析第30-31页
    4.4 讨论与小结第31-32页
5.固始鸡-安卡鸡F2代资源群pouBW1基因多态性分析第32-53页
    5.1 试验材料第32-33页
        5.1.1 试验动物第32页
            5.1.1.1 资源群体第32页
            5.1.1.2 饲养管理及测量指标第32页
        5.1.2 试验主要试剂及配制第32-33页
        5.1.3 主要仪器设备第33页
    5.2 试验方法第33-37页
        5.2.1 基因组DNA的提取方法第33-34页
        5.2.2 SNP筛选第34-35页
            5.2.2.1 混池构建第34页
            5.2.2.2 引物设计、PCR扩增和SNP扫描第34-35页
        5.2.3 最适PCR反应体系的确立第35-36页
        5.2.4 酶切分型第36页
        5.2.5 基因型统计与分析第36-37页
            5.2.5.1 基因型频率与基因频率的统计第36页
            5.2.5.2 群体遗传多态性的分析第36-37页
            5.2.5.3 突变位点基因型与经济性状的关联分析模型第37页
        5.2.6 连锁不平衡分析第37页
    5.3 结果与分析第37-51页
        5.3.1 SNP突变位点扫描第37-38页
        5.3.2 pouBW1基因SNP位点基因型频率及基因频率统计第38-39页
        5.3.3 pouBW1基因n.830G>A位点不同基因型与不同性状的关联分析第39-44页
            5.3.3.1 pouBW1基因n.830G>A位点不同基因型与肉质性状的关联分析第39-40页
            5.3.3.2 pouBW1基因n.830G>A位点不同基因型与生长性状的关联分析第40-41页
            5.3.3.3 pouBW1基因n.830G>A位点不同基因型与屠体性状的关联分析第41-42页
            5.3.3.4 pouBW1基因n.830G>A位点不同基因型与肌纤维性状的关联分析第42-43页
            5.3.3.5 pouBW1基因n.830G>A位点不同基因型与血液参数性状的关联分析第43-44页
        5.3.4 pou BW1基因n.830G>A位点加性显性效应分析第44-45页
        5.3.5 pou BW1基因n.594 C>T位点不同基因型与不同性状的关联分析第45-50页
            5.3.5.1 pouBW1基因n.594C>T位点不同基因型与肉质性状的关联分析第45-46页
            5.3.5.2 pouBW1基因n.594C>T位点不同基因型与生长性状的关联分析第46-47页
            5.3.5.3 pouBW1基因n.594C>T位点不同基因型与屠体性状的关联分析第47-48页
            5.3.5.4 pouBW1基因n.594C>T位点不同基因型与肌纤维性状的关联分析第48-49页
            5.3.5.5 pouBW1基因n.594C>T位点不同基因型与血液参数性状的关联分析第49-50页
        5.3.6 pou BW1基因n.594C>T位点加性显性效应分析第50页
        5.3.7 单倍型构建第50-51页
        5.3.8 两个SNP位点的单倍型组合与F2代资源群经济性状的关联分析第51页
    5.4 小结与讨论第51-53页
6. 全文总结第53-54页
参考文献第54-58页
ABSTRACT第58页

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