| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 1 引言 | 第13-21页 |
| ·肝癌 | 第13页 |
| ·间充质干细胞 | 第13-14页 |
| ·MSCs的生物学特性 | 第14页 |
| ·Wnt信号通路的功能及作用 | 第14-16页 |
| ·MSCs的免疫抑制作用 | 第16-19页 |
| ·MSCs对T细胞的抑制作用 | 第16-17页 |
| ·MSCs对B细胞的抑制作用 | 第17页 |
| ·MSCs和自然杀伤细胞的相互作用 | 第17-18页 |
| ·MSCs对抗原递呈细胞的抑制作用 | 第18-19页 |
| ·MSCs和肿瘤的关系 | 第19-21页 |
| 2 实验材料 | 第21-25页 |
| ·细胞株及细胞培养所用培养基 | 第21页 |
| ·细胞株 | 第21页 |
| ·细胞培养所用培养基 | 第21页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第21-22页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第22-23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| ·核酸电泳缓冲液的配制 | 第23页 |
| ·蛋白质电泳所用试剂及缓冲液的配制 | 第23-24页 |
| ·细胞培养所用培养基及主要溶液配制 | 第24-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-39页 |
| ·MSCs | 第25-26页 |
| ·MSCs的复苏 | 第25页 |
| ·MSCs的传代 | 第25页 |
| ·MSCs的冻存 | 第25-26页 |
| ·人肝癌细胞系HepG_2和人胚肾细胞系HEK 293的培养 | 第26-27页 |
| ·HepG_2和HEK 293的复苏 | 第26页 |
| ·HepG_2和HEK 293的培养 | 第26页 |
| ·HepG_2和HEK 293的冻存 | 第26-27页 |
| ·MSCs对HepG_2增殖能力的影响 | 第27-28页 |
| ·MSCs条件培养液对HepG_2的抑制效应分析 | 第27页 |
| ·MSCs与HepG_2共培养对HepG_2的抑制效应分析 | 第27-28页 |
| ·MSCs诱导HepG_2细胞凋亡的检测 | 第28-30页 |
| ·MSCs条件培养液诱导HepG_2细胞凋亡情况 | 第28-29页 |
| ·MSCs与HepG_2共培养诱导HepG_2细胞凋亡情况 | 第29-30页 |
| ·MSCs分泌Dkk-1因子的检测 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR半定量检测与Wnt信号通路相关的因子β-catenin、survivin、bcl-2和c-Myc的表达 | 第31-35页 |
| ·MSCs条件培养液处理HepG_2的RNA的提取和反转录 | 第31-32页 |
| ·MSCs与HepG_2共培养处理HepG_2的RNA的提取和反转录 | 第32-33页 |
| ·bcl-2、c-Myc、β-catenin和survivin的引物设计 | 第33页 |
| ·PCR检测 | 第33-35页 |
| ·Western blot检测与Wnt信号通路有关的因子bcl-2的表达 | 第35-37页 |
| ·提取HepG_2细胞总蛋白 | 第35页 |
| ·BCA试剂盒法测定HepG_2细胞蛋白的浓度 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第35-36页 |
| ·转膜(半干法转膜) | 第36-37页 |
| ·显影曝光 | 第37页 |
| ·裸鼠移植瘤实验 | 第37-39页 |
| ·HepG_2裸鼠移植瘤模型的建立 | 第37-38页 |
| ·肿瘤的组织学检测 | 第38-39页 |
| 4 结果 | 第39-64页 |
| ·MSCs的鉴定 | 第39-42页 |
| ·MSCs细胞表面标记 | 第39页 |
| ·MSCs分化能力鉴定 | 第39-41页 |
| ·MSCs的生长状态 | 第41-42页 |
| ·HepG_2和HEK 293细胞的生长形态 | 第42页 |
| ·MSCs对HepG_2细胞的生长抑制效应 | 第42-45页 |
| ·MSCs条件培养液对HepG_2的抑制效应分析 | 第42-44页 |
| ·MSCs与HepG_2共培养对HepG_2的抑制效应分析 | 第44-45页 |
| ·MSCs对HepG_2细胞凋亡的影响 | 第45-51页 |
| ·MSCs对HepG_2细胞凋亡的影响—形态学观察 | 第46页 |
| ·MSCs对HepG_2细胞凋亡的影响—Annnexin-V检测 | 第46-51页 |
| ·MSCs分泌Dkk-1因子的检测 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR半定量检测Wnt信号通路相关的因子β-catenin、survivin、bcl-2和c-Myc的表达 | 第52-59页 |
| ·MSCs条件培养液处理HepG_2的β-catenin、survivin、bcl-2和c-Myc的表达情况 | 第52-54页 |
| ·MSCs与HepG_2共培养后HepG_2细胞β-catenin、survivin、bcl-2和c-Myc的表达情况 | 第54-59页 |
| ·Western blot检测Wnt信号通路相关因子bcl-2的表达 | 第59-60页 |
| ·裸鼠移植瘤实验结果 | 第60-64页 |
| ·裸鼠移植瘤体积变化情况 | 第60-62页 |
| ·肿瘤组织学检测 | 第62-64页 |
| 5 讨论 | 第64-66页 |
| 6 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72-74页 |
| 学位论文数据集 | 第74页 |
