致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
1 引言 | 第10-14页 |
·研究背景 | 第10-12页 |
·国内外研究现状 | 第12-13页 |
·实验设计和流程 | 第13-14页 |
2 材料和方法 | 第14-39页 |
·材料 | 第14-17页 |
·质粒载体 | 第14页 |
·细菌菌株 | 第14页 |
·细胞株 | 第14页 |
·主要工具酶及试剂 | 第14-15页 |
·主要试剂盒及耗材 | 第15页 |
·主要试剂的配制 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16-17页 |
·方法 | 第17-39页 |
·AD外周血样本的收集及基因组DNA的提取 | 第17-18页 |
·PS-1、PS-2和APP各外显子扩增引物的设计合成 | 第18-20页 |
·基因突变的筛选 | 第20页 |
·APP695真核表达载体的构建及稳定表达细胞株的建立 | 第20-28页 |
·APP腺病毒表达载体pAd-APP695X的构建及腺病毒包装 | 第28-39页 |
3 结果 | 第39-55页 |
·AD外周血样本的收集情况 | 第39-40页 |
·PS-1,PS-2编码外显子及APP外显子16、17的扩增结果 | 第40-41页 |
·基因突变筛选的部分测序结果 | 第41-44页 |
·pcDNA3.1(-)-APP695X的构建及稳定表达细胞株的建立 | 第44-49页 |
·APP695WT基因片段的PCR扩增 | 第44-45页 |
·APP695突变基因片段(APP695mutation)的PCR扩增 | 第45-46页 |
·pcDNA3.1(-)-APP695X的菌液PCR鉴定 | 第46-48页 |
·稳定表达多克隆细胞株的建立 | 第48-49页 |
·pAd-APP695X的构建及腺病毒Ad-APP695X的包装 | 第49-55页 |
·穿梭质粒pShuttleCMV-APP695X的构建 | 第49-50页 |
·重组腺病毒质粒pAd-APP695X的构建 | 第50-51页 |
·腺病毒Ad-APP695X的包装 | 第51-52页 |
·腺病毒Ad-APP695X的鉴定 | 第52页 |
·腺病毒Ad-APP695X的滴度测定 | 第52-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
附录A | 第61-62页 |
作者简历 | 第62-64页 |
学位论文数据集 | 第64页 |