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家族性阿尔茨海默病基因突变筛选及APP表达载体的构建

致谢第1-6页
摘要第6-7页
ABSTRACT第7-10页
1 引言第10-14页
   ·研究背景第10-12页
   ·国内外研究现状第12-13页
   ·实验设计和流程第13-14页
2 材料和方法第14-39页
   ·材料第14-17页
     ·质粒载体第14页
     ·细菌菌株第14页
     ·细胞株第14页
     ·主要工具酶及试剂第14-15页
     ·主要试剂盒及耗材第15页
     ·主要试剂的配制第15-16页
     ·主要仪器第16-17页
   ·方法第17-39页
     ·AD外周血样本的收集及基因组DNA的提取第17-18页
     ·PS-1、PS-2和APP各外显子扩增引物的设计合成第18-20页
     ·基因突变的筛选第20页
     ·APP695真核表达载体的构建及稳定表达细胞株的建立第20-28页
     ·APP腺病毒表达载体pAd-APP695X的构建及腺病毒包装第28-39页
3 结果第39-55页
   ·AD外周血样本的收集情况第39-40页
   ·PS-1,PS-2编码外显子及APP外显子16、17的扩增结果第40-41页
   ·基因突变筛选的部分测序结果第41-44页
   ·pcDNA3.1(-)-APP695X的构建及稳定表达细胞株的建立第44-49页
     ·APP695WT基因片段的PCR扩增第44-45页
     ·APP695突变基因片段(APP695mutation)的PCR扩增第45-46页
     ·pcDNA3.1(-)-APP695X的菌液PCR鉴定第46-48页
     ·稳定表达多克隆细胞株的建立第48-49页
   ·pAd-APP695X的构建及腺病毒Ad-APP695X的包装第49-55页
     ·穿梭质粒pShuttleCMV-APP695X的构建第49-50页
     ·重组腺病毒质粒pAd-APP695X的构建第50-51页
     ·腺病毒Ad-APP695X的包装第51-52页
     ·腺病毒Ad-APP695X的鉴定第52页
     ·腺病毒Ad-APP695X的滴度测定第52-55页
4 讨论第55-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-61页
附录A第61-62页
作者简历第62-64页
学位论文数据集第64页

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