| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 水稻秸秆资源现状及其降解研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.1 水稻秸秆资源利用现状 | 第11页 |
| 1.1.2 水稻秸秆生物降解研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 木质素的生物降解 | 第12-15页 |
| 1.2.1 木质素降解酶类对木质素的降解 | 第13-14页 |
| 1.2.2 非酶途径对木质素的降解 | 第14-15页 |
| 1.3 吡喃糖氧化酶 | 第15-19页 |
| 1.3.1 吡喃糖氧化酶的分子特征 | 第15-16页 |
| 1.3.2 吡喃糖氧化酶的催化特性 | 第16页 |
| 1.3.3 真菌来源的吡喃糖氧化酶 | 第16-17页 |
| 1.3.4 细菌来源的吡喃糖氧化酶 | 第17页 |
| 1.3.5 吡喃糖氧化酶与漆酶的互作关系 | 第17-18页 |
| 1.3.6 吡喃糖氧化酶的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 论文选题背景、研究内容及思路 | 第19-21页 |
| 1.4.1 论文选题背景 | 第19-20页 |
| 1.4.2 论文研究思路 | 第20-21页 |
| 第2章 Pantoea ananatis Sd-1中吡喃糖氧化酶基因的克隆、原核表达与蛋白纯化 | 第21-47页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料、仪器与方法 | 第21-38页 |
| 2.2.1 实验菌种及质粒载体 | 第21-23页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.3 实验培养基及试剂配置 | 第24-26页 |
| 2.2.4 主要实验仪器和设备 | 第26页 |
| 2.2.5 P.ananatis Sd-1中GMC家族氧化还原酶基因的生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.6 目的基因的克隆与表达载体构建 | 第26-35页 |
| 2.2.7 目的基因的表达与蛋白纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.8 SDS-PAGE电泳检测目的蛋白 | 第36-37页 |
| 2.2.9 酶活检测 | 第37-38页 |
| 2.2.10 蛋白浓度测定 | 第38页 |
| 2.3 实验结果及其分析与讨论 | 第38-46页 |
| 2.3.1 GMC家族氧化还原酶基因的生物信息学初步分析 | 第38-41页 |
| 2.3.2 P2O基因的克隆与表达载体构建 | 第41-42页 |
| 2.3.3 P2O蛋白的表达与吡喃糖氧化酶活性测定活性测定 | 第42-43页 |
| 2.3.4 pCold TF-P2O诱导表达目的蛋白的纯化 | 第43-45页 |
| 2.3.5 pGEX-4T-1-P2O诱导表达目的蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| 2.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第3章 Pantoea ananatis Sd-1中吡喃糖氧化酶的催化性质研究 | 第47-56页 |
| 3.1 前言 | 第47页 |
| 3.2 实验材料、仪器与方法 | 第47-51页 |
| 3.2.1 主要实验仪器和设备 | 第47页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第47页 |
| 3.2.3 实验试剂配置 | 第47-48页 |
| 3.2.4 Native-PAGE检测目的蛋白 | 第48页 |
| 3.2.5 Western-blot检测目的蛋白 | 第48-49页 |
| 3.2.6 吡喃糖氧化酶的生化性质研究 | 第49-50页 |
| 3.2.7 吡喃糖氧化酶对漆酶降解木质素影响的研究 | 第50-51页 |
| 3.3 实验结果及其分析与讨论 | 第51-55页 |
| 3.3.1 Native-PAGE电泳与Western-blot检测目的蛋白P20 | 第51-52页 |
| 3.3.2 温度、pH对目的蛋白P20的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.3 目的蛋白P2O对不同糖类底物的作用 | 第53-54页 |
| 3.3.4 细菌中吡喃糖氧化酶对漆酶作用的影响 | 第54-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第4章 Pantoea ananatis Sd-1中吡喃糖氧化酶基因的同源过表达 | 第56-68页 |
| 4.1 前言 | 第56页 |
| 4.2 实验材料、仪器与方法 | 第56-62页 |
| 4.2.1 实验菌种 | 第56页 |
| 4.2.2 主要实验仪器和设备 | 第56页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第56-57页 |
| 4.2.4 实验试剂及培养基配置 | 第57页 |
| 4.2.5 过表达载体的构建 | 第57-60页 |
| 4.2.6 过表达载体在P.ananatis Sd-1中的表达及检测 | 第60-61页 |
| 4.2.7 吡喃糖氧化酶基因过表达对菌株生长状况的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.8 吡喃糖氧化酶基因过表达对菌株秸秆降解率的影响 | 第62页 |
| 4.2.9 吡喃糖氧化酶基因过表达对菌株产过氧化氢量的影响 | 第62页 |
| 4.2.10 吡喃糖氧化酶基因过表达对菌株木质素脱色率的影响 | 第62页 |
| 4.3 实验结果及其分析与讨论 | 第62-67页 |
| 4.3.1 过表达启动子的选择 | 第62-63页 |
| 4.3.2 吡喃糖氧化酶基因过表达载体的构建 | 第63-64页 |
| 4.3.3 吡喃糖氧化酶基因过表达载体蛋白表达的验证 | 第64-65页 |
| 4.3.4 吡喃糖氧化酶基因过表达对菌株生长状况的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.5 吡喃糖氧化酶基因过表达对菌株秸秆降解率及产过氧化氢量的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.6 吡喃糖氧化酶基因过表达对菌株木质素脱色率的影响 | 第67页 |
| 4.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的论文和专利 | 第76-77页 |
| 附录B 碱基序列 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
