摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第15-22页 |
1.1 胃癌的流行病学调查 | 第15页 |
1.2 胃癌发生的分子机制 | 第15-17页 |
1.2.1 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路 | 第16页 |
1.2.2 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路 | 第16页 |
1.2.3 表皮生长因子受体(ErbB)家族 | 第16-17页 |
1.2.4 间质表皮转化因子(MET)通路 | 第17页 |
1.3 胃癌与上皮间质转化(EMT) | 第17-18页 |
1.3.1 上皮间质转化的特征 | 第17页 |
1.3.2 上皮间质转化与胃癌的发生发展 | 第17-18页 |
1.3.3 上皮间质转化与胃癌的转移 | 第18页 |
1.4 KRT8与疾病 | 第18-22页 |
1.4.1 KRT8与上皮细胞癌 | 第19页 |
1.4.2 KRT8与口腔癌 | 第19-20页 |
1.4.3 KRT8与乳腺癌 | 第20页 |
1.4.4 KRT8与其它疾病 | 第20-22页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第22-25页 |
2.1 研究目的 | 第22页 |
2.2 研究方法 | 第22-23页 |
2.3 实验设计 | 第23-24页 |
2.4 研究意义 | 第24-25页 |
第三章 KRT8在胃肿瘤组织中的表达及与患者预后的关系 | 第25-41页 |
3.1 材料和试剂 | 第25-29页 |
3.1.1 公共数据来源 | 第25页 |
3.1.2 标本采集 | 第25-26页 |
3.1.3 病例资料和病例随访 | 第26页 |
3.1.4 主要试剂及配制 | 第26-28页 |
3.1.5 主要仪器及耗材 | 第28-29页 |
3.2 实验方法 | 第29-32页 |
3.2.1 胃癌组织总RNA的提取 | 第29页 |
3.2.2 RNA的逆转录 | 第29-30页 |
3.2.3 荧光定量PCR | 第30-31页 |
3.2.4 免疫组织化学染色 | 第31-32页 |
3.2.5 结果判定 | 第32页 |
3.2.6 结果统计分析 | 第32页 |
3.3 结果 | 第32-39页 |
3.3.1 肿瘤公共数据库与胃肿瘤组织中KRT8 mRNA水平表达 | 第32-34页 |
3.3.2 KRT8蛋白水平在胃癌组织中的表达 | 第34页 |
3.3.3 胃肿瘤中KRT8的表达与患者临床病理因数的相关性分析 | 第34-36页 |
3.3.4 生存分析显示KRT8表达与胃肿瘤患者预后密切相关 | 第36-38页 |
3.3.5 单、多因素COX比例风险模型分析KRT8与预后关系 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
第四章 上调KRT8影响胃肿瘤细胞生物学行为 | 第41-57页 |
4.1 材料与仪器 | 第41-44页 |
4.1.1 主要试剂 | 第41-42页 |
4.1.2 主要仪器及耗材 | 第42-44页 |
4.2 方法 | 第44-51页 |
4.2.1 常用溶液及培养基的配制 | 第44-45页 |
4.2.2 细胞培养 | 第45-46页 |
4.2.3 KRT8过表达质粒的构建 | 第46-49页 |
4.2.4 质粒转染 | 第49页 |
4.2.5 Western blot | 第49-50页 |
4.2.6 Transwell迁移试验 | 第50页 |
4.2.7 结果统计 | 第50-51页 |
4.3 主要结果 | 第51-55页 |
4.3.1 KRT8在不同胃癌细胞株中的表达 | 第51页 |
4.3.2 KRT8上调效果检测 | 第51-52页 |
4.3.3 KRT8 上调增加 HGC-27 细胞迁移能力 | 第52-54页 |
4.3.4 KRT8的上调促进EMT的发生 | 第54-55页 |
4.4 讨论 | 第55-57页 |
第五章 RNAi抑制KRT8表达对胃肿瘤细胞生物学行为的影响 | 第57-65页 |
5.1 材料与仪器 | 第57页 |
5.1.1 主要试剂 | 第57页 |
5.1.2 主要仪器及耗材 | 第57页 |
5.2 方法 | 第57-60页 |
5.2.1 细胞培养 | 第57-58页 |
5.2.2 KRT8 siRNA的瞬时转染 | 第58页 |
5.2.3 Western blot | 第58-59页 |
5.2.4 Transwell迁移试验 | 第59-60页 |
5.2.5 结果统计 | 第60页 |
5.3 主要结果 | 第60-63页 |
5.3.1 KRT8siRNA沉默效果检测 | 第60-61页 |
5.3.2 沉默KRT8抑制AGS细胞迁移能力 | 第61-62页 |
5.3.3 沉默KRT8抑制EMT的发生 | 第62-63页 |
5.4 讨论 | 第63-65页 |
第六章 KRT8影响胃癌进展相关机制初步探讨 | 第65-72页 |
6.1 材料与仪器 | 第65-66页 |
6.1.1 主要试剂 | 第65-66页 |
6.1.2 主要仪器及耗材 | 第66页 |
6.2 方法 | 第66页 |
6.2.1 细胞培养 | 第66页 |
6.2.2 KRT8过表达质粒和KRT8 siRNA的瞬时转染 | 第66页 |
6.2.3 Western blot | 第66页 |
6.2.4 结果统计 | 第66页 |
6.3 主要结果 | 第66-69页 |
6.3.1 KRT8对胃癌细胞TGFβ/smad信号通路相关蛋白表达的影响 | 第66-68页 |
6.3.2 KRT8对细胞外基质(ECM)的影响 | 第68-69页 |
6.4 讨论 | 第69-72页 |
结论与展望 | 第72-73页 |
一、主要结论 | 第72页 |
二、工作展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
硕士期间所发论文 | 第83页 |