| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第13-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-29页 |
| 1.1 研究背景 | 第16-27页 |
| 1.1.1 胰腺癌 | 第16-18页 |
| 1.1.2 肿瘤转移、侵袭相关机制 | 第18-19页 |
| 1.1.3 RNA的m6A修饰 | 第19-22页 |
| 1.1.4 RNA m6A去甲基酶ALKBH5 | 第22-24页 |
| 1.1.5 Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤中的作用 | 第24-27页 |
| 1.2 本研究的目的、内容、技术路线 | 第27-29页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第27页 |
| 1.2.2 研究内容 | 第27页 |
| 1.2.3 技术路线 | 第27-29页 |
| 第二章 检测ALKBH5的表达水平及载体的构建与鉴定 | 第29-55页 |
| 2.1 实验材料与实验方法 | 第29-43页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第31-43页 |
| 2.1.3 统计学分析 | 第43页 |
| 2.2 实验结果 | 第43-52页 |
| 2.2.1 ALKBH5在正常胰腺组织和胰腺癌组织中的表达水平 | 第43-44页 |
| 2.2.2 ALKBH5在不同胰腺癌细胞株中的表达 | 第44-45页 |
| 2.2.3 载体pLKO.1-TRC的双酶切产物凝胶电泳结果 | 第45-46页 |
| 2.2.4 重组干扰质粒sh-ALKBH5菌液PCR鉴定 | 第46-47页 |
| 2.2.5 重组干扰质粒sh-ALKBH5测序结果 | 第47页 |
| 2.2.6 载体 3xFlag-Vector双酶切产物凝胶电泳结果 | 第47-48页 |
| 2.2.7 ALKBH5基因CDS区的基因扩增 | 第48-49页 |
| 2.2.8 重组过表达质粒 3x Flag-ALKBH5菌液PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 2.2.9 重组过表达质粒 3x Flag-ALKBH5测序结果 | 第50页 |
| 2.2.10 鉴定质粒sh-ALKBH5的干扰效果 | 第50-51页 |
| 2.2.11 鉴定质粒 3x Flag-ALKBH5的过表达效果 | 第51-52页 |
| 2.3 讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 ALKBH5抑制胰腺癌细胞迁移和侵袭 | 第55-63页 |
| 3.1 实验材料与实验方法 | 第55-57页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 3.2 实验结果 | 第57-61页 |
| 3.2.1 检测ALKBH5对胰腺癌细胞迁移能力的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.2 检测ALKBH5对胰腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第58-59页 |
| 3.2.3 检测ALKBH5对EMT相关蛋白表达水平的影响 | 第59-60页 |
| 3.2.4 检测ALKBH5对MMP2、MMP9蛋白表达水平的影响 | 第60-61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 初步探索ALKBH5对胰腺癌细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响 | 第63-72页 |
| 4.1 实验材料与实验方法 | 第63-66页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第64-66页 |
| 4.2 实验结果 | 第66-69页 |
| 4.2.1 下调ALKBH5对胰腺癌细胞Wnt/β-catenin通路主要蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.2 上调ALKBH5对胰腺癌细胞Wnt/β-catenin通路主要蛋白表达的影响 | 第67页 |
| 4.2.3 下调ALKBH5对胰腺癌细胞 β-catenin/TCF-4 的转录活性的影响 | 第67-68页 |
| 4.2.4 上调ALKBH5对胰腺癌细胞 β-catenin/TCF-4 的转录活性的影响 | 第68-69页 |
| 4.3 讨论 | 第69-72页 |
| 第五章 工作总结与展望 | 第72-74页 |
| 5.1 工作总结 | 第72页 |
| 5.2 工作展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
