| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1.1 甜叶菊与甜菊糖 | 第9-13页 |
| 1.1.1 甜菊糖 | 第9-11页 |
| 1.1.2 甜菊糖的提取 | 第11-12页 |
| 1.1.2.1 浸提 | 第11页 |
| 1.1.2.2 絮凝处理 | 第11页 |
| 1.1.2.3 纯化 | 第11页 |
| 1.1.2.4 组分分离 | 第11-12页 |
| 1.1.3 甜菊糖安全性 | 第12页 |
| 1.1.4 甜菊糖药用价值 | 第12页 |
| 1.1.5 甜菊糖的分析 | 第12-13页 |
| 1.2 甜菊醇的研究 | 第13-15页 |
| 1.2.1 甜菊醇 | 第13页 |
| 1.2.2 甜菊醇的制备 | 第13-14页 |
| 1.2.3 甜菊醇结构修饰 | 第14-15页 |
| 1.2.4 甜菊醇应用前景 | 第15页 |
| 1.3 生物转化 | 第15-17页 |
| 1.3.1 生物转化特点 | 第15-16页 |
| 1.3.2 转化的影响因素 | 第16页 |
| 1.3.3 微生物转化方法 | 第16-17页 |
| 1.4 酶蛋白分离纯化 | 第17-20页 |
| 1.4.1 蛋白质纯化 | 第17页 |
| 1.4.2 材料预处理 | 第17-18页 |
| 1.4.3 蛋白质纯化步骤 | 第18-20页 |
| 1.4.4 纯化蛋白质分析 | 第20页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 棘孢曲霉转化甜菊糖的研究 | 第22-32页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.1 材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌种 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.4 试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 液体培养棘孢曲霉转化甜菊糖 | 第23页 |
| 2.2.2 固体培养棘孢曲霉转化甜菊糖 | 第23-24页 |
| 2.2.3 诱导培养棘孢曲霉上清液转化甜菊糖 | 第24页 |
| 2.2.4 高效液相色谱条件 | 第24页 |
| 2.2.5 质谱条件 | 第24页 |
| 2.2.6 红外光谱分析 | 第24页 |
| 2.2.7 转化产物纯化 | 第24页 |
| 2.2.8 计算方法 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.3.1 液体培养棘孢曲霉转化甜菊糖 | 第25-26页 |
| 2.3.1.1 液体转化甜菊糖的分析 | 第25-26页 |
| 2.3.1.2 新产物鉴定 | 第26页 |
| 2.3.2 酶液转化甜菊糖结果分析 | 第26-30页 |
| 2.3.2.1 棘孢曲霉酶液转化甜菊糖的HPLC图 | 第26-28页 |
| 2.3.2.2 产物鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.2.3 沉淀物质和上清液中RA纯化 | 第29-30页 |
| 2.3.3 液体诱导棘孢曲霉上清液转化甜菊糖 | 第30页 |
| 2.4 本章小结 | 第30-32页 |
| 第三章 棘孢曲霉酶系的分离纯化 | 第32-41页 |
| 3.1 材料、试剂与仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.1 菌种 | 第32页 |
| 3.1.2 菌种培养基 | 第32页 |
| 3.1.3 试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.4 仪器与设备 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 菌体产酶培养及酶液提取 | 第33页 |
| 3.2.2 棘孢曲霉酶液活力测定 | 第33-34页 |
| 3.2.3 蛋白质含量测定 | 第34页 |
| 3.2.4 β-葡萄糖苷酶分析 | 第34页 |
| 3.2.5 酶的盐析及底物转化 | 第34-35页 |
| 3.2.5.1 硫酸铵盐析 | 第34-35页 |
| 3.2.5.2 盐析蛋白质对甜菊糖的转化 | 第35页 |
| 3.2.6 透析 | 第35页 |
| 3.2.7 聚乙二醇浓缩 | 第35页 |
| 3.2.8 离子交换层析 | 第35页 |
| 3.2.9 分子筛层析 | 第35-36页 |
| 3.2.10 酶纯度分析 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 3.3.1 酶活力测定 | 第36页 |
| 3.3.2 硫酸铵分级沉淀 | 第36-38页 |
| 3.3.2.1 硫酸铵饱和度的确定 | 第36-38页 |
| 3.3.2.2 蛋白质的电泳 | 第38页 |
| 3.3.3 凝胶过滤层析 | 第38-39页 |
| 3.3.4 离子交换层析 | 第39-40页 |
| 3.3.5 纯化结果 | 第40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 嗜松青霉对甜菊糖的转化 | 第41-49页 |
| 4.1 菌种与原料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 菌种与原料 | 第41页 |
| 4.1.2 菌种培养基 | 第41页 |
| 4.1.3 试剂 | 第41页 |
| 4.1.4 仪器与设备 | 第41-42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 液体培养嗜松青霉转化甜菊糖 | 第42页 |
| 4.2.2 固体培养嗜松青霉转化甜菊糖 | 第42页 |
| 4.2.3 高效液相检测 | 第42页 |
| 4.2.4 质谱检测 | 第42-43页 |
| 4.2.5 计算方法 | 第43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-48页 |
| 4.3.1 液体培养嗜松青霉的转化 | 第43-45页 |
| 4.3.2 固体培养嗜松青霉的转化 | 第45-47页 |
| 4.3.3 质谱检测分析 | 第47-48页 |
| 4.3.4 沉淀物及上清液分析 | 第48页 |
| 4.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 不同品种甜叶菊中甜菊糖的分析 | 第49-57页 |
| 5.1 材料、试剂及仪器 | 第49页 |
| 5.1.1 材料 | 第49页 |
| 5.1.2 试剂 | 第49页 |
| 5.1.3 仪器 | 第49页 |
| 5.2 实验方法 | 第49-51页 |
| 5.2.1 色谱条件 | 第49-50页 |
| 5.2.2 供试品溶液的制备 | 第50页 |
| 5.2.3 标准品溶液的制备 | 第50页 |
| 5.2.4 线性关系考察 | 第50页 |
| 5.2.5 精密度及重复性实验 | 第50页 |
| 5.2.6 二次提取试验 | 第50页 |
| 5.2.7 甜菊糖量的分析 | 第50-51页 |
| 5.3 结果分析 | 第51-56页 |
| 5.3.1 甜菊糖及RA的HPLC分析 | 第51-52页 |
| 5.3.2 精密度及重复性分析 | 第52页 |
| 5.3.3 甜菊糖的HPLC分析 | 第52-53页 |
| 5.3.4 计算甜菊糖含量 | 第53-56页 |
| 5.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第六章 结论 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 论文及专利 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67页 |