| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 符号说明及缩略词 | 第16-18页 |
| 第一部分 Sorangium cellulosum So0157-2两个内切酶的异源表达及性质分析 | 第18-64页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-26页 |
| 1.1 纤维堆囊菌简介 | 第20-21页 |
| 1.2 微生物降解纤维素的机制 | 第21页 |
| 1.3 纤维素酶的研究 | 第21-24页 |
| 1.3.1 纤维素降解过程概述 | 第21-22页 |
| 1.3.2 内切葡聚糖酶 | 第22-23页 |
| 1.3.3 Ig-like结构域 | 第23-24页 |
| 1.3.4 纤维素酶的应用 | 第24页 |
| 1.4 本部分论文开展思路及研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 So ce56及So0157-2纤维素降解酶类模块结构分析 | 第26-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.1 分析软件 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 S.cellulosum So ce56纤维素降解酶类(内外切酶)模块结构分析 | 第26页 |
| 2.2.2 S.cellulosum So01 57-2纤维素降解酶类(内外切酶)模块结构分析 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-29页 |
| 2.3.1 S.cellulosum So ce56纤维素降解酶类模块结构分析结果 | 第27-28页 |
| 2.3.2 S.cellulosum So0157-2纤维素降解酶类模块结构分析结果 | 第28-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 So0157-2内切葡聚糖酶ScCel8A的异源表达及性质研究 | 第30-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-34页 |
| 3.1.1 菌株及表达载体 | 第30页 |
| 3.1.2 培养基 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第32-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.2.1 内切葡聚糖酶ScCel8A序列分析 | 第34页 |
| 3.2.2 表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 3.2.3 目的蛋白的异源表达及纯化 | 第36-37页 |
| 3.2.4 重组蛋白(r-ScCel8A)酶学性质分析 | 第37-39页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第39-49页 |
| 3.3.1 So0157-2内切葡聚糖酶ScCel8A序列分析 | 第39-40页 |
| 3.3.2 表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.3.3 目的蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
| 3.3.4 目的蛋白的纯化及活性分析 | 第42-43页 |
| 3.3.5 酶学性质分析 | 第43-49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 So0157-2内切葡聚糖酶ScCel9A异源表达与酶学表征 | 第50-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 菌株及表达载体 | 第50页 |
| 4.1.2 培养基 | 第50页 |
| 4.1.3 主要实验试剂 | 第50-51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 序列生物信息学分析 | 第51页 |
| 4.2.2 表达载体的构建 | 第51-53页 |
| 4.2.3 目的蛋白的异源表达及纯化 | 第53页 |
| 4.2.4 酶学性质分析 | 第53-54页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第54-61页 |
| 4.3.1 So0157-2内切葡聚糖酶ScCel9A序列分析 | 第54-55页 |
| 4.3.2 表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 4.3.3 目的蛋白的诱导表达 | 第56-57页 |
| 4.3.4 目的蛋白的纯化 | 第57-58页 |
| 4.3.5 酶学性质分析 | 第58-61页 |
| 4.4 本章小结 | 第61-64页 |
| 第二部分 5-甲基吡嗪-2-羧酸生物转化法探究 | 第64-100页 |
| 第一章 文献综述 | 第66-72页 |
| 1.1 2,5-二甲基吡嗪(2,5-dimethylpyrazine,DMP) | 第66页 |
| 1.2 5-甲基吡嗪-2-羧酸(5-Methylpyrazine-2-carboxylic acid,MPCA) | 第66-68页 |
| 1.2.1 5-甲基吡嗪-2-羧酸的基本性质与应用 | 第66-67页 |
| 1.2.2 5-甲基吡嗪-2-羧酸的合成方法 | 第67页 |
| 1.2.3 生物法合成5-甲基吡嗪-2-羧酸的原理 | 第67-68页 |
| 1.3 生物法转化中涉及酶类 | 第68-69页 |
| 1.3.1 二甲苯单加氧酶(XMO) | 第69页 |
| 1.3.2 苯甲醇氧化酶(BADH) | 第69页 |
| 1.3.3 苯甲醛氧化酶(BZDH) | 第69页 |
| 1.4 本部分论文开展思路及研究内容 | 第69-72页 |
| 第二章 恶臭假单胞菌ATCC33015中MPCA的转化 | 第72-82页 |
| 2.1 实验材料 | 第72页 |
| 2.1.1 菌株及培养基 | 第72页 |
| 2.1.2 常用试剂及仪器 | 第72页 |
| 2.2 实验方法 | 第72-75页 |
| 2.2.1 对二甲苯添加方式的探究 | 第72页 |
| 2.2.2 DMP浓度对恶臭假单胞ATCC33015生长的影响 | 第72-73页 |
| 2.2.3 产物MPCA萃取方法探究 | 第73页 |
| 2.2.4 不同悬浮液对底物转化的影响 | 第73-74页 |
| 2.2.5 MPCA标准曲线绘制 | 第74页 |
| 2.2.6 底物DMP的持续添加实验 | 第74-75页 |
| 2.2.7 底物DMP的持续添加实验中底物转化的HPLC定量分析 | 第75页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第75-80页 |
| 2.3.1 对二甲苯添加方式及适宜添加量结果 | 第75-76页 |
| 2.3.2 DMP适宜添加浓度结果 | 第76页 |
| 2.3.3 产物MPCA萃取结果 | 第76-77页 |
| 2.3.4 不同悬浮液对底物转化的影响结果 | 第77-78页 |
| 2.3.5 MPCA标准曲线 | 第78页 |
| 2.3.6 底物DMP的持续添加实验结果 | 第78-79页 |
| 2.3.7 底物DMP的持续添加实验中底物转化的HPLC定量分析结果 | 第79-80页 |
| 2.4 本章小结 | 第80-82页 |
| 第三章 大肠杆菌中5-甲基吡嗪-2-羧酸的转化 | 第82-100页 |
| 3.1 实验材料 | 第82-84页 |
| 3.1.1 菌株及表达载体 | 第82页 |
| 3.1.2 培养基 | 第82-83页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第83页 |
| 3.1.4 主要实验仪器 | 第83-84页 |
| 3.2 实验方法 | 第84-87页 |
| 3.2.1 xylC、xylM、xylA、xylB基因序列分析 | 第84页 |
| 3.2.2 四种表达载体的构建 | 第84-86页 |
| 3.2.3 四种表达载体的异源表达 | 第86页 |
| 3.2.4 四种表达载体发酵体系中底物转化及产物鉴定 | 第86-87页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第87-98页 |
| 3.3.1 xylC、xylM、xylA、xylB基因序列分析结果 | 第87页 |
| 3.3.2 pWWO质粒提取结果 | 第87-88页 |
| 3.3.3 四种表达载体构建结果 | 第88-89页 |
| 3.3.4 四种表达载体的诱导表达结果 | 第89-90页 |
| 3.3.5 四种表达载体发酵体系中底物转化及产物鉴定结果 | 第90-98页 |
| 3.4 本章小结 | 第98-100页 |
| 总结与展望 | 第100-102页 |
| 附录 | 第102-112页 |
| 参考文献 | 第112-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第117页 |
