摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第12-28页 |
1.1 小桐子简介及研究概况 | 第12-14页 |
1.2 植物组织培养 | 第14-16页 |
1.3 小桐子组织培养 | 第16-21页 |
1.3.1 小桐子不定芽发生途径 | 第16-18页 |
1.3.2 小桐子体细胞胚发生途径 | 第18-20页 |
1.3.3 小桐子悬浮细胞的培养 | 第20页 |
1.3.4 小桐子节间的培养 | 第20-21页 |
1.4 植物遗传转化 | 第21-24页 |
1.4.1 农杆菌介导转化法 | 第22-23页 |
1.4.2 基因枪轰击转化法 | 第23-24页 |
1.4.3 瞬时表达对稳定转化的作用 | 第24页 |
1.5 小桐子遗传转化研究 | 第24-26页 |
1.5.1 农杆菌介导转化小桐子 | 第24-26页 |
1.5.2 基因枪轰击转化小桐子 | 第26页 |
1.6 本论文研究的目的和意义 | 第26-28页 |
第2章 小桐子组织培养体系的建立 | 第28-46页 |
2.1 植物材料 | 第28页 |
2.2 试剂和仪器 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-32页 |
2.3.1 试剂的配制 | 第28-29页 |
2.3.2 培养条件 | 第29页 |
2.3.3 外植体的处理和消毒 | 第29页 |
2.3.4 组织培养方法及实验设计 | 第29-30页 |
2.3.5 移栽组织培养幼苗 | 第30-31页 |
2.3.6 数据处理及分析 | 第31-32页 |
2.4 结果与分析 | 第32-43页 |
2.4.1 BAP 和CaCl_2 诱导芽的过程 | 第32-33页 |
2.4.2 BAP 和CaCl_2 对愈伤组织诱导的影响 | 第33-34页 |
2.4.3 BAP 和CaCl_2 对诱导体细胞胚和芽的影响 | 第34-39页 |
2.4.4 以上方法在其他外植体的应用 | 第39-40页 |
2.4.5 BAP 和GA3诱导芽的过程 | 第40-41页 |
2.4.6 GA3 对诱导芽的影响 | 第41-43页 |
2.5 讨论与展望 | 第43-46页 |
2.5.1 CaCl_2和BAP 在小桐子组织培养中作用 | 第43-44页 |
2.5.2 小桐子组培幼苗生根 | 第44页 |
2.5.3 GA3 在小桐子组织培养中作用 | 第44-46页 |
第3章 小桐子悬浮细胞的培养 | 第46-60页 |
3.1 植物材料 | 第46页 |
3.2 试剂和仪器 | 第46页 |
3.3 实验方法 | 第46-48页 |
3.3.1 试剂的配制 | 第46-47页 |
3.3.2 悬浮细胞培养的方法 | 第47页 |
3.3.3 生长曲线测定及细胞计数 | 第47页 |
3.3.4 培养条件 | 第47页 |
3.3.5 数据处理与分析 | 第47-48页 |
3.4 结果与分析 | 第48-57页 |
3.4.1 愈伤组织的诱导及悬浮培养选择最佳愈伤组织 | 第48-50页 |
3.4.2 振荡频率对悬浮细胞的影响 | 第50页 |
3.4.3 基本培养基(B5 和MS)对悬浮细胞的影响 | 第50-51页 |
3.4.4 最低起始接种量的确定 | 第51-52页 |
3.4.5 2,4-D 浓度对悬浮细胞的影响 | 第52-53页 |
3.4.6 蔗糖浓度和pH 值对悬浮细胞的影响 | 第53-54页 |
3.4.7 2,4-D 与其他激素组合对悬浮细胞的影响 | 第54-55页 |
3.4.8 KN 浓度对悬浮细胞的影响 | 第55-56页 |
3.4.9 小桐子悬浮细胞与其他物种悬浮细胞的比较 | 第56-57页 |
3.5 讨论与展望 | 第57-60页 |
第4章 小桐子遗传转化的初步研究 | 第60-78页 |
4.1 材料 | 第60-61页 |
4.1.1 植物材料 | 第60页 |
4.1.2 质粒和菌株 | 第60页 |
4.1.3 PCR 引物 | 第60页 |
4.1.4 基因枪耗材 | 第60-61页 |
4.2 试剂和仪器 | 第61页 |
4.3 实验方法 | 第61-69页 |
4.3.1 试剂的配制 | 第61-64页 |
4.3.2 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第64页 |
4.3.3 农杆菌电击转化 | 第64-65页 |
4.3.4 CTAB 法提取植物基因组DNA | 第65页 |
4.3.5 质粒的小量提取(酚抽提法) | 第65-66页 |
4.3.6 质粒的大量提取(用于基因枪) | 第66页 |
4.3.7 农杆菌介导转化子叶和下胚轴 | 第66-67页 |
4.3.8 基因枪的操作 | 第67-68页 |
4.3.9 GUS 组织化学染色 | 第68页 |
4.3.10 数据处理与分析 | 第68-69页 |
4.4 结果与分析 | 第69-76页 |
4.4.1 农杆菌介导转化小桐子子叶和下胚轴的初步研究 | 第69-74页 |
4.4.2 基因枪轰击转化小桐子子叶的初步研究 | 第74-76页 |
4.5 讨论与展望 | 第76-78页 |
4.5.1 农杆菌介导转化小桐子 | 第76-77页 |
4.5.2 基因枪轰击转化小桐子 | 第77页 |
4.5.3 不能获得转基因植株原因分析 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-88页 |
附录 | 第88-106页 |
致谢 | 第106页 |