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小桐子组织培养体系的建立及遗传转化的初步研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 前言第12-28页
    1.1 小桐子简介及研究概况第12-14页
    1.2 植物组织培养第14-16页
    1.3 小桐子组织培养第16-21页
        1.3.1 小桐子不定芽发生途径第16-18页
        1.3.2 小桐子体细胞胚发生途径第18-20页
        1.3.3 小桐子悬浮细胞的培养第20页
        1.3.4 小桐子节间的培养第20-21页
    1.4 植物遗传转化第21-24页
        1.4.1 农杆菌介导转化法第22-23页
        1.4.2 基因枪轰击转化法第23-24页
        1.4.3 瞬时表达对稳定转化的作用第24页
    1.5 小桐子遗传转化研究第24-26页
        1.5.1 农杆菌介导转化小桐子第24-26页
        1.5.2 基因枪轰击转化小桐子第26页
    1.6 本论文研究的目的和意义第26-28页
第2章 小桐子组织培养体系的建立第28-46页
    2.1 植物材料第28页
    2.2 试剂和仪器第28页
    2.3 实验方法第28-32页
        2.3.1 试剂的配制第28-29页
        2.3.2 培养条件第29页
        2.3.3 外植体的处理和消毒第29页
        2.3.4 组织培养方法及实验设计第29-30页
        2.3.5 移栽组织培养幼苗第30-31页
        2.3.6 数据处理及分析第31-32页
    2.4 结果与分析第32-43页
        2.4.1 BAP 和CaCl_2 诱导芽的过程第32-33页
        2.4.2 BAP 和CaCl_2 对愈伤组织诱导的影响第33-34页
        2.4.3 BAP 和CaCl_2 对诱导体细胞胚和芽的影响第34-39页
        2.4.4 以上方法在其他外植体的应用第39-40页
        2.4.5 BAP 和GA3诱导芽的过程第40-41页
        2.4.6 GA3 对诱导芽的影响第41-43页
    2.5 讨论与展望第43-46页
        2.5.1 CaCl_2和BAP 在小桐子组织培养中作用第43-44页
        2.5.2 小桐子组培幼苗生根第44页
        2.5.3 GA3 在小桐子组织培养中作用第44-46页
第3章 小桐子悬浮细胞的培养第46-60页
    3.1 植物材料第46页
    3.2 试剂和仪器第46页
    3.3 实验方法第46-48页
        3.3.1 试剂的配制第46-47页
        3.3.2 悬浮细胞培养的方法第47页
        3.3.3 生长曲线测定及细胞计数第47页
        3.3.4 培养条件第47页
        3.3.5 数据处理与分析第47-48页
    3.4 结果与分析第48-57页
        3.4.1 愈伤组织的诱导及悬浮培养选择最佳愈伤组织第48-50页
        3.4.2 振荡频率对悬浮细胞的影响第50页
        3.4.3 基本培养基(B5 和MS)对悬浮细胞的影响第50-51页
        3.4.4 最低起始接种量的确定第51-52页
        3.4.5 2,4-D 浓度对悬浮细胞的影响第52-53页
        3.4.6 蔗糖浓度和pH 值对悬浮细胞的影响第53-54页
        3.4.7 2,4-D 与其他激素组合对悬浮细胞的影响第54-55页
        3.4.8 KN 浓度对悬浮细胞的影响第55-56页
        3.4.9 小桐子悬浮细胞与其他物种悬浮细胞的比较第56-57页
    3.5 讨论与展望第57-60页
第4章 小桐子遗传转化的初步研究第60-78页
    4.1 材料第60-61页
        4.1.1 植物材料第60页
        4.1.2 质粒和菌株第60页
        4.1.3 PCR 引物第60页
        4.1.4 基因枪耗材第60-61页
    4.2 试剂和仪器第61页
    4.3 实验方法第61-69页
        4.3.1 试剂的配制第61-64页
        4.3.2 大肠杆菌感受态制备及转化第64页
        4.3.3 农杆菌电击转化第64-65页
        4.3.4 CTAB 法提取植物基因组DNA第65页
        4.3.5 质粒的小量提取(酚抽提法)第65-66页
        4.3.6 质粒的大量提取(用于基因枪)第66页
        4.3.7 农杆菌介导转化子叶和下胚轴第66-67页
        4.3.8 基因枪的操作第67-68页
        4.3.9 GUS 组织化学染色第68页
        4.3.10 数据处理与分析第68-69页
    4.4 结果与分析第69-76页
        4.4.1 农杆菌介导转化小桐子子叶和下胚轴的初步研究第69-74页
        4.4.2 基因枪轰击转化小桐子子叶的初步研究第74-76页
    4.5 讨论与展望第76-78页
        4.5.1 农杆菌介导转化小桐子第76-77页
        4.5.2 基因枪轰击转化小桐子第77页
        4.5.3 不能获得转基因植株原因分析第77-78页
参考文献第78-88页
附录第88-106页
致谢第106页

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