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茄子黄萎病防卫相关microRNA的鉴定及miR482、StoL13a的功能研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语词汇表第12-14页
第一章 文献综述第14-38页
    l miRNA——一类具有调控作用的非编码RNA第14-21页
        1.1 miRNA的发现第14页
        1.2 miRNA的特征第14-16页
        1.3 miRNA的生物合成第16-17页
        1.4 miRNA的调控方式第17-18页
        1.5 植物miRNA的生物功能第18-21页
    2 小RNA与植物免疫第21-26页
        2.1 miRNA在PAMP中的作用第22页
        2.2 病原菌对miRNA途径的抑制作用第22-23页
        2.3 内源siRNA在ETI中的作用第23-24页
        2.4 内源小RNA在其它病原和植物互作中的作用第24-26页
        2.5 小RNA与甲基化第26页
    3 miRNA的研究方法第26-32页
        3.1 miRNA的获得第27-29页
        3.2 miRNA的表达检测第29-30页
        3.3 miRNA的功能验证第30-31页
        3.4 miRNA的靶基因研究第31-32页
    4 植物黄萎病及其研究进展第32-36页
        4.1 黄萎病抗病相关基因第33-34页
        4.2 乙烯在植物与黄萎病菌互作中的作用第34-35页
        4.3 黄萎病菌引起的植物生理生化和组织抗性第35-36页
    5 本研究的目的和意义第36-38页
第二章 茄子(Solanum melongena L.)miRNA的预测第38-46页
    1 材料与方法第38-40页
        1.1 相关数据库第38页
        1.2 相关应用软件第38页
        1.3 茄子miRNA的生物信息学预测方法第38-40页
        1.4 靶基因的预测第40页
    2 结果与分析第40-45页
        2.1 预测的茄子miRNA第40-43页
        2.2 茄子miRNA特性第43-44页
        2.3 茄子miRNA靶基因预测第44-45页
    3 讨论与结论第45-46页
第三章 高通量测序鉴定茄子miRNA第46-56页
    1 材料与方法第46-48页
        1.1 植物材料、菌种和侵染方法第46-47页
        1.2 小RNA文库的制备和测序第47页
        1.3 小RNA测序结果分析第47-48页
        1.4 新miRNA的预测第48页
        1.5 靶基因预测第48页
    2 结果与分析第48-54页
        2.1 茄子中小RNA的高通量测序第48-50页
        2.2 已知miRNA和进化保守性第50-51页
        2.3 在茄子中检测到的新miRNA第51-53页
        2.4 茄子中miRNA靶序列的预测第53-54页
    3 讨论与结论第54-56页
        3.1 茄子小RNA进化的保守性第54页
        3.2 茄子中预测的新miRNA第54-56页
第四章 黄萎病菌胁迫下茄子miRNA的差异表达分析第56-68页
    1 材料与方法第57-58页
        1.1 植物材料、菌种和侵染方法第57页
        1.2 激素处理第57页
        1.3 病情统计分析第57页
        1.4 差异表达的miRNA的分析统计第57-58页
        1.5 实验验证miRNA及相应靶基因:表达第58页
    2 结果与分析第58-66页
        2.1 受黄萎病菌诱导差别表达的miRNA第58-61页
        2.2 茄子中miRNA及其靶基因的表达模式第61-64页
        2.3 对生长素运输的药理性抑制导致黄萎病病菌感染增加第64-66页
    3 讨论与结论第66-68页
第五章 miR482介导的沉默级联反应参与马铃薯对黄萎病的响应第68-84页
    1 材料与方法第69-71页
        1.1 材料、菌种和载体第69页
        1.2 miRNA前体基因的克隆与表达载体的构建第69页
        1.3 马铃薯的遗传转化第69-70页
        1.4 转基因植株的分子鉴定第70页
        1.5 转基因植株的表型观察及抗病性分析第70页
        1.6 分析统计所用软件及数据库第70-71页
    2 结果与分析第71-82页
        2.1 马铃薯miR482e响应大丽轮枝菌的侵染第71-73页
        2.2 马铃薯miR482e过表达植株对大丽轮枝菌更加敏感第73-74页
        2.3 miR482家族成员调控NBS-LRR型抗病基因第74-78页
        2.4 miR482e起始tasiRNA的产生第78-82页
        2.5 miR482e引起tasiRNA靶基因的预测与验证第82页
    3 讨论与结论第82-84页
第六章 受黄萎病诱导表达基因StoL13a的克隆及功能分析第84-102页
    1 材料与方法第84-87页
        1.1 植物材料、菌种和处理方法第84-85页
        1.2 野生茄子L13a的克隆和系统发育分析第85页
        1.3 载体构建和遗传转化第85页
        1.4 转基因植株的分子鉴定第85-86页
        1.5 转基因植株病情统计分析第86页
        1.6 病菌总量检测第86页
        1.7 组织化学染色第86页
        1.8 抗氧化酶及其同工酶测定第86-87页
        1.9 抗性相关基因表达分析第87页
    2 结果与分析第87-100页
        2.1 StoL13a基因的克隆及结构分析第87-89页
        2.2 StoL13a的系统进化分析第89-90页
        2.3 StoL13a的表达响应大丽轮枝菌侵染及不同激素的处理第90-92页
        2.4 转基因马铃薯植株对大丽轮枝菌的抗性分析第92-94页
        2.5 转基因马铃薯植株的抗氧化分析第94-95页
        2.6 转基因马铃薯植株抗病相关基因的表达分析第95-100页
    3 讨论与结论第100-102页
全文结论第102-104页
本研究创新之处第104-106页
参考文献第106-126页
附录第126-156页
    附录一 图表第126-149页
    附录二 实验方法第149-154页
    附录三 常用培养基及试剂配置第154-156页
攻读博士期间已发表及待发表论文第156-158页
致谢第158页

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