摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 研究问题由来 | 第12页 |
1.2 文献综述 | 第12-24页 |
1.2.1 胚胎妊娠研究进展 | 第12-14页 |
1.2.1.1 母猪胚胎妊娠过程 | 第12-13页 |
1.2.1.2 附植关键调控分子 | 第13页 |
1.2.1.3 胚胎妊娠内分泌调控 | 第13-14页 |
1.2.2 ZEA对猪影响的研究进展 | 第14-20页 |
1.2.2.1 玉米赤霉烯酮简介 | 第14-16页 |
1.2.2.2 ZEA的危害 | 第16-18页 |
1.2.2.3 ZEA致毒机理研究进展 | 第18-19页 |
1.2.2.4 ZEA中毒的治疗研究进展 | 第19-20页 |
1.2.3 自噬研究进展 | 第20-22页 |
1.2.3.1 自噬的概念及形成 | 第20页 |
1.2.3.2 自噬与细胞状态的关系 | 第20-21页 |
1.2.3.3 自噬的检测方法 | 第21-22页 |
1.2.4 研究目的与意义 | 第22-24页 |
2 实验材料与方法 | 第24-40页 |
2.1 材料 | 第24-28页 |
2.1.1 动物实验 | 第24页 |
2.1.2 细胞系 | 第24页 |
2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第24-26页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第26页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.1.6 主要生物学分析软件及网站 | 第27-28页 |
2.2 试验方法 | 第28-40页 |
2.2.1 HE组织切片制作 | 第28-29页 |
2.2.2 组织和细胞总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.3 cDNA的合成 | 第30页 |
2.2.4 引物的设计 | 第30-31页 |
2.2.5 Q-PCR检测 | 第31-32页 |
2.2.6 腺病毒载体感染 | 第32页 |
2.2.7 双荧光成像实验 | 第32-33页 |
2.2.8 细胞增殖实验 | 第33-34页 |
2.2.9 免疫荧光技术 | 第34页 |
2.2.10 Western Blot技术 | 第34-37页 |
2.2.11 流式凋亡实验步骤 | 第37-38页 |
2.2.12 流式ROS实验步骤 | 第38-39页 |
2.2.13 流式JC-1实验步骤 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-62页 |
3.1 胚胎大小统计 | 第40页 |
3.2 胚胎与黄体数统计 | 第40-41页 |
3.3 内脏器官及生殖器官的重量统计分析 | 第41-43页 |
3.4 卵巢组织HE切片观察 | 第43-44页 |
3.4.1 卵巢切片变化 | 第43页 |
3.4.2 妊娠黄体改变 | 第43-44页 |
3.5 子宫内膜组织切片观察 | 第44-47页 |
3.6 子宫内膜电镜观察 | 第47-51页 |
3.6.1 子宫内膜细胞内环境发生改变 | 第48页 |
3.6.2 子宫内膜细胞线粒体肿胀、破裂 | 第48-49页 |
3.6.3 子宫内膜细胞出现大量自噬体 | 第49-50页 |
3.6.4 子宫内膜细胞溶酶体数量增加 | 第50-51页 |
3.7 子宫内膜原代细胞电镜结果 | 第51-52页 |
3.8 子宫内膜组织及细胞的基因定量PCR | 第52-54页 |
3.9 ZEA的子宫内膜原代细胞活性影响 | 第54-55页 |
3.10 ZEA对细胞凋亡的影响 | 第55-56页 |
3.11 ZEA对自噬蛋白的影响 | 第56页 |
3.12 双荧光检测LC-3 表达 | 第56-58页 |
3.13 ZEA对凋亡蛋白的影响 | 第58页 |
3.14 ZEA对caspas3通路的影响 | 第58-59页 |
3.15 ZEA对细胞的线粒体膜电位改变 | 第59-61页 |
3.16 ZEA对细胞的氧化应激毒性 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-70页 |
4.1 母猪胚胎附植窗口期ZEA对胚胎的影响 | 第62页 |
4.2 母猪胚胎附植窗口期ZEA对母体内脏的影响 | 第62-63页 |
4.3 母猪胚胎附植窗口期ZEA对窗口期的生殖系统影响 | 第63-69页 |
4.3.1 母猪胚胎附植窗口期ZEA对卵巢的影响 | 第63-64页 |
4.3.2 母猪胚胎附植窗口期ZEA对子宫内膜的影响 | 第64-69页 |
4.4 ZEA对猪子宫内膜损伤可能机制 | 第69-70页 |
5 小结 | 第70-72页 |
5.1 本研究的主要结果与结论 | 第70页 |
5.2 本研究创新与特色 | 第70页 |
5.3 本研究不足之处与进一步工作建议 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
致谢 | 第82页 |