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玉米赤霉烯酮对胚胎附植的影响及分子机理初探

摘要第8-9页
Abstract第9-10页
缩略语表第11-12页
1 前言第12-24页
    1.1 研究问题由来第12页
    1.2 文献综述第12-24页
        1.2.1 胚胎妊娠研究进展第12-14页
            1.2.1.1 母猪胚胎妊娠过程第12-13页
            1.2.1.2 附植关键调控分子第13页
            1.2.1.3 胚胎妊娠内分泌调控第13-14页
        1.2.2 ZEA对猪影响的研究进展第14-20页
            1.2.2.1 玉米赤霉烯酮简介第14-16页
            1.2.2.2 ZEA的危害第16-18页
            1.2.2.3 ZEA致毒机理研究进展第18-19页
            1.2.2.4 ZEA中毒的治疗研究进展第19-20页
        1.2.3 自噬研究进展第20-22页
            1.2.3.1 自噬的概念及形成第20页
            1.2.3.2 自噬与细胞状态的关系第20-21页
            1.2.3.3 自噬的检测方法第21-22页
        1.2.4 研究目的与意义第22-24页
2 实验材料与方法第24-40页
    2.1 材料第24-28页
        2.1.1 动物实验第24页
        2.1.2 细胞系第24页
        2.1.3 主要试剂与试剂盒第24-26页
        2.1.4 主要试剂的配制第26页
        2.1.5 主要仪器设备第26-27页
        2.1.6 主要生物学分析软件及网站第27-28页
    2.2 试验方法第28-40页
        2.2.1 HE组织切片制作第28-29页
        2.2.2 组织和细胞总RNA的提取第29-30页
        2.2.3 cDNA的合成第30页
        2.2.4 引物的设计第30-31页
        2.2.5 Q-PCR检测第31-32页
        2.2.6 腺病毒载体感染第32页
        2.2.7 双荧光成像实验第32-33页
        2.2.8 细胞增殖实验第33-34页
        2.2.9 免疫荧光技术第34页
        2.2.10 Western Blot技术第34-37页
        2.2.11 流式凋亡实验步骤第37-38页
        2.2.12 流式ROS实验步骤第38-39页
        2.2.13 流式JC-1实验步骤第39-40页
3 结果与分析第40-62页
    3.1 胚胎大小统计第40页
    3.2 胚胎与黄体数统计第40-41页
    3.3 内脏器官及生殖器官的重量统计分析第41-43页
    3.4 卵巢组织HE切片观察第43-44页
        3.4.1 卵巢切片变化第43页
        3.4.2 妊娠黄体改变第43-44页
    3.5 子宫内膜组织切片观察第44-47页
    3.6 子宫内膜电镜观察第47-51页
        3.6.1 子宫内膜细胞内环境发生改变第48页
        3.6.2 子宫内膜细胞线粒体肿胀、破裂第48-49页
        3.6.3 子宫内膜细胞出现大量自噬体第49-50页
        3.6.4 子宫内膜细胞溶酶体数量增加第50-51页
    3.7 子宫内膜原代细胞电镜结果第51-52页
    3.8 子宫内膜组织及细胞的基因定量PCR第52-54页
    3.9 ZEA的子宫内膜原代细胞活性影响第54-55页
    3.10 ZEA对细胞凋亡的影响第55-56页
    3.11 ZEA对自噬蛋白的影响第56页
    3.12 双荧光检测LC-3 表达第56-58页
    3.13 ZEA对凋亡蛋白的影响第58页
    3.14 ZEA对caspas3通路的影响第58-59页
    3.15 ZEA对细胞的线粒体膜电位改变第59-61页
    3.16 ZEA对细胞的氧化应激毒性第61-62页
4 讨论第62-70页
    4.1 母猪胚胎附植窗口期ZEA对胚胎的影响第62页
    4.2 母猪胚胎附植窗口期ZEA对母体内脏的影响第62-63页
    4.3 母猪胚胎附植窗口期ZEA对窗口期的生殖系统影响第63-69页
        4.3.1 母猪胚胎附植窗口期ZEA对卵巢的影响第63-64页
        4.3.2 母猪胚胎附植窗口期ZEA对子宫内膜的影响第64-69页
    4.4 ZEA对猪子宫内膜损伤可能机制第69-70页
5 小结第70-72页
    5.1 本研究的主要结果与结论第70页
    5.2 本研究创新与特色第70页
    5.3 本研究不足之处与进一步工作建议第70-72页
参考文献第72-82页
致谢第82页

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