| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略语表 | 第15-17页 |
| 1 前言 | 第17-22页 |
| 1.1 研究背景 | 第17-19页 |
| 1.1.1 T-2毒素的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.1.2 T-2毒素调控炎症因子表达的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2 microRNA研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.1 microRNA介绍 | 第19-20页 |
| 1.2.2 microRNA-155的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3 本课题研究思路 | 第21-22页 |
| 1.4 研究内容和目标 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-44页 |
| 2.1 细胞株 | 第22页 |
| 2.2 药品和试剂 | 第22-24页 |
| 2.3 溶液的配置 | 第24-26页 |
| 2.4 主要仪器和设备 | 第26-27页 |
| 2.5 细胞的复苏、传代和冻存 | 第27-28页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达 | 第28-32页 |
| 2.6.1 细胞处理及分组 | 第28页 |
| 2.6.2 总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.6.3 总RNA纯度及完整性的检测 | 第29页 |
| 2.6.4 逆转录反应 | 第29-30页 |
| 2.6.5 实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平 | 第30-32页 |
| 2.7 Western blot方法 | 第32-36页 |
| 2.7.1 细胞蛋白提取 | 第32-33页 |
| 2.7.2 蛋白浓度测定 | 第33页 |
| 2.7.3 SDS-PAGE电泳 | 第33-34页 |
| 2.7.4 Western印迹杂交 | 第34-36页 |
| 2.8 microRNA和质粒的瞬时转染 | 第36-37页 |
| 2.9 pcDNA-atg3质粒的制备 | 第37-40页 |
| 2.10 microRNA-155靶基因预测 | 第40页 |
| 2.11 pGL3-3’UTR质粒的构建 | 第40-42页 |
| 2.12 双荧光素酶检测实验 | 第42-43页 |
| 2.13 统计学分析 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-69页 |
| 3.1 RAW264.7细胞培养 | 第44页 |
| 3.2 RNA质量鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 质粒的构建 | 第45-48页 |
| 3.4 microRNA-155参与调控T-2毒素诱导的促炎症因子的表达 | 第48-54页 |
| 3.4.1 T-2毒素诱导RAW264.7细胞产生炎症反应 | 第48页 |
| 3.4.2 microRNA-155在T-2毒素处理的RAW264.7细胞中表达上调 | 第48-49页 |
| 3.4.3 microRNA-155mimic促进T-2毒素诱导的炎症因子的表达 | 第49-52页 |
| 3.4.4 microRNA-155inhibitor抑制T-2毒素诱导的炎症因子的表达 | 第52-54页 |
| 3.5 microRNA-155通过靶向调节SOCS1促进T-2毒素诱导的炎症因子的表达 | 第54-55页 |
| 3.6 microRNA-155靶向调节rheb和atg3表达 | 第55-60页 |
| 3.7 rheb促进T-2毒素诱导的促炎症因子的表达 | 第60-65页 |
| 3.7.1 超表达rheb促进炎症因子的表达 | 第60-63页 |
| 3.7.2 干扰rheb抑制炎症因子的表达 | 第63-65页 |
| 3.8 Atg3抑制T-2毒素诱导的促炎症因子的表达 | 第65-69页 |
| 3.8.1 超表达atg3抑制炎症因子的表达 | 第65-67页 |
| 3.8.2 干扰atg3促进炎症因子的表达 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-75页 |
| 4.1 细胞系和T-2毒素剂量的选择 | 第69-70页 |
| 4.2 microRNA-155在T-2毒素诱导的炎症因子表达的过程中发挥着双重作用 | 第70-71页 |
| 4.3 microRNA-155通过直接靶向rheb和atg3来发挥作用 | 第71-74页 |
| 4.4 microRNA-155与核糖体应激反应的关系 | 第74-75页 |
| 4.5 总结 | 第75页 |
| 5 全文创新性总结 | 第75-77页 |
| 6 文献综述 | 第77-87页 |
| 6.1 microRNA的发现 | 第77-78页 |
| 6.2 microRNA的生物合成 | 第78-79页 |
| 6.3 影响microRNA表达的因素 | 第79-81页 |
| 6.4 microRNA的生物学功能 | 第81页 |
| 6.5 microRNA与炎症因子的调控作用 | 第81-86页 |
| 6.6 总结及展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 附录 | 第105-111页 |
| 附录Ⅰ—研究生简介 | 第105-106页 |
| 附录Ⅱ | 第106-110页 |
| 附录Ⅲ—答辩主要的问题的回答 | 第110-111页 |
