| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 中文文摘 | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| 1.1 产油微藻 | 第14页 |
| 1.2 栅藻 | 第14-15页 |
| 1.3 传统培养微藻积累生物量和油脂含量的方法 | 第15页 |
| 1.4 两步法培养栅藻 | 第15-16页 |
| 1.5 诱变手段 | 第16页 |
| 1.6 脂肪酸合成酶抑制剂 | 第16-17页 |
| 1.7 尼罗红结合油脂荧光染色 | 第17-18页 |
| 1.8 流式细胞仪分析技术 | 第18页 |
| 1.9 基因工程技术 | 第18-19页 |
| 1.10 设计简并引物 | 第19页 |
| 1.11 基因枪介导转化法 | 第19-20页 |
| 1.12 载体应用 | 第20页 |
| 1.13 本论文的研究的目的意义及主要研究内容 | 第20-24页 |
| 1.13.1 研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 1.13.2 主要研究内容 | 第21-22页 |
| 1.13.3 技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 藻种、菌种和载体 | 第24页 |
| 2.1.2 培养基 | 第24页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 栅藻的培养 | 第26页 |
| 2.2.2 挪霧FACHB-14的培养 | 第26页 |
| 2.2.3 两步缺氮培养 | 第26-27页 |
| 2.2.4 不同光照强度对挪藻FACHB-14生物量和油脂积累的影响 | 第27页 |
| 2.2.5 不同稍酸钠浓度对栅藻FACHB-14积累生物量和油脂含量的影响 | 第27页 |
| 2.3 诱变试验方法 | 第27-29页 |
| 2.3.1 选择适宜的藻液浓度 | 第27-28页 |
| 2.3.2 确定三氣生师选髙产油脂栅藻的浓度 | 第28页 |
| 2.3.3 硫酸二乙靡诱变 | 第28页 |
| 2.3.4 紫外诱变 | 第28-29页 |
| 2.3.5 遗传稳定性试驗 | 第29页 |
| 2.4 尼罗红焚光染色 | 第29页 |
| 2.5 纯化藻种 | 第29页 |
| 2.6 生长測定 | 第29页 |
| 2.7 培养基中剩余銷酸钠浓度的測定 | 第29-30页 |
| 2.8 氯仿-甲酵法提取粗油脂 | 第30页 |
| 2.9 脂肪酸成分分析 | 第30页 |
| 2.10 流式细胞仪分选藻细胞 | 第30-31页 |
| 2.11 测定淀粉含量 | 第31-32页 |
| 2.12 提取栅藻基因组DNA | 第32页 |
| 2.13 设计简并引物 | 第32-33页 |
| 2.14 简并扩增目的片段 | 第33页 |
| 2.15 PCR产物的回收、连接和转化 | 第33-34页 |
| 2.16 筛选阳性克隆子 | 第34-35页 |
| 2.17 构建重组质粒 | 第35-36页 |
| 2.18 基因枪介导转化法 | 第36页 |
| 2.19 实验数据处理 | 第36-38页 |
| 第三章 两步缺氮法培养栅藻 | 第38-60页 |
| 第一节 培养基和藻种的选择 | 第38-43页 |
| 3.1.1 培养基的选择 | 第38-39页 |
| 3.1.2 藻种的选择 | 第39-41页 |
| 3.1.3 藻种的纯化 | 第41页 |
| 3.1.4 栅藻FACHB-14的生长曲线 | 第41-43页 |
| 第二节 两步培养法提高栅藻的生物量及油脂含量 | 第43-48页 |
| 3.2.1 在基本培养基中光强对栅藻积累生物量的影响 | 第43-45页 |
| 3.2.2 在完全缺氮条件下高光光强对栅藻积累油脂的影响 | 第45-48页 |
| 3.2.3 两步法积累栅藻生物量和油脂含量的情况 | 第48页 |
| 第三节 两步缺氮法提高栅藻的油脂含量 | 第48-57页 |
| 3.3.1 栅藻的纯化及筛选 | 第48-49页 |
| 3.3.2 在低光强下硝酸钠对栅藻生物量和油脂含量的影响 | 第49-51页 |
| 3.3.3 在完全缺氮条件下光强对栅藻积累油脂的影响 | 第51页 |
| 3.3.4 在高光强条件下硝酸钠对栅藻生物量和油脂含量的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.5 不同培养方式对栅藻油脂含量的影响 | 第52-55页 |
| 3.3.6 两步缺氮法培养栅藻 | 第55-56页 |
| 3.3.7 在HL、BG11(-N)条件下不同接种量对栅藻积累油脂的影响 | 第56页 |
| 3.3.8 脂肪酸成分的分析 | 第56-57页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 栅藻高产油脂藻株的诱变筛选 | 第60-76页 |
| 第一节 三氯生结合诱变筛选高产油脂的藻株 | 第60-65页 |
| 4.1.1 选择适宜的藻液浓度 | 第60页 |
| 4.1.2 三氯生最适抑制浓度的确定 | 第60-61页 |
| 4.1.3 DES诱变处理 | 第61-63页 |
| 4.1.4 紫外诱变处理 | 第63-64页 |
| 4.1.5 结合流式筛选验证三氯生的筛选效果 | 第64-65页 |
| 第二节 流式细胞仪筛选高产油脂的藻株 | 第65-73页 |
| 4.2.1 尼罗红的染色条件 | 第65-66页 |
| 4.2.2 细胞大小及结构与油脂积累的关系 | 第66-68页 |
| 4.2.3 紫外诱变结合流式细胞仪筛选高产油脂藻株 | 第68-70页 |
| 4.2.4 分析流式细胞仪分选结果 | 第70-72页 |
| 4.2.5 筛选高产藻株 | 第72-73页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第73-76页 |
| 第五章 构建AGPase表达基因缺失藻株 | 第76-86页 |
| 第一节 构建重组质粒 | 第76-83页 |
| 5.1.1 测定栅藻积累的淀粉含量 | 第76-77页 |
| 5.1.2 提取栅藻基因组DNA | 第77页 |
| 5.1.3 设计简并引物 | 第77-78页 |
| 5.1.4 扩增目的片段 | 第78页 |
| 5.1.5 筛选阳性克隆子 | 第78-79页 |
| 5.1.6 测定目的片段序列 | 第79-81页 |
| 5.1.7 重组质粒的构建 | 第81-83页 |
| 第二节 筛选AGPase表达基因缺失藻株 | 第83页 |
| 5.2.1 筛选遗传突变株 | 第83页 |
| 第三节 小结 | 第83-86页 |
| 第六章 结论与展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 个人简历 | 第100-101页 |
