| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语中英文对照表 | 第11-12页 |
| 第一章 鱼类抗菌肽Hepcidin结构特征与表达变化 | 第12-20页 |
| 1.1 鱼类hepcidin基因序列与结构 | 第12-13页 |
| 1.2 鱼体内hepcidin基因变体及其功能 | 第13-15页 |
| 1.2.1 Hepcidin基因变体的功能差异性 | 第14页 |
| 1.2.2 Hepcidin基因变体具组织表达特异性和抗菌选择性 | 第14-15页 |
| 1.3. 鱼类hepcidin基因的表达调控 | 第15-18页 |
| 1.3.1 病原刺激对Hepcidin表达的影响 | 第15-16页 |
| 1.3.2 细胞铁超载对Hepcidin表达的影响 | 第16-17页 |
| 1.3.3 低氧和贫血对Hepcidin表达的影响 | 第17-18页 |
| 1.3.4 鱼类不同发育阶段Hepcidin的表达变化 | 第18页 |
| 1.4. Hepcidin研究展望 | 第18-19页 |
| 研究的目的和意义 | 第19页 |
| 技术路线图 | 第19-20页 |
| 第二章 淇河鲫hepcidin基因cDNA全长的扩增及序列分析 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验动物及试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 淇河鲫各组织样品的准备与RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 Hepcidin cDNA中间片段的克隆及 5′和 3′端的扩增 | 第22-25页 |
| 2.2.3 序列分析 | 第25页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第25-34页 |
| 2.3.1 总RNA的提取鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.2 淇河鲫hepcidin cDNA全长的克隆及鉴定 | 第26-29页 |
| 2.3.3 淇河鲫hepcidin基因序列分析和比对 | 第29-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 淇河鲫hepcidin基因对细菌及其类似物的表达响应 | 第35-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.1 实验动物及试剂 | 第35页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 RNA的提取与保存 | 第35页 |
| 3.2.2 淇河鲫各组织cDNA的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.3 引物设计及合成 | 第36页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第37-39页 |
| 3.3.1 健康淇河鲫各组织hepcidin mRNA的组织分布 | 第37-38页 |
| 3.3.2 淇河鲫腹腔注射嗜水气单胞菌和LPS后hepcidin mRNA水平的变化 | 第38-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 淇河鲫Hepcidin在大肠杆菌BL-21中的表达 | 第42-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 实验菌株及试剂 | 第42页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 4.2.1 淇河鲫hepcidin ORF的PCR扩增及纯化 | 第42-43页 |
| 4.2.2 质粒pET-32a(+)的提取及鉴定 | 第43-44页 |
| 4.2.3 纯化后PCR产物及质粒pET-32a(+)的双酶切与纯化 | 第44页 |
| 4.2.4 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第44页 |
| 4.2.5 融合蛋白的诱导表达 | 第44-45页 |
| 4.2.6 SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第45-46页 |
| 4.3 实验结果 | 第46-49页 |
| 4.3.1 淇河鲫hepcidin编码区cDNA的PCR扩增及鉴定 | 第46-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录A 主要试剂和溶液配制 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文目录 | 第59-60页 |
