| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 养羊业发展现状 | 第11页 |
| 1.2 羊毛结构及其形成 | 第11-13页 |
| 1.3 羊毛生长发育的相关基因 | 第13-14页 |
| 1.4 真核翻译起始因子及延伸因子 | 第14-19页 |
| 1.4.1 真核翻译起始因子 | 第14-18页 |
| 1.4.2 真核翻译延伸因子 | 第18-19页 |
| 第2章 绵羊EIF3L、EIF3H、EEF1D基因克隆、原核表达载体构建及分析 | 第19-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-27页 |
| 2.1.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第20-27页 |
| 2.2 结果 | 第27-44页 |
| 2.2.1 中国美利奴羊成纤维细胞总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 中国美利奴羊EIF3L、EIF3H、EEF1D基因的PCR扩增 | 第28页 |
| 2.2.3 重组质粒的菌体PCR和双酶切鉴定 | 第28-31页 |
| 2.2.4 中国美利奴羊EIF3L、EIF3H、EEF1D基因的序列分析 | 第31-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-46页 |
| 2.3.1 总RNA提取 | 第44页 |
| 2.3.2 EIF3L、EIF3H、EEF1D基因克隆及载体构建 | 第44-45页 |
| 2.3.3 序列分析及生物信息学预测 | 第45-46页 |
| 2.4 小结 | 第46-47页 |
| 第3章 绵羊EIF3L、EIF3H、EEF1D基因原核表达 | 第47-59页 |
| 3.1 材料和方法 | 第47-52页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第48-52页 |
| 3.2 结果 | 第52-57页 |
| 3.2.1 绵羊EIF3L、EIF3H、EEF1D基因的诱导表达 | 第52-53页 |
| 3.2.2 EIF3L、EIF3H、EEF1D蛋白表达形式的确定 | 第53-55页 |
| 3.2.3 Western blot检测目的蛋白 | 第55-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-58页 |
| 3.3.1 目的蛋白原核诱导表达 | 第57页 |
| 3.3.2 重组蛋白表达形式的确定 | 第57-58页 |
| 3.3.3 抗体的选择 | 第58页 |
| 3.3.4 Western blotting检测 | 第58页 |
| 3.4 小结 | 第58-59页 |
| 第4章 绵羊EIF3L、EIF3H、EEF1D基因组织表达检测 | 第59-69页 |
| 4.1 材料和方法 | 第59-63页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第59页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第59-63页 |
| 4.2 结果 | 第63-67页 |
| 4.2.1 组织总RNA提取 | 第63页 |
| 4.2.2 组织蛋白提取及定量 | 第63-65页 |
| 4.2.3 各组织中EIF3L、EIF3H、EEF1D基因mRNA表达含量 | 第65-66页 |
| 4.2.4 Western Blot检测目的蛋白 | 第66-67页 |
| 4.3 讨论 | 第67-68页 |
| 4.4 小结 | 第68-69页 |
| 第5章 绵羊EIF3L、EIF3H、EEF1D基因真核表达检测 | 第69-85页 |
| 5.1 材料和方法 | 第69-75页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第69-70页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第70-75页 |
| 5.2 结果 | 第75-82页 |
| 5.2.1 真核表达载体构建 | 第75-77页 |
| 5.2.2 成纤维细胞培养 | 第77-78页 |
| 5.2.3 成纤维细胞转染 | 第78-79页 |
| 5.2.4 细胞总RNA提取 | 第79页 |
| 5.2.5 细胞蛋白提取及定量 | 第79-80页 |
| 5.2.6 mRNA表达量检测 | 第80-82页 |
| 5.2.7 目的蛋白表达含量 | 第82页 |
| 5.3 讨论 | 第82-84页 |
| 5.3.1 真核重组表达载体的构建 | 第82-83页 |
| 5.3.2 中国美利奴羊原代细胞培养 | 第83页 |
| 5.3.3 重组质粒成纤维细胞转染及表达 | 第83-84页 |
| 5.3.4 EIF3L、EIF3H、EEF1D对羊毛生长发育相关基因的影响 | 第84页 |
| 5.4 小结 | 第84-85页 |
| 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 附录 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 作者简介 | 第95页 |
