| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第1章 综述 | 第12-19页 |
| 1.1 结核分枝杆菌 | 第12页 |
| 1.2 结核病流行病学 | 第12-13页 |
| 1.3 PPE家族蛋白的组成及结构特点 | 第13-14页 |
| 1.4 PPE家族蛋白的亚细胞定位及表达特征 | 第14-15页 |
| 1.5 ESAT-6 蛋白 | 第15-16页 |
| 1.6 ESX分泌系统 | 第16-17页 |
| 1.7 毒力因子 | 第17-18页 |
| 1.8 PPE家族蛋白的免疫学功能 | 第18-19页 |
| 第2章 引言 | 第19-20页 |
| 第3章 实验材料和方法 | 第20-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 3.1.1 实验菌株、质粒和细胞 | 第20页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 3.1.3 培养基与主要溶液的配置 | 第21-22页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 3.2.1 结核分枝杆菌Rv2770c（PPE44）基因PCR引物的设计与合成 | 第23页 |
| 3.2.2 结核分枝杆菌Rv2770c（PPE44）基因的扩增 | 第23页 |
| 3.2.3 Rv2770c PCR扩增产物直接回收 | 第23页 |
| 3.2.4 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第23-24页 |
| 3.2.5 大肠杆菌转化方法（热激法） | 第24页 |
| 3.2.6 Rv2770c（PPE44）重组质粒的构建 | 第24-26页 |
| 3.2.7 重组质粒的提取 | 第26页 |
| 3.2.8 Rv2770c（PPE44）基因重组耻垢分支杆菌mc2155的构建和鉴定 | 第26-28页 |
| 3.2.9 Rv2770c（PPE44）重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的亚细胞定位分析 | 第28页 |
| 3.2.10 菌落形态观察 | 第28页 |
| 3.2.11 扫描电镜观察菌落形态 | 第28-29页 |
| 3.2.12 耻垢分枝杆菌生物膜形成实验 | 第29页 |
| 3.2.13 滑动能力实验 | 第29页 |
| 3.2.14 重组耻垢分枝杆菌过表达对氧化压力的敏感性检测 | 第29-30页 |
| 3.2.15 重组耻垢分枝杆菌过表达对酸性条件及酸性亚硝酸钠（活性氮）的敏感性检测 | 第30页 |
| 3.2.16 重组耻垢分枝杆菌过表达对SDS的敏感性检测 | 第30-31页 |
| 3.2.17 耻垢分枝杆菌脂肪酸分析 | 第31页 |
| 3.2.18 重组耻垢分枝杆菌过表达侵染巨噬细胞（RAW264.7 和THP-1）后的胞内存活率及炎症细胞因子检测 | 第31-35页 |
| 3.2.19 数据处理 | 第35-36页 |
| 第4章 结果与分析 | 第36-49页 |
| 4.1 RV2770C基因的PCR扩增和鉴定 | 第36页 |
| 4.2 重组耻垢分枝杆菌阳性克隆筛选 | 第36-37页 |
| 4.3 RV2770C蛋白在耻垢分枝杆菌中成功表达 | 第37-38页 |
| 4.4 RV2770C定位在耻垢分枝杆菌细胞表面 | 第38页 |
| 4.5 RV2770C过表达对重组耻垢分枝杆菌生长快慢无影响 | 第38-39页 |
| 4.6 滑动能力实验 | 第39-40页 |
| 4.7 RV2770C过表达改变耻垢分枝杆菌菌落形态，对生物膜形成没有影响 | 第40-41页 |
| 4.8 耻垢分枝杆菌重组菌和空载菌脂肪酸检测 | 第41页 |
| 4.9 RV2770C过表达增强耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活 | 第41-43页 |
| 4.10 RV2770C过表达增强耻垢分枝杆菌在环境压力条件下的存活 | 第43-44页 |
| 4.11 RV2770C过表达增强耻垢分枝杆菌在表面压力条件下的存活 | 第44-45页 |
| 4.12 表达RV2770C蛋白的重组耻垢分枝杆菌促进巨噬细胞死亡 | 第45-47页 |
| 4.13 表达RV2770C蛋白的重组耻垢分枝杆菌增加巨噬细胞中细胞因子IL-6 和IL-12 P40的分泌 | 第47-48页 |
| 4.14 表达RV2770C蛋白的重组耻垢分枝杆菌依赖NF-ΚB， ERK和P38途径调控巨噬细胞分泌IL-6 和IL-12 P40 | 第48-49页 |
| 第5章 结论与展望 | 第49-53页 |
| 5.1 实验结论与分析 | 第49-52页 |
| 5.2 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 在学期间所发表的文章 | 第61页 |
