新霉素荧光偏振检测方法的建立及应用
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 我国食品安全现状 | 第11页 |
| 1.2 兽药残留污染现状 | 第11-12页 |
| 1.3 氨基糖苷类药物概述 | 第12-15页 |
| 1.3.1 氨基糖苷类药物的分类 | 第12-15页 |
| 1.4 新霉素概述 | 第15-16页 |
| 1.4.1 新霉素的理化性质 | 第15页 |
| 1.4.2 新霉素的应用 | 第15页 |
| 1.4.3 新霉素残留的危害 | 第15-16页 |
| 1.5 新霉素残留的检测方法 | 第16-21页 |
| 1.5.1 微生物检测方法 | 第16页 |
| 1.5.2 理化检验方法 | 第16-19页 |
| 1.5.3 免疫检测方法 | 第19-21页 |
| 1.6 荧光偏振检测方法概述 | 第21-22页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 1.8 本研究的主要内容 | 第23-25页 |
| 1.8.1 人工抗原的合成与鉴定 | 第23页 |
| 1.8.2 新霉素单克隆抗体的制备及鉴定 | 第23页 |
| 1.8.3 新霉素荧光偏振检测方法的建立 | 第23-25页 |
| 第2章 新霉素人工抗原的制备及多抗特性鉴定 | 第25-33页 |
| 2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 试剂、溶液及仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26页 |
| 2.3 新霉素人工抗原的合成 | 第26-28页 |
| 2.3.1 新霉素人工抗原的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.2 新霉素多抗血清的免疫学特性测定 | 第27-28页 |
| 2.4 结果与分析 | 第28-31页 |
| 2.4.1 新霉素人工抗原的鉴定结果 | 第28-29页 |
| 2.4.2 多抗血清的鉴定结果 | 第29-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-32页 |
| 2.5.1 关于新霉素人工抗原合成方法的选择 | 第31-32页 |
| 2.5.2 载体蛋白的选择 | 第32页 |
| 2.6 本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 新霉素单克隆抗体的制备及鉴定 | 第33-43页 |
| 3.1 材料 | 第33-34页 |
| 3.2 方法 | 第34-38页 |
| 3.2.1 建立杂交瘤细胞株 | 第34-36页 |
| 3.2.2 制备单克隆抗体 | 第36-37页 |
| 3.2.3 新霉素单克隆抗体免疫学特性鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.3.1 抗体纯化效果鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.2 单抗效价测定结果 | 第39页 |
| 3.3.3 单抗灵敏性测定结果 | 第39-40页 |
| 3.3.4 新霉素单抗特异性 | 第40页 |
| 3.3.5 亚型鉴定结果 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.4.1 细胞融合时关于细胞的选择 | 第41页 |
| 3.4.2 PEG的选择和使用 | 第41-42页 |
| 3.4.3 融合细胞的筛选 | 第42页 |
| 3.4.4 单克隆抗体的大量生产 | 第42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 第4章 新霉素荧光偏振检测方法的建立 | 第43-55页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.2 主要溶液配置 | 第43-44页 |
| 4.1.3 标准储备液的配置 | 第44页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第44页 |
| 4.2 方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 示踪物的合成 | 第44-45页 |
| 4.2.2 示踪物的分离纯化 | 第45页 |
| 4.2.3 示踪物的鉴定 | 第45页 |
| 4.2.4 示踪物和抗体工作浓度的优化 | 第45页 |
| 4.2.5 反应体系pH的优化 | 第45-46页 |
| 4.2.6 荧光偏振检测方法的建立 | 第46页 |
| 4.2.7 新霉素荧光偏振检测方法的特异性 | 第46页 |
| 4.2.8 样本的处理方法 | 第46页 |
| 4.2.9 添加回收 | 第46页 |
| 4.3 结果分析 | 第46-53页 |
| 4.3.1 示踪物的合成及分离纯化 | 第46-47页 |
| 4.3.2 示踪物的鉴定结果 | 第47-49页 |
| 4.3.3 示踪物及抗体工作浓度的优化结果 | 第49-51页 |
| 4.3.4 缓冲液pH优化结果 | 第51页 |
| 4.3.5 建立新霉素荧光偏振检测的标准曲线 | 第51-52页 |
| 4.3.6 特异性检测 | 第52-53页 |
| 4.3.7 牛奶中添加回收 | 第53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-54页 |
| 4.5 小结 | 第54-55页 |
| 第5章 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第63页 |
