| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·蛋白质与蛋白质间相互作用的研究进展 | 第12-15页 |
| ·蛋白质相互作用的分子基础 | 第12-14页 |
| ·蛋白质相互作用研究方法 | 第14-15页 |
| ·展望 | 第15页 |
| ·酵母双杂交技术的应用及其发展 | 第15-19页 |
| ·酵母双杂交技术的原理 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交技术的应用 | 第16-18页 |
| ·酵母双杂交技术的发展和展望 | 第18-19页 |
| ·芸苔属SI反应决定因子SCR与SRK相互作用研究进展 | 第19-22页 |
| ·芸苔属S位点基因的研究进展 | 第20页 |
| ·SI决定因子的鉴定及其功能的研究进展 | 第20-21页 |
| ·SCR与SRK相互作用研究进展 | 第21-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-24页 |
| 第三章 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·植物材料和菌株 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第24-25页 |
| ·DNA提取试剂和试剂盒 | 第24页 |
| ·RNA提取试剂和试剂盒 | 第24页 |
| ·PCR扩增试剂和试剂盒 | 第24-25页 |
| ·酵母双杂交系统及其表达载体构建试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·核酸的提取 | 第26-27页 |
| ·甘蓝叶片总DNA的提取 | 第26页 |
| ·甘蓝花的总RNA的提取和总cDNA的获得 | 第26-27页 |
| ·SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)(SRK胞外域)的RT-PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·SCR_(B3-s)基因和eSRK_(B3-s)(SRK胞外域)基因的不同片段长度扩增区的引物设计 | 第27页 |
| ·SCR_(B3-s)基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·eSRK_(B3-s)基因的扩增 | 第28页 |
| ·酵母双杂交重组表达载体的构建 | 第28-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28页 |
| ·基因目的片段的回收 | 第28-29页 |
| ·酵母双杂交表达载体与目的基因片段的限制性内切酶消化 | 第29页 |
| ·酵母双杂交表达载体与目的片段的链接 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第30页 |
| ·重组表达质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第30页 |
| ·转化子的筛选和菌液PCR扩增鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的提取 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定和序列分析 | 第32页 |
| ·酵母双杂交系统鉴定SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)的相互作用 | 第32-34页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·酵母感受态细胞的转化 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的毒性及其自激活检测 | 第33页 |
| ·酵母双杂交检测 | 第33-34页 |
| 第四章 结果与分析 | 第34-48页 |
| ·甘蓝核酸的提取及总cDNA的获得 | 第34-35页 |
| ·甘蓝总DNA的提取 | 第34页 |
| ·甘蓝总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·甘蓝总cDNA的获得 | 第35页 |
| ·SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)(SRK胞外域)的RT-PCR扩增分析 | 第35-36页 |
| ·不同截短片段的SCR_(B3-s)基因克隆分析 | 第35-36页 |
| ·不同截短片段的eSRK_(B3-s)(SRK胞外域)基因克隆分析 | 第36页 |
| ·酵母双杂交重组表达载体的鉴定和序列分析 | 第36-41页 |
| ·重组诱饵质粒pGBKT7-SCR_(B3-s)的鉴定及序列分析 | 第36-39页 |
| ·重组AD质粒pGADT7-eSRK_(B3-s)的鉴定及序列分析 | 第39-41页 |
| ·重组质粒的毒性检测分析 | 第41-42页 |
| ·重组诱饵质粒pGBKT7-SCR_(B3-s)的毒性检测 | 第41页 |
| ·重组表达质粒pGADT7-eSRK_(B3-s)的毒性检测分析 | 第41-42页 |
| ·酵母双杂交重组质粒的自激活检测分析 | 第42-43页 |
| ·SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)片段间相互作用检测分析 | 第43-48页 |
| ·SCR_(B3)与eSRK_(B3)蛋白相互作用的生物信息学分析 | 第43-44页 |
| ·酵母双杂交系统鉴定SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)片段间相互作用分析 | 第44-48页 |
| 第五章 讨论 | 第48-52页 |
| ·不同截短片段SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)基因的结构特征 | 第48页 |
| ·酵母双杂交Gold系统的应用 | 第48-50页 |
| ·SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)相互作用区域的探讨 | 第50页 |
| ·解决的科学问题及意义 | 第50-52页 |
| 第六章 结论 | 第52-54页 |
| ·采用PCR、RT-PCR及其他分子生物学方法成功克隆了不同截短长度SCR_(B3-s)、eSRK_(B3-s)基因 | 第52页 |
| ·利用分子克隆技术成功构建了酵母双杂交重组表达载体 | 第52页 |
| ·酵母双杂交重组表达载体无毒性和自激活作用发生 | 第52页 |
| ·SCR_(B3-s)与eSRK_(B3-s)片段间相互作用区域的鉴定 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第64-66页 |
| 在读期间参与的科研项目 | 第66页 |
