| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 植物中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的功能研究 | 第12-17页 |
| ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶与光合作用 | 第12-14页 |
| ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶与环境胁迫 | 第14-15页 |
| ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶与蛋白质/脂类代谢 | 第15-16页 |
| ·拟南芥中的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 | 第16-17页 |
| 2 RNA介导的植物基因沉默技术 | 第17-22页 |
| ·共抑制和反义RNA技术 | 第18-19页 |
| ·hpRNAi技术 | 第19-20页 |
| ·病毒诱导的基因沉默(VIGS) | 第20-21页 |
| ·人工小RNA技术 | 第21-22页 |
| ·人工ta-siRNA技术 | 第22页 |
| 3 本研究的内容和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 拟南芥植物型PEPC基因amiRNA表达载体的构建及转化拟南芥 | 第24-33页 |
| 1 材料和方法 | 第24-28页 |
| ·植物材料、菌株和载体 | 第24页 |
| ·酶和试剂 | 第24-25页 |
| ·拟南芥的种植 | 第25页 |
| ·amiRNA表达载体的构建 | 第25-28页 |
| ·amiRNA的引物设计、扩增及回收 | 第25-26页 |
| ·克隆载体pGEM-amiAtppc123的构建及鉴定 | 第26-27页 |
| ·表达载体pFGC-amiAtppc123的构建及转化农杆菌 | 第27-28页 |
| ·转化拟南芥 | 第28页 |
| ·农杆菌的扩大培养 | 第28页 |
| ·花序浸染法转化拟南芥 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·amiRNA与靶基因的结合位点 | 第28-29页 |
| ·amiRNA前体片段的克隆 | 第29-30页 |
| ·克隆载体的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·表达载体的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·农杆菌的PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 转化植株的分子鉴定 | 第33-41页 |
| 1 材料和方法 | 第33-37页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·酶和试剂 | 第33页 |
| ·转化植株的抗性鉴定 | 第33页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第33-34页 |
| ·CTAB法小量提取基因组DNA | 第33-34页 |
| ·引物设计、PCR反应体系及扩增程序 | 第34页 |
| ·转化植株amiRNA的表达分析 | 第34-36页 |
| ·Trizol法提取植物组织总RNA | 第34-35页 |
| ·amiRNA的引物设计、逆转录及半定量RT-PCR | 第35-36页 |
| ·转化植株Atppc1、Atppc2和Atppc3的表达分析 | 第36-37页 |
| ·总RNA的提取及逆转录 | 第36页 |
| ·PCR引物的设计 | 第36页 |
| ·PCR反应体系和程序 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-39页 |
| ·转化植株的除草剂筛选 | 第37页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第37-38页 |
| ·转化植株中amiRNA的表达 | 第38-39页 |
| ·转化植株中Atppc1、Atppc2和Atppc3的表达 | 第39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 转化植株的特性分析 | 第41-47页 |
| 1 材料和方法 | 第41-43页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·酶和试剂 | 第41页 |
| ·盐胁迫下Atppc1、Atppc2和Atppc3的表达分析 | 第41-42页 |
| ·材料准备 | 第41-42页 |
| ·总RNA的提取及逆转录 | 第42页 |
| ·PCR反应体系和程序 | 第42页 |
| ·种子含油量的测定 | 第42页 |
| ·材料准备 | 第42页 |
| ·测定方法 | 第42页 |
| ·种子脂肪酸组分的测定 | 第42-43页 |
| ·材料准备 | 第42-43页 |
| ·测定方法 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-45页 |
| ·盐胁迫下Atppc1、Atppc2和Atppc3的表达 | 第43-44页 |
| ·转化植株种子的含油量分析 | 第44-45页 |
| ·转化植株种子脂肪酸组分的分析 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第60-61页 |
