| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 硼在植物体中的生理功能 | 第13-15页 |
| 2 植物对硼的吸收和转运 | 第15-17页 |
| ·硼的跨膜运输 | 第15-17页 |
| ·硼的木质部和韧皮部运输 | 第17页 |
| 3 植物对硼逆境耐性的基因工程 | 第17-20页 |
| ·植物对缺硼耐性的基因工程 | 第17-19页 |
| ·植物对硼毒害的耐性及其遗传调控 | 第19-20页 |
| 4 本项研究的内容和目的意义 | 第20-22页 |
| 第二章 甘蓝型油菜硼转运蛋白基因的克隆 | 第22-35页 |
| 1 材料与方法 | 第22-28页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和培养基 | 第22页 |
| ·酶和其他化学试剂 | 第22-23页 |
| ·主要方法 | 第23-28页 |
| ·RT-PCR方法克隆油菜硼转运蛋白基因 | 第23-25页 |
| ·油菜硼转运蛋白基因gDNA的获得 | 第25-26页 |
| ·与载体连接并转化大肠杆菌 | 第26-27页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-33页 |
| ·油菜根系总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·油菜硼转运蛋白基因的RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·pMD-BnBOR质粒DNA检测 | 第30-31页 |
| ·油菜硼转运蛋白基因gDNA的PCR扩增及重组质粒检测 | 第31-32页 |
| ·油菜硼转运蛋白基因测序结果 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 油菜硼转运蛋白基因的生物信息学分析 | 第35-42页 |
| 1 材料与方法 | 第35页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35页 |
| 2 分析结果 | 第35-40页 |
| ·BnBOR蛋白理化性质的预测 | 第35-36页 |
| ·BnBOR蛋白疏水性轮廓分析 | 第36-37页 |
| ·BnBOR蛋白功能结构域分析结果 | 第37-38页 |
| ·BnBOR与其他物种硼转运蛋白基因的同源性比较和系统发育分析 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 油菜硼转运蛋白基因拷贝数和在不同器官中的表达谱分析 | 第42-49页 |
| 1 材料与方法 | 第42-46页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·酶和其他化学试剂 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| ·油菜硼转运蛋白基因拷贝数分析 | 第42-45页 |
| ·油菜硼转运蛋白基因在不同器官中的表达谱分析 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-47页 |
| ·甘蓝型油菜硼转运蛋白基因的Southern杂交分析 | 第46-47页 |
| ·油菜不同器官中硼转运蛋白基因的RT-PCR分析 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 油菜硼转运蛋白基因过量表达载体的构建及其遗传转化 | 第49-60页 |
| 1 材料与方法 | 第49-54页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49-50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·pFGC-5941-BnBOR植物表达载体的构建 | 第50-53页 |
| ·农杆菌介导油菜转化 | 第53-54页 |
| ·转化植株PCR检测 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·油菜硼转运蛋白基因过量表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·pFGC-5941-BnBOR质粒DNA检测 | 第55-57页 |
| ·转化植株的获得及其PCR检测 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
